| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 1.文献综述 | 第13-25页 |
| 1.1 猪链球菌病概述 | 第13-15页 |
| 1.1.1 病原学 | 第13-14页 |
| 1.1.2 流行病学 | 第14-15页 |
| 1.1.3 临床症状 | 第15页 |
| 1.1.4 病理特征 | 第15页 |
| 1.2 SS2新型毒力因子研究进展 | 第15-22页 |
| 1.2.1 双组份信号转导系统(TCSTS) | 第16-18页 |
| 1.2.2 转录调节因子 | 第18-19页 |
| 1.2.3 酶类 | 第19-21页 |
| 1.2.4 其他毒力相关因子 | 第21-22页 |
| 1.3 XRE家族转录调节因子研究进展 | 第22-25页 |
| 1.3.1 链球菌属XRE家族转录调节因子 | 第23-24页 |
| 1.3.2 其他菌属XRE家族转录调节因子 | 第24-25页 |
| 2.研究目的与意义 | 第25-26页 |
| 3.材料和方法 | 第26-42页 |
| 3.1 菌株、质粒和培养条件 | 第26-27页 |
| 3.2 引物 | 第27-28页 |
| 3.3 实验小鼠 | 第28-29页 |
| 3.4 主要试剂 | 第29页 |
| 3.5 主要培养基及试剂的配制 | 第29-30页 |
| 3.6 主要实验器材 | 第30页 |
| 3.7 转录因子PrlP在SS2致病中作用的研究 | 第30-39页 |
| 3.7.1 重组质粒pSET4s-ΔprlP的构建 | 第30-33页 |
| 3.7.2 SS2prlP基因缺失突变株的构建 | 第33-34页 |
| 3.7.3 SS2prlP基因回补质粒及回补菌株构建 | 第34-35页 |
| 3.7.4 SS2野生株和prlP基因突变株体外生长特性比较 | 第35页 |
| 3.7.5 SS2野生株和prlP基因突变株形态特性比较 | 第35-36页 |
| 3.7.6 SS2野生株和prlP基因突变株溶血特性比较 | 第36页 |
| 3.7.7 prlP基因突变株极性效应检测 | 第36-37页 |
| 3.7.8 突变株ΔprlP及CΔprlP致病性实验 | 第37-38页 |
| 3.7.9 感染小鼠组织载菌量测定 | 第38页 |
| 3.7.10 感染小鼠血液生化指标检测 | 第38-39页 |
| 3.7.11 感染小鼠血清中细胞因子检测 | 第39页 |
| 3.8 影响SS2毒力PrlP关键结构域的研究 | 第39-41页 |
| 3.8.1 SS2prlP基因N-端及C-端缺失重组质粒及缺失突变株的构建 | 第39页 |
| 3.8.2 SS2野生株和prlP基因突变株生物学特性比较 | 第39页 |
| 3.8.3 突变株ΔN(prlP)及ΔC(prlP)致病性实验 | 第39页 |
| 3.8.4 SS2prlP基因N-端回补质粒及回补菌株构建 | 第39-40页 |
| 3.8.5 SS2野生株和prlP基因突变株生物学特性比较 | 第40页 |
| 3.8.6 SS2野生株和prlP基因突变株体外抗吞噬能力比较 | 第40页 |
| 3.8.7 突变株CΔN(prlP)致病性实验 | 第40-41页 |
| 3.8.8 感染小鼠组织载菌量、血液生化及细胞因子检测 | 第41页 |
| 3.8.9 感染小鼠组织病理学观察 | 第41页 |
| 3.9 RNAseq鉴定PrlP转录调节因子功能 | 第41页 |
| 3.10 统计分析 | 第41-42页 |
| 4.结果与分析 | 第42-76页 |
| 4.1 对SS2中PrlP的生物信息学分析 | 第42页 |
| 4.2 转录因子PrlP在SS2致病中发挥重要作用 | 第42-52页 |
| 4.2.1 SS2prlP基因缺失株的构建及鉴定 | 第42-44页 |
| 4.2.2 SS2prlP基因回补株的构建及鉴定 | 第44页 |
| 4.2.3 SS2prlP基因突变株与野生株生物学特性比较 | 第44-47页 |
| 4.2.4 prlP基因缺失不影响其上下游基因表达 | 第47页 |
| 4.2.5 突变株ΔprlP及CΔprlP致病性实验实验 | 第47-48页 |
| 4.2.6 PrlP影响SS2在小鼠体内定植 | 第48-49页 |
| 4.2.7 PrlP影响SS2诱导小鼠产生炎性因子的能力 | 第49-51页 |
| 4.2.8 PrlP影响SS2诱导小鼠组织损伤的能力 | 第51页 |
| 4.2.9 小结 | 第51-52页 |
| 4.3 PrlP蛋白N端结构域为其影响SS2毒力的关键结构域 | 第52-66页 |
| 4.3.1 SS2prlP基因N-端及C-端缺失突变株的构建及鉴定 | 第52-53页 |
| 4.3.2 SS2prlP基因N-端及C-端缺失突变株的生物学特性 | 第53-54页 |
| 4.3.3 突变株ΔN(prlP)及ΔC(prlP)致病性实验 | 第54-55页 |
| 4.3.4 SS2prlP基因N-端回补菌株构建及鉴定 | 第55页 |
| 4.3.5 SS2prlP基因N-端回补株的生物学特性 | 第55-59页 |
| 4.3.6 PrlPN-端结构域影响SS2体外抗吞噬能力 | 第59页 |
| 4.3.7 突变株CΔN(prlP)致病性实验 | 第59-60页 |
| 4.3.8 PrlPN-端结构域影响SS2在小鼠体内定植 | 第60-61页 |
| 4.3.9 PrlPN-端结构域影响SS2诱导小鼠产生炎性因子的能力 | 第61-63页 |
| 4.3.10 PrlPN-端结构域影响SS2诱导小鼠组织损伤的能力 | 第63-65页 |
| 4.3.11 小结 | 第65-66页 |
| 4.4 RNAseq结果表明PrlP为SS2中全局性转录调节因子 | 第66-76页 |
| 讨论 | 第76-79页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
