| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第13-39页 |
| 1 EB病毒基因表达模式的检测技术研究进展 | 第13-30页 |
| 1.1 EBV分子生物学基础 | 第13-17页 |
| 1.2 EBV LMP2A的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3 EBV基因表达模式与相关疾病 | 第18-22页 |
| 1.4 EBV基因表达模式的检测 | 第22-23页 |
| 1.5 环介导等温扩增技术 | 第23-30页 |
| 2 慢性肝病人群中EBV基因表达模式的研究 | 第30-34页 |
| 2.1 慢性肝病 | 第30-32页 |
| 2.2 EBV流行病学 | 第32-33页 |
| 2.3 EBV与慢性肝炎及肝损伤 | 第33页 |
| 2.4 EBV与肝细胞癌 | 第33-34页 |
| 3 慢病毒载体及其介导的RNAi的研究进展 | 第34-38页 |
| 3.1 慢病毒载体的研究进展 | 第35-37页 |
| 3.2 RNA干扰(RNAi) | 第37页 |
| 3.3 慢病毒载体及其介导的RNAi的应用前景 | 第37-38页 |
| 本文研究思路 | 第38-39页 |
| 第二章 一步法逆转录环介导等温扩增快速检测方法的建立 | 第39-72页 |
| 1 材料与方法 | 第39-51页 |
| 1.1 主要实验仪器 | 第39页 |
| 1.2 主要耗材及试剂 | 第39页 |
| 1.3 毒株与细胞 | 第39-40页 |
| 1.4 样本采集与筛选 | 第40页 |
| 1.5 RT-LAMP反应样本制备 | 第40-41页 |
| 1.6 常规RT-PCR、RT-LAMP、RT-qPCR引物设计 | 第41-45页 |
| 1.7 标准品和对照品的制备 | 第45-46页 |
| 1.8 常规RT-PCR、RT-qPCR检测EBV基因产物 | 第46-48页 |
| 1.9 RT-LAMP检测EBV基因产物方法的建立 | 第48-50页 |
| 1.10 RT-LAMP检测方法的临床学评价试验 | 第50页 |
| 1.11 统计学分析 | 第50-51页 |
| 2 实验结果 | 第51-67页 |
| 2.1 反应体系的优化 | 第51-54页 |
| 2.2 一步法RT-LAMP检测EBV基因产物方法的建立 | 第54-55页 |
| 2.3 RT-LAMP检测灵敏度及其与RT-qPCR和常规RT-PCR的比较 | 第55-60页 |
| 2.4 RT-LAMP检测特异性 | 第60-61页 |
| 2.5 RT-LAMP检测EBV基因产物方法的临床学评价 | 第61-67页 |
| 3 讨论 | 第67-70页 |
| 4 本章小结 | 第70-72页 |
| 第三章 慢性肝病人群中EBV基因表达模式的研究 | 第72-90页 |
| 1 材料与方法 | 第72-76页 |
| 1.1 仪器、耗材及试剂 | 第72页 |
| 1.2 样本来源 | 第72页 |
| 1.3 慢性肝病患者血清中EBV抗体联合筛查的检测 | 第72-74页 |
| 1.4 EBV血清阳性肝病样本的DNA验证 | 第74-75页 |
| 1.5 RT-LAMP法鉴定EBV血清阳性肝病样本 | 第75-76页 |
| 1.6 统计学分析 | 第76页 |
| 2 结果 | 第76-87页 |
| 2.1 肝病患者中EBV抗体联合筛查结果 | 第76-79页 |
| 2.2 肝病人群中抗EBV,CMV和HSV抗体的分布 | 第79-81页 |
| 2.3 EBV血清阳性肝病样本的DNA验证 | 第81-83页 |
| 2.4 EBV阳性肝病患者的临床表现 | 第83-85页 |
| 2.5 RT-LAMP方法鉴定肝病患者中的EBV感染模式 | 第85-87页 |
| 3 讨论 | 第87-89页 |
| 4 本章小结 | 第89-90页 |
| 第四章 EBV LMP2A重组慢病毒载体的构建与鉴定 | 第90-107页 |
| 1 材料及方法 | 第90-100页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第90页 |
| 1.2 主要耗材及试剂 | 第90页 |
| 1.3 质粒、细胞及菌株 | 第90-92页 |
| 1.4 EBV-LMP2A目的片段的制备 | 第92-95页 |
| 1.5 pHAGE-LMP2A重组质粒的构建 | 第95-97页 |
| 1.6 pLKO.1-LMP2A shRNA重组质粒的构建 | 第97-98页 |
| 1.7 慢病毒载体包装及转染 | 第98-99页 |
| 1.8 RT-qPCR检测Raji细胞中LMP2A的表达水平 | 第99页 |
| 1.9 SDS-PAGE与Western Blot检测 | 第99-100页 |
| 2 实验结果 | 第100-105页 |
| 2.1 EBV LMP2A克隆序列的鉴定 | 第100页 |
| 2.2 重组载体pHAGE LMP2A的构建和鉴定 | 第100-102页 |
| 2.3 重组载体pLKO.1-LMP2A shRNA的构建与鉴定 | 第102-103页 |
| 2.4 被重组载体感染过的细胞中LMP2A的表达 | 第103-104页 |
| 2.5 Western-Blot分析 | 第104-105页 |
| 3 讨论 | 第105-106页 |
| 4 展望 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-116页 |
| 攻博期间发表的科研成果 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
