摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 钾离子通道和乳腺癌的研究进展 | 第9-13页 |
·K+通道的结构和功能 | 第9-11页 |
·电压依赖型K~+通道 | 第9-10页 |
·内向整流型K~+通道 | 第10-11页 |
·瞬时性外向K~+通道 | 第11页 |
·K+通道与乳腺癌 | 第11-12页 |
·K~+通道与乳腺癌的发生 | 第11页 |
·K~+通道与乳腺癌的增殖 | 第11-12页 |
·展望 | 第12-13页 |
2 人乳腺上皮细胞中钾离子通道特性的初步研究 | 第13-21页 |
·材料与方法 | 第14页 |
·材料和试剂 | 第14页 |
·主要仪器 | 第14页 |
·溶液配制 | 第14页 |
·方法 | 第14-17页 |
·细胞培养 | 第14-15页 |
·全细胞膜片钳 | 第15页 |
·4-AP 配制及处理细胞 | 第15-17页 |
·统计分析 | 第17页 |
·结果 | 第17-18页 |
·MCF10A 细胞的电压依赖性钾通道的检测 | 第17-18页 |
·Cav-1 的表达下调对乳腺细胞MCF10A K~+电流的影响 | 第18页 |
·讨论 | 第18-20页 |
·小结 | 第20-21页 |
3 Kv1.5 与Cav-1 介导的有丝分裂原活化蛋白激酶信号通路的激活 | 第21-41页 |
·材料与方法 | 第22-23页 |
·材料和试剂 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-29页 |
·细胞培养 | 第23页 |
·Kv1.5 真核表达载体的瞬时转染 | 第23-25页 |
·4-AP 的配制及细胞处理 | 第25页 |
·MβCD 处理MCF10A 细胞 | 第25页 |
·RT-PCR 半定量 | 第25-26页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第26-27页 |
·蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第27-28页 |
·统计分析 | 第28-29页 |
·结果 | 第29-37页 |
·MCF10A 细胞中MβCD 下调Kv 通道m RNA 的表达 | 第29页 |
·MCF7 细胞中Kv1.5 与MAPK 信号通路的激活 | 第29-34页 |
(1) Kv1.5 真核表达载体的扩增、酶切及鉴定 | 第29-31页 |
(2) Kv1.5 瞬时转染细胞模型的建立 | 第31页 |
(3) MCF7 细胞中Kv1.5 的瞬时转染对MAPK 信号通路的影响 | 第31-32页 |
(4) MCF7 细胞中Kv1.5 的瞬时转染对Cav-1 表达的影响 | 第32-33页 |
(5) MCF7 细胞中Kv1.5 的瞬时转染对其他Kv 通道亚型表达的影响 | 第33-34页 |
·4-AP 阻断Kv 通道对MAPK 信号通路的影响 | 第34-37页 |
(1) 4-AP 对MCF10A 细胞增殖相关通路的影响 | 第34-35页 |
(2) 4-AP 对Cav-1 表达水平不同的乳腺上皮细胞中ERK信号通路的影响 | 第35-36页 |
(3) 4-AP 对Cav-1 表达水平不同的乳腺上皮细胞中p38信号通路的影响 | 第36页 |
(4) 4-AP 对Cav-1 表达水平不同的乳腺上皮细胞中PI3K/AKT信号通路的影响 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-40页 |
·Kv1.5 与Caveolae/Cav-1 | 第38-39页 |
·Kv 通道与Cav-1 介导的MAPK 信号通路的激活 | 第39-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
参考文献(References) | 第41-45页 |
附录A 缩略语表 | 第45-46页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第46-47页 |
致谢 | 第47页 |