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人乳腺上皮细胞中Kv1.5与Cav-1介导的MAPK信号通路的激活

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 钾离子通道和乳腺癌的研究进展第9-13页
   ·K+通道的结构和功能第9-11页
     ·电压依赖型K~+通道第9-10页
     ·内向整流型K~+通道第10-11页
     ·瞬时性外向K~+通道第11页
   ·K+通道与乳腺癌第11-12页
     ·K~+通道与乳腺癌的发生第11页
     ·K~+通道与乳腺癌的增殖第11-12页
   ·展望第12-13页
2 人乳腺上皮细胞中钾离子通道特性的初步研究第13-21页
   ·材料与方法第14页
     ·材料和试剂第14页
     ·主要仪器第14页
     ·溶液配制第14页
   ·方法第14-17页
     ·细胞培养第14-15页
     ·全细胞膜片钳第15页
     ·4-AP 配制及处理细胞第15-17页
     ·统计分析第17页
   ·结果第17-18页
     ·MCF10A 细胞的电压依赖性钾通道的检测第17-18页
     ·Cav-1 的表达下调对乳腺细胞MCF10A K~+电流的影响第18页
   ·讨论第18-20页
   ·小结第20-21页
3 Kv1.5 与Cav-1 介导的有丝分裂原活化蛋白激酶信号通路的激活第21-41页
   ·材料与方法第22-23页
     ·材料和试剂第22页
     ·主要仪器第22-23页
   ·方法第23-29页
     ·细胞培养第23页
     ·Kv1.5 真核表达载体的瞬时转染第23-25页
     ·4-AP 的配制及细胞处理第25页
     ·MβCD 处理MCF10A 细胞第25页
     ·RT-PCR 半定量第25-26页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第26-27页
     ·蛋白质免疫印迹(Western Blot)第27-28页
     ·统计分析第28-29页
   ·结果第29-37页
     ·MCF10A 细胞中MβCD 下调Kv 通道m RNA 的表达第29页
     ·MCF7 细胞中Kv1.5 与MAPK 信号通路的激活第29-34页
   (1) Kv1.5 真核表达载体的扩增、酶切及鉴定第29-31页
   (2) Kv1.5 瞬时转染细胞模型的建立第31页
   (3) MCF7 细胞中Kv1.5 的瞬时转染对MAPK 信号通路的影响第31-32页
   (4) MCF7 细胞中Kv1.5 的瞬时转染对Cav-1 表达的影响第32-33页
   (5) MCF7 细胞中Kv1.5 的瞬时转染对其他Kv 通道亚型表达的影响第33-34页
     ·4-AP 阻断Kv 通道对MAPK 信号通路的影响第34-37页
   (1) 4-AP 对MCF10A 细胞增殖相关通路的影响第34-35页
   (2) 4-AP 对Cav-1 表达水平不同的乳腺上皮细胞中ERK信号通路的影响第35-36页
   (3) 4-AP 对Cav-1 表达水平不同的乳腺上皮细胞中p38信号通路的影响第36页
   (4) 4-AP 对Cav-1 表达水平不同的乳腺上皮细胞中PI3K/AKT信号通路的影响第36-37页
   ·讨论第37-40页
     ·Kv1.5 与Caveolae/Cav-1第38-39页
     ·Kv 通道与Cav-1 介导的MAPK 信号通路的激活第39-40页
   ·小结第40-41页
参考文献(References)第41-45页
附录A 缩略语表第45-46页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第46-47页
致谢第47页

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