| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第14-34页 |
| 1.1 生长素的信号转导途径及影响因素 | 第14-19页 |
| 1.1.1 生长素信号转导途径 | 第15-17页 |
| 1.1.2 HSP90能够增加生长素受体TIR1/AFBs的稳定性 | 第17-18页 |
| 1.1.3 热激蛋白家族的简述 | 第18页 |
| 1.1.4 microRNAs在生长素方面的相关作用 | 第18-19页 |
| 1.2 根尖干细胞池的形态以及维持 | 第19-30页 |
| 1.2.1 根尖干细胞池的维持途径 | 第21-26页 |
| 1.2.1.1 WOX5维持根尖干细胞池的途径 | 第21-22页 |
| 1.2.1.2 SCR-SHR维持途径 | 第22-24页 |
| 1.2.1.3 PLT调控根尖干细胞池的途径 | 第24-26页 |
| 1.2.2 植物激素在根尖干细胞维持方面的作用 | 第26-30页 |
| 1.2.2.1 生长素在根尖干细胞维持方面的作用 | 第26-28页 |
| 1.2.2.2 细胞分裂素在根尖干细胞维持方面的作用 | 第28页 |
| 1.2.2.3 脱落酸在根尖干细胞维持方面的作用 | 第28-29页 |
| 1.2.2.4 乙烯在根尖干细胞池维持方面的作用 | 第29页 |
| 1.2.2.5 赤霉素在根尖干细胞维持方面的作用 | 第29-30页 |
| 1.2.2.6 油菜素内酯在根尖干细胞维持方面的作用 | 第30页 |
| 1.3 CARD2基因以及其同源家族基因的重要作用 | 第30-33页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-52页 |
| 2.1 材料 | 第34-37页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第34-36页 |
| 2.1.2 载体与菌株 | 第36页 |
| 2.1.3 实验引物 | 第36-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-52页 |
| 2.2.1 CTAB法提取拟南芥基因组DNA | 第37页 |
| 2.2.2 植物转基因表达载体构建 | 第37-40页 |
| 2.2.2.1 PCR引物设计 | 第37页 |
| 2.2.2.2 PCR扩增目的片段 | 第37-38页 |
| 2.2.2.3 目的片段的回收 | 第38页 |
| 2.2.2.4 目的片段和表达载体的酶切 | 第38页 |
| 2.2.2.5 目的片段与表达载体的连接 | 第38-39页 |
| 2.2.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第39页 |
| 2.2.2.7 热激法转化大肠杆菌感受态细胞 | 第39页 |
| 2.2.2.8 PCR鉴定大肠杆菌转化 | 第39-40页 |
| 2.2.2.9 质粒DNA的提取验证和测序 | 第40页 |
| 2.2.3 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备及转化 | 第40-41页 |
| 2.2.3.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| 2.2.3.2 冷冻法转化根癌农杆菌GV3101感受态细胞 | 第41页 |
| 2.2.4 花序侵染法拟南芥转化以及阳性植株筛选 | 第41-42页 |
| 2.2.4.1 拟南芥的转化 | 第41页 |
| 2.2.4.2 拟南芥阳性植株的筛选 | 第41-42页 |
| 2.2.5 植物总RNA的提取、反转录以及定量 | 第42-43页 |
| 2.2.5.1 植物总RNA的提取 | 第42页 |
| 2.2.5.2 反转录 | 第42-43页 |
| 2.2.5.3 定量 | 第43页 |
| 2.2.6 GUS活性的检测 | 第43-45页 |
| 2.2.6.1 GUS染色 | 第43-44页 |
| 2.2.6.2 MUG底物法测定GUS活性 | 第44-45页 |
| 2.2.7 蛋白免疫印迹 | 第45-47页 |
| 2.2.7.1 实验过程所用到的各种试剂配方 | 第45-46页 |
| 2.2.7.2 植物蛋白提取 | 第46页 |
| 2.2.7.3 半干法蛋白转膜、抗体孵育以及显色 | 第46-47页 |
| 2.2.8 酵母双杂交 | 第47-49页 |
| 2.2.8.1 酵母双杂交实验中所用的试剂配方 | 第47-48页 |
| 2.2.8.2 酵母菌株感受态制备 | 第48页 |
| 2.2.8.3 质粒共同转化酵母感受态 | 第48-49页 |
| 2.2.8.4 酵母菌液点板以及结果观察 | 第49页 |
| 2.2.9 双分子荧光互补实验BiFC | 第49-50页 |
| 2.2.9.1 实验中用到的试剂 | 第49-50页 |
| 2.2.9.2 实验步骤 | 第50页 |
| 2.2.10 mRNA运输出核实验 | 第50-52页 |
| 2.2.10.1 mRNA运输出核实验所需试剂配方 | 第50-51页 |
| 2.2.10.2 mRNA运输出核实验步骤 | 第51-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-73页 |
| 3.1 card2突变体的发现及图位克隆 | 第52-56页 |
| 3.2 目的基因CARD2的组织定位以及蛋白的亚细胞定位 | 第56-58页 |
| 3.2.1 目的基因CARD2的组织定位 | 第57页 |
| 3.2.2 CARD2蛋白的亚细胞定位 | 第57-58页 |
| 3.3 CARD2基因的表达调控 | 第58-59页 |
| 3.4 card2根尖干细胞池的维持受到了影响 | 第59-63页 |
| 3.4.1 card2突变体中静止中心细胞分裂现象增加 | 第60页 |
| 3.4.2 card2突变体中皮层内皮层细胞发生分裂 | 第60-61页 |
| 3.4.3 card2突变体中小柱起始细胞以及小柱细胞范围变大 | 第61-63页 |
| 3.5 card2突变体中生长素信号增加 | 第63-65页 |
| 3.5.1 card2突变体中PLT1和PLT2的蛋白浓度增加 | 第63-64页 |
| 3.5.2 R2D2的荧光比值的变化表明在card2突变体中生长素信号增加 | 第64-65页 |
| 3.6 CARD2参与了依赖于SCFTIR1的AUX/IAA的降解过程 | 第65-69页 |
| 3.6.1 card2突变体中AUX/IAA的降解速率加快 | 第65-67页 |
| 3.6.2 card2突变体中生长素受体TIR1的稳定性增加 | 第67-68页 |
| 3.6.3 card2突变体中TIR1蛋白稳定性增加与HSP90有关 | 第68-69页 |
| 3.7 CARD2与核孔蛋白复合体NUP58互作 | 第69-71页 |
| 3.8 card2突变体中含有polyA的RNA的运输出核受到了抑制 | 第71-73页 |
| 4 讨论 | 第73-76页 |
| 4.1 拟南芥中核苷三磷酸水解酶CARD2与酵母中的同源蛋白Sen1功能的异同之处 | 第73-74页 |
| 4.2 拟南芥中编码核苷三磷酸水解酶的基因CARD2参与的作用途径 | 第74-76页 |
| 5 结论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第96页 |
