| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-30页 |
| ·生物不对称还原法制备手性醇 | 第11-14页 |
| ·手性醇的应用 | 第11-12页 |
| ·手性醇的制备方法 | 第12-13页 |
| ·生物法不对称还原制备手性醇 | 第13-14页 |
| ·羰基还原酶 | 第14-25页 |
| ·醛酮还原酶(AKR) | 第15-20页 |
| ·短链脱氢/还原酶(SDR) | 第20-25页 |
| ·手性芴醇的应用及合成 | 第25-28页 |
| ·手性芴醇的应用 | 第25页 |
| ·手性芴醇的合成 | 第25-28页 |
| ·羰基还原酶的筛选和重组表达 | 第28页 |
| ·生物催化剂筛选 | 第28页 |
| ·重组表达 | 第28页 |
| ·论文的研究内容及意义 | 第28-30页 |
| 2 立体选择性芴酮还原菌株筛选及特性 | 第30-51页 |
| ·引言 | 第30页 |
| ·实验材料与器材 | 第30-31页 |
| ·供试菌株 | 第30页 |
| ·实验仪器 | 第30-31页 |
| ·实验试剂 | 第31页 |
| ·菌株筛选策略 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-38页 |
| ·2-取代芴酮还原分析方法 | 第32-34页 |
| ·数据计算 | 第34页 |
| ·培养基配方 | 第34-35页 |
| ·菌体培养和细胞收集 | 第35页 |
| ·2-氯芴酮转化菌株的筛选 | 第35页 |
| ·产物鉴定 | 第35页 |
| ·2-氯芴酮高立体选择性还原菌株的筛选及鉴定 | 第35-36页 |
| ·产物旋光度测定 | 第36页 |
| ·菌株驯化 | 第36页 |
| ·温度和pH对还原反应的影响 | 第36页 |
| ·反应的时间、浓度依赖性 | 第36页 |
| ·有机助溶剂对反应的影响 | 第36-37页 |
| ·辅助底物对反应的影响 | 第37页 |
| ·金属离子及阴离子对反应的影响 | 第37页 |
| ·菌株转化底物谱扩展 | 第37-38页 |
| ·实验结果 | 第38-49页 |
| ·2-氯芴酮转化菌株的筛选 | 第38页 |
| ·产物鉴定 | 第38-40页 |
| ·2-氯芴酮高立体选择性还原菌株的筛选 | 第40-41页 |
| ·产物旋光度测定 | 第41-42页 |
| ·菌株还原底物2-氯芴酮能力驯化 | 第42页 |
| ·温度和pH对还原反应的影响 | 第42-43页 |
| ·反应的时间、浓度依赖性 | 第43-45页 |
| ·有机助溶剂对反应的影响 | 第45页 |
| ·辅助底物对反应的影响 | 第45-46页 |
| ·金属离子及阴离子对反应的影响 | 第46-47页 |
| ·菌株转化底物谱扩展 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 3 芴酮还原酶分离纯化 | 第51-66页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·实验材料与器材 | 第51-52页 |
| ·供试菌株 | 第51-52页 |
| ·实验仪器 | 第52页 |
| ·实验试剂 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-57页 |
| ·2-氯芴酮还原检测方法 | 第52页 |
| ·数据计算 | 第52页 |
| ·培养基配方 | 第52-53页 |
| ·蛋白质浓度测定方法 | 第53-54页 |
| ·蛋白溶液还原活力检测方法 | 第54页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳方法 | 第54-55页 |
| ·菌体培养和细胞收集 | 第55页 |
| ·细胞破碎 | 第55页 |
| ·发酵液、细胞裂解液的辅酶依赖性 | 第55页 |
| ·(NH_4)_2SO_4沉淀蛋白 | 第55-56页 |
| ·蛋白溶液Sephadex G-25脱盐 | 第56页 |
| ·SOURCE 30Q阴离子交换层析 | 第56页 |
| ·2’,5’-ADP-Sepharose 4B亲和分离 | 第56-57页 |
| ·实验结果 | 第57-65页 |
| ·发酵液、细胞裂解液的辅酶依赖性 | 第57-58页 |
| ·(NH_4)_2SO_4沉淀 | 第58-60页 |
| ·Sephadex G-25脱盐 | 第60-61页 |
| ·SOURCE 30Q阴离子交换层析 | 第61-63页 |
| ·2’,5’-ADP-Sepharose 4B亲和分离 | 第63-65页 |
| ·讨论 | 第65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 附录A 专有名词缩写 | 第73-75页 |
| 附录B 常用仪器一览表 | 第75-77页 |
| 附录C 常用试剂一览表 | 第77-80页 |
| 附录D HPLC谱图及标准曲线 | 第80-88页 |
| 附录E 产物鉴定 | 第88-96页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-99页 |