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Rap2相互作用蛋白的鉴定与功能分析

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
第1章 绪论第8-22页
    1.1 课题背景及研究的目的和意义第8页
    1.2 小分子量G蛋白家族概述第8-11页
    1.3 Rap亚族及Rap2 的功能第11-15页
        1.3.1 Rap亚族概述第11-13页
        1.3.2 Rap2 的功能第13-15页
    1.4 Rap2 的相互作用蛋白第15-17页
        1.4.1 PARG1第15页
        1.4.2 RPIP8/ RPIP9第15-16页
        1.4.3 MINK第16页
        1.4.4 MAP4K4第16-17页
        1.4.5 TNIK第17页
    1.5 Vimentin功能简介第17-20页
        1.5.1 中间纤维概述第17-18页
        1.5.2 Vimentin的结构功能第18-20页
    1.6 课题研究内容及技术路线第20页
    1.7 技术路线第20-22页
第2章 实验材料与方法第22-38页
    2.1 实验材料第22-24页
        2.1.1 PCR所需引物第22页
        2.1.2 质粒、细胞系和菌株第22页
        2.1.3 主要试剂材料及试剂配方第22-24页
    2.2 实验方法第24-38页
        2.2.1 细胞培养技术和样本的收集第24-26页
        2.2.2 细胞转染和稳转细胞系的鉴定第26-27页
        2.2.3 免疫共沉淀(CoIP)实验第27-28页
        2.2.4 Western Blot检测蛋白水平第28-29页
        2.2.5 Neuhoff胶体染色第29-30页
        2.2.6 胶内酶切方法第30页
        2.2.7 DH5α/GM2163 感受态细胞的制备第30-31页
        2.2.8 重组体构建和目的片段扩增第31-34页
        2.2.9 免疫荧光实验第34-35页
        2.2.10 酵母双杂交实验第35-37页
        2.2.11 细胞运动能力的检测第37-38页
第3章 肾癌细胞系中Rap2 相互作用蛋白的研究第38-43页
    3.1 NC65-Rap2 稳定表达细胞系的鉴定第38-39页
    3.2 Rap2 可能的相互作用蛋白的获得第39-41页
    3.3 讨论第41页
    3.4 本章小结第41-43页
第4章Rap2 与Vimentin和H2B相互作用的研究第43-53页
    4.1 Rap2 与Vimentin相互作用关系的验证第43-46页
        4.1.1 免疫荧光实验第43-44页
        4.1.2 免疫共沉淀(CoIP)实验第44-45页
        4.1.3 酵母双杂交实验第45-46页
    4.2 Rap2 与Vimentin共表达对NC65 细胞的运动能力的影响第46-47页
    4.3 Rap2 与H2B相互作用关系的验证第47-51页
        4.3.1 免疫荧光实验第47-49页
        4.3.2 免疫共沉淀(Co IP)实验第49-51页
    4.4 讨论第51-52页
    4.5 本章小结第52-53页
结论第53-54页
参考文献第54-63页
致谢第63-64页
附录第64-66页

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