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基于CRISPR/Cas9技术的含月季TCP9基因的载体构建及转化研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
第一章 绪论第9-24页
    1.1 引言第9-11页
    1.2 CRISPR/CAS9基因组编辑技术的研究进展第11-17页
        1.2.1 CRISPR/Cas系统的发现第11-13页
        1.2.2 CRISPR/Cas系统的分类第13页
        1.2.3 CRISPR/Cas9系统的组成第13-14页
        1.2.4 CRISPR/Cas9系统的免疫机制第14-15页
        1.2.5 CRISPR/Cas9系统的应用第15-17页
        1.2.6 展望第17页
    1.3 TCP基因研究进展第17-23页
        1.3.1 TCP基因家族的进化第18-19页
        1.3.2 TCP基因家族功能的研究第19-23页
    1.4 本研究的目的和意义第23-24页
第二章 含月季TCP9基因CRISPR/CAS9载体的构建第24-39页
    2.1 试验材料第24页
    2.2 试验试剂第24-25页
    2.3 主要培养基第25页
    2.4 主要设备仪器第25页
    2.5 试验方法第25-31页
        2.5.1 PCR扩增第25-27页
        2.5.2 酶切连接第27页
        2.5.3 转化大肠杆菌感受态第27-28页
        2.5.4 质粒提取第28-30页
        2.5.5 农杆菌EHA105感受态细胞的制备第30-31页
        2.5.6 含pHSE401-TCP9质粒农杆菌的转化第31页
    2.6 结果与分析第31-38页
        2.6.1 PCR扩增结果第31-32页
        2.6.2 大肠杆菌转化结果第32页
        2.6.3 pHSE401-TCP9质粒载体的获得第32-33页
        2.6.4 单酶切鉴定结果第33-34页
        2.6.5 基因序列分析第34-37页
        2.6.6 农杆菌转化结果第37-38页
    2.7 小结与讨论第38-39页
第三章 拟南芥遗传转化的研究第39-45页
    3.1 实验材料第39页
    3.2 实验试剂第39页
    3.3 主要培养基第39页
    3.4 试验方法第39-41页
        3.4.1 培养拟南芥植株第39页
        3.4.2 侵染液EHA105-pHSE401-TCP9农杆菌的制备第39-40页
        3.4.3 拟南芥侵染第40页
        3.4.4 转化植株的获得第40-41页
    3.5 结果与分析第41-43页
        3.5.1 农杆菌侵染液的分子检测第41页
        3.5.2 拟南芥转化植株的表型分析第41-43页
    3.6 小结与分析第43-45页
第四章 月季体胚发生与体胚对抗生素敏感性试验转化研究第45-52页
    4.1 实验材料第45页
    4.2 实验试剂第45页
    4.3 主要培养基第45页
    4.4 试验方法第45-47页
        4.4.1 诱导月季胚性愈伤第45-46页
        4.4.2 侵染液制备第46页
        4.4.3 卡那霉素和头孢霉素对月季胚性愈伤共同作用试验第46-47页
    4.5 结果与分析第47-50页
        4.5.1 月季体胚发生与植株再生第47-48页
        4.5.2 卡那霉素和头孢霉素对月季胚性愈伤共同作用试验结果第48-50页
    4.6 小结与讨论第50-52页
第五章 结论与展望第52-54页
    5.1 主要结论第52页
    5.2 本研究的创新点第52-53页
    5.3 本研究的下一步工作第53页
    5.4 展望第53-54页
参考文献第54-62页
缩略词表第62-63页
附录第63-65页
致谢第65-66页
作者简介第66页

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