| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-28页 |
| 1.1 抗菌肽的研究进展 | 第13-20页 |
| 1.1.1 抗菌肽的特点及理化性质 | 第13-14页 |
| 1.1.2 抗菌肽的来源 | 第14-15页 |
| 1.1.3 抗菌肽的结构与作用机制 | 第15-18页 |
| 1.1.4 抗菌肽的应用前景 | 第18-20页 |
| 1.2 抗菌肽的基因表达系统研究 | 第20-22页 |
| 1.2.1 抗菌肽的获取途径 | 第20页 |
| 1.2.2 原核表达系统 | 第20页 |
| 1.2.3 酵母表达系统 | 第20-22页 |
| 1.3 三种不同来源的抗菌肽 | 第22-26页 |
| 1.3.1 IsCT及其衍生物 | 第22-24页 |
| 1.3.2 海鞘多肽Clavanin | 第24-25页 |
| 1.3.3 美洲商陆抗菌肽Pa-AMP05 | 第25-26页 |
| 1.4 本课题研究意义及内容 | 第26-28页 |
| 第二章 三种不同来源的抗菌肽分别在毕赤酵母中的表达 | 第28-56页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 材料与设备 | 第28-32页 |
| 2.2.1 主要仪器与设备 | 第28-29页 |
| 2.2.2 菌种和质粒 | 第29页 |
| 2.2.3 分子克隆工具酶与试剂 | 第29-30页 |
| 2.2.4 培养基及溶液 | 第30-32页 |
| 2.3 实验流程 | 第32页 |
| 2.4 实验方法 | 第32-45页 |
| 2.4.1 菌株的活化与培养 | 第32页 |
| 2.4.2 菌种的保存 | 第32页 |
| 2.4.3 重组质粒pPICZαA-IsCT的构建 | 第32-38页 |
| 2.4.4 重组质粒pPICZαA-Clavanin的构建 | 第38-40页 |
| 2.4.5 重组质粒pPICZαA-AMP05 的构建 | 第40-42页 |
| 2.4.6 毕赤酵母感受态细胞的制备及转化 | 第42-43页 |
| 2.4.7 重组毕赤酵母的鉴定及诱导发酵 | 第43-44页 |
| 2.4.8 抗菌肽活性的鉴定 | 第44-45页 |
| 2.5 实验结果与讨论 | 第45-55页 |
| 2.5.1 IsCT在毕赤酵母中的表达 | 第45-48页 |
| 2.5.2 Clavanin在毕赤酵母中的表达 | 第48-51页 |
| 2.5.3 Pa-AMP05 在毕赤酵母中的表达 | 第51-55页 |
| 2.6 本章小结 | 第55-56页 |
| 第三章 三种不同来源的抗菌肽分别在酿酒酵母中的表达 | 第56-86页 |
| 3.1 引言 | 第56页 |
| 3.2 材料与设备 | 第56-58页 |
| 3.2.1 主要仪器与设备 | 第56页 |
| 3.2.2 菌种和质粒 | 第56-57页 |
| 3.2.3 分子克隆工具酶与试剂 | 第57页 |
| 3.2.4 培养基及溶液 | 第57-58页 |
| 3.3 实验流程 | 第58-59页 |
| 3.4 实验方法 | 第59-67页 |
| 3.4.1 菌体的培养 | 第59页 |
| 3.4.2 菌种的保存 | 第59页 |
| 3.4.3 重组质粒pYES2α-IsCT的构建 | 第59-61页 |
| 3.4.4 重组质粒pYES2α-Clavanin的构建 | 第61-62页 |
| 3.4.5 重组质粒pYES2α-AMP05 的构建 | 第62-64页 |
| 3.4.6 酿酒酵母感受态细胞的制备及转化 | 第64页 |
| 3.4.7 重组酿酒酵母的筛选与鉴定 | 第64-65页 |
| 3.4.8 重组酿酒酵母的诱导表达 | 第65页 |
| 3.4.9 抗菌肽活性的鉴定 | 第65页 |
| 3.4.10Tricine-SDS-PAGE | 第65-66页 |
| 3.4.11 酿酒酵母发酵液上清蛋白含量的测定 | 第66-67页 |
| 3.4.12 抗菌肽最低抑菌浓度的测定 | 第67页 |
| 3.5 实验结果与讨论 | 第67-82页 |
| 3.5.1 IsCT在酿酒酵母中的表达 | 第67-72页 |
| 3.5.2 Clavanin在酿酒酵母中的表达 | 第72-77页 |
| 3.5.3 Pa-AMP05 在酿酒酵母中的表达 | 第77-82页 |
| 3.6 酿酒酵母发酵液上清中蛋白浓度的测定 | 第82-83页 |
| 3.7 表达抗菌肽的最低抑菌浓度测定 | 第83-84页 |
| 3.8 本章小结 | 第84-86页 |
| 结论与展望 | 第86-88页 |
| 结论 | 第86-87页 |
| 本论文创新点 | 第87页 |
| 展望 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-95页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 附件 | 第97页 |
