| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 阿尔茨海默病 | 第11-12页 |
| 1.1.1 AD的发病机制 | 第11-12页 |
| 1.1.1.1 β-淀粉样蛋白级联学说 | 第11页 |
| 1.1.1.2 微管相关蛋白Tau异常学说 | 第11-12页 |
| 1.1.1.3 氧化应激 | 第12页 |
| 1.1.1.4 炎性反应 | 第12页 |
| 1.1.1.5 Ca~（2+）通道平衡失调 | 第12页 |
| 1.2 aFGF治疗AD的研究概况 | 第12-13页 |
| 1.3 糖原合成酶激酶3β | 第13-21页 |
| 1.3.1 GSK3β的概述 | 第13-14页 |
| 1.3.2 GSK3β生物活性 | 第14-15页 |
| 1.3.3 GSK3β的底物 | 第15-16页 |
| 1.3.4 GSK3β在AD发病过程中的作用 | 第16-21页 |
| 1.3.4.1 GSK3β与神经元 | 第16-18页 |
| 1.3.4.2 GSK3β与Aβ产生 | 第18页 |
| 1.3.4.3 GSK3β与Tau蛋白磷酸化 | 第18-19页 |
| 1.3.4.4 GSK3β与炎症反应 | 第19-20页 |
| 1.3.4.5 GSK3β与细胞凋亡 | 第20-21页 |
| 1.3.4.6 GSK3β其他功能 | 第21页 |
| 1.4 课题思路 | 第21-22页 |
| 1.5 技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第23-41页 |
| 2.1 主要仪器与设备 | 第23-24页 |
| 2.2 材料和试剂 | 第24-26页 |
| 2.3 主要抗体 | 第26-27页 |
| 2.4 siRNA序列 | 第27页 |
| 2.5 溶液配制 | 第27-31页 |
| 2.6 实验方法 | 第31-40页 |
| 2.7 数据分析 | 第40-41页 |
| 第三章 实验结果 | 第41-71页 |
| 3.1 GSK3β是aFGF拮抗Aβ导致的神经元突起损伤的靶点 | 第41-45页 |
| 3.1.1 aFGF对N2a-APP细胞株GSK3β蛋白及其磷酸化的影响 | 第41-42页 |
| 3.1.2 GSK3抑制剂BIO阻断aFGF对神经突起的保护作用 | 第42-45页 |
| 3.1.2.1 GSK3抑制剂BIO浓度的摸索 | 第42-44页 |
| 3.1.2.2 aFGF对大鼠原代皮质神经元突起的保护作用 | 第44-45页 |
| 3.2 Co-IP结合LTQ蛋白组学技术筛选与GSK3β相互作用的靶蛋白 | 第45-62页 |
| 3.2.1 免疫共沉淀 | 第45-47页 |
| 3.2.2 质谱鉴定、数据分析及相互作用蛋白的验证 | 第47-58页 |
| 3.2.2.1 GSK3β潜在互作蛋白的GO注释 | 第47-53页 |
| 3.2.2.2 蛋白质-蛋白质相互作用网络分析 | 第53-57页 |
| 3.2.2.3 GSK3β潜在互作蛋白质的Pathway分析 | 第57-58页 |
| 3.2.3 GSK3β与候选蛋白相互作用的验证 | 第58-59页 |
| 3.2.4 GSK3β抑制剂对候选靶蛋白表达的影响 | 第59-60页 |
| 3.2.5 aFGF对候选靶蛋白表达的影响 | 第60-62页 |
| 3.3 在AD模型中aFGF通过GSK3β调控CRMP2拮抗Aβ导致的神经元突起损伤 | 第62-65页 |
| 3.3.1 Westernblotting验证AD模型中aFGF通过GSK3β调控CRMP | 第62-65页 |
| 3.4 siRNA沉默CRMP2的蛋白表达阻断aFGF对神经元突起的保护作用 | 第65-71页 |
| 3.4.1 CRMP2siRNA干扰效率的优化 | 第65-66页 |
| 3.4.2 siRNA沉默CRMP2蛋白表达阻断aFGF促进神经突起再生的作用 | 第66-71页 |
| 3.4.2.1 CRMP2表达沉默抑制aFGF提升Aβ损伤神经元的细胞活性 | 第66-67页 |
| 3.4.2.2 观察CRMP2表达沉默后aFGF对Aβ损伤的皮质神经元形态学的改变 | 第67-68页 |
| 3.4.2.3 siRNA沉默CRMP2蛋白表达对皮质神经元突触相关蛋白表达的影响 | 第68-71页 |
| 第四章 讨论 | 第71-75页 |
| 4.1 aFGF以GSK3β为靶点拮抗Aβ导致的神经元突起损伤 | 第71-72页 |
| 4.2 与GSK3β相互作用的蛋白参与调控神经元突起生长的分子机制研究 | 第72-73页 |
| 4.3 在AD模型中aFGF通过GSK3β调控CRMP2拮抗Aβ导致的神经元突起损伤 | 第73-75页 |
| 第五章 结论和展望 | 第75-77页 |
| 5.1 结论 | 第75页 |
| 5.2 创新点 | 第75-76页 |
| 5.3 展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 英文缩略词汇总 | 第82-83页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第83-84页 |
| 课题资助及基金支持 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
