摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第14-15页 |
第一章 引言 | 第15-22页 |
1.1 猪流行性腹泻简介 | 第15-18页 |
1.1.1 病原学及分子生物学 | 第15-17页 |
1.1.2 PEDV流行病学 | 第17页 |
1.1.3 临床症状与致病机制 | 第17-18页 |
1.1.4 病毒与宿主细胞的相互作用 | 第18页 |
1.2 表皮生长因子受体EGFR | 第18-21页 |
1.2.1 EGFR的结构与功能 | 第19-20页 |
1.2.2 EGFR介导的信号转导 | 第20-21页 |
1.2.3 EGFR在病毒感染中的作用 | 第21页 |
1.3 研究目的及意义 | 第21-22页 |
第二章 PEDV感染能够激活EGFR | 第22-29页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.1.1 细胞、病毒毒株 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-24页 |
2.2.1 Western blot检测EGFR活化水平 | 第22页 |
2.2.2 复制能力缺陷型PEDV的制备与测定 | 第22-23页 |
2.2.3 pAAV/EGFR和pAAV/PEDV-S重组质粒的构建 | 第23-24页 |
2.2.4 免疫共沉淀(Co-IP)检测PEDV与EGFR之间的相互作用 | 第24页 |
2.3 实验结果 | 第24-28页 |
2.3.1 PEDV感染可激活EGFR | 第24-25页 |
2.3.2 UV灭活PEDV可激活EGFR | 第25-26页 |
2.3.3 pAAV/EGFR和pAAV/PEDV-S重组质粒的构建与鉴定 | 第26-27页 |
2.3.4 Co-IP实验鉴定PEDVS蛋白与EGFR的相互作用 | 第27-28页 |
2.4 讨论 | 第28-29页 |
第三章 EGFR对PEDV感染的影响 | 第29-41页 |
3.1 实验材料 | 第29页 |
3.1.1 细胞、病毒毒株、质粒 | 第29页 |
3.1.2 主要试剂 | 第29页 |
3.2 实验方法 | 第29-33页 |
3.2.1 Western blot检测EGFR活化水平 | 第29页 |
3.2.2 EGFR活化对PEDV感染的影响 | 第29-31页 |
3.2.3 过表达EGFR对PEDV感染的影响 | 第31页 |
3.2.4 EGFR特异性抑制剂对PEDV感染的影响 | 第31-32页 |
3.2.5 EGFR特异性siRNA对PEDV感染的影响 | 第32-33页 |
3.2.6 敲低EGFR对I型干扰素(IFN-I)的影响 | 第33页 |
3.3 实验结果 | 第33-39页 |
3.3.1 EGF处理可引起EGFR活化 | 第33-34页 |
3.3.2 活化的EGFR可促进PEDV的感染 | 第34页 |
3.3.3 过表达EGFR能够促进PEDV感染 | 第34-35页 |
3.3.4 EGFR特异性抑制剂可抑制PEDV感染 | 第35-37页 |
3.3.5 敲低EGFR可抑制PEDV感染 | 第37-38页 |
3.3.6 抑制EGFR表达可促进IFN-I相关基因的表达 | 第38-39页 |
3.4 讨论 | 第39-41页 |
第四章 STAT3在PEDV感染中的作用 | 第41-53页 |
4.1 实验材料 | 第41页 |
4.1.1 细胞、病毒毒株、质粒 | 第41页 |
4.1.2 主要试剂 | 第41页 |
4.2 实验方法 | 第41-44页 |
4.2.1 Western blot检测PEDV感染STAT3磷酸化水平的变化 | 第41页 |
4.2.2 STAT3特异性抑制剂对PEDV感染的影响 | 第41-42页 |
4.2.3 STAT3特异性抑制剂对IFN-I相关基因的影响 | 第42页 |
4.2.4 STAT3特异性siRNA对PEDV感染的影响 | 第42-43页 |
4.2.5 敲低STAT3对IFN-I相关基因的影响 | 第43页 |
4.2.6 pAAV/STAT3重组质粒的构建 | 第43-44页 |
4.2.7 过表达STAT3对PEDV感染的影响 | 第44页 |
4.2.8 EGFR和STAT3的相关性对PEDV感染的影响 | 第44页 |
4.3 实验结果 | 第44-51页 |
4.3.1 PEDV感染促进STAT3磷酸化水平升高 | 第44-45页 |
4.3.2 STAT3特异性抑制剂可抑制PEDV感染 | 第45-46页 |
4.3.3 STAT3特异性抑制剂促进IFN-I相关基因的表达 | 第46-47页 |
4.3.4 STAT3特异性siRNA可抑制PEDV感染 | 第47-48页 |
4.3.5 STAT3特异性siRNA敲低STAT3促进IFN-I相关基因的表达 | 第48页 |
4.3.6 质粒pAAV/STAT3重组质粒的构建以及鉴定 | 第48-49页 |
4.3.7 过表达STAT3促进PEDV感染 | 第49-50页 |
4.3.8 EGFR和STAT3的相关性对PEDV感染的影响 | 第50-51页 |
4.4 讨论 | 第51-53页 |
第五章 全文结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简历 | 第63页 |