中文摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略词 | 第12-13页 |
第一章 绪论 | 第13-19页 |
1.牛冠状病毒(BCV)和牛轮状病毒(BRV)的分类和主要特性 | 第13-14页 |
1.1 牛冠状病毒(BCV)的分类和主要特性 | 第13页 |
1.2 牛轮状病毒(BRV)的分类和主要特性 | 第13页 |
1.3 轮状病毒结构蛋白和非结构蛋白的特点 | 第13-14页 |
2.牛冠状病毒和轮状病毒的流行情况 | 第14页 |
2.1 牛冠状病毒的流行情况 | 第14页 |
2.2 牛轮状病毒的流行情况 | 第14页 |
3.牛冠状病毒和轮状病毒的检测方法研究进展 | 第14-19页 |
3.1 病毒分离培养鉴定 | 第14页 |
3.2 病毒中和试验(VN) | 第14-15页 |
3.3 血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验 | 第15页 |
3.4 荧光抗体技术(FA) | 第15页 |
3.5 乳胶凝集反应(LAT) | 第15页 |
3.6 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第15-16页 |
3.7 PCR技术 | 第16-18页 |
3.8 免疫胶体金技术的优点 | 第18页 |
3.9 其他方面的研究 | 第18-19页 |
第二章 试验研究 | 第19-67页 |
试验一 新疆部分地区犊牛轮状病毒感染的调查 | 第19-26页 |
1.材料与方法 | 第19-22页 |
1.1 材料 | 第19-20页 |
1.2 方法 | 第20-22页 |
2.结果与分析 | 第22-24页 |
2.1 PCR检测牛轮状病毒结果 | 第22-23页 |
2.2 ELISA检测结果 | 第23-24页 |
3.讨论 | 第24-26页 |
试验二 新疆部分地区犊牛冠状病毒感染的调查 | 第26-32页 |
1.材料与方法 | 第26-28页 |
1.1 材料 | 第26页 |
1.2 方法 | 第26-28页 |
2.结果与分析 | 第28-30页 |
2.1 PCR检测牛冠状病毒结果 | 第28-30页 |
2.2 ELISA检测结果 | 第30页 |
3.讨论 | 第30-32页 |
3.1 ELISA检测牛冠状病毒 | 第30页 |
3.2 PCR | 第30-32页 |
试验三 犊牛轮状病毒重组蛋白VP6间接ELISA诊断方法的建立与初步应用 | 第32-50页 |
1.材料与方法 | 第33-37页 |
1.1 材料 | 第33页 |
1.2 方法 | 第33-35页 |
1.3 重组蛋白VP6间接ELISA诊断方法的优化 | 第35-37页 |
2.结果与分析 | 第37-49页 |
2.1 目的基因的扩增 | 第37页 |
2.2 pET32a-VP6原核表达载体的构建及双酶切鉴定 | 第37-38页 |
2.3 重组蛋白VP6-32a-DE3的诱导表达图及经大量诱导后上清和包涵体的鉴定 | 第38-39页 |
2.4 His标签蛋白纯化.试剂盒(可溶性蛋白)和His标签蛋白纯化试剂盒(包涵体蛋白)重组蛋白VP6-32a-DE_3纯化图 | 第39-42页 |
2.5 重组蛋白VP6-32a-DE3Westernblotting鉴定 | 第42-43页 |
2.6 间接ELISA诊断最佳条件的优化 | 第43-48页 |
2.7 间接ELISA方法与进口的试剂盒比较 | 第48-49页 |
3.讨论 | 第49-50页 |
试验四 犊牛冠状病毒重组N蛋白间接ELISA诊断方法的建立与初步应用 | 第50-67页 |
1.材料方法 | 第51-54页 |
1.1 材料 | 第51页 |
1.2 方法 | 第51-52页 |
1.3 间接ELISA检测方法的优化 | 第52-54页 |
1.4 与进口的试剂盒符合率检验 | 第54页 |
2.结果与分析 | 第54-64页 |
2.1 牛冠状病毒N基因的扩增 | 第54-55页 |
2.2 鉴定重组克隆载体pMD19-T-N | 第55页 |
2.3 重组表达载体pMD19-T-32a-N的双酶切及其表达的蛋白鉴定 | 第55-57页 |
2.4 BCV-N-32a-DE3表达的蛋白纯化结果和性能鉴定 | 第57-58页 |
2.5 牛冠状病毒重组表达BCV-N-32a-DE3的Westernblot鉴定 | 第58-59页 |
2.6 间接ELISA检测牛冠状病毒抗体方法的建立及条件优化结果 | 第59-64页 |
2.7 与进口的试剂盒符合率检验 | 第64页 |
3.讨论 | 第64-67页 |
全文总结 | 第67-68页 |
创新点 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
附录 | 第78-89页 |
作者简介 | 第89-90页 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第90页 |