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犊牛冠状病毒和轮状病毒间接ELISA诊断方法的建立与初步应用

中文摘要第6-7页
Abstract第7-8页
缩略词第12-13页
第一章 绪论第13-19页
    1.牛冠状病毒(BCV)和牛轮状病毒(BRV)的分类和主要特性第13-14页
        1.1 牛冠状病毒(BCV)的分类和主要特性第13页
        1.2 牛轮状病毒(BRV)的分类和主要特性第13页
        1.3 轮状病毒结构蛋白和非结构蛋白的特点第13-14页
    2.牛冠状病毒和轮状病毒的流行情况第14页
        2.1 牛冠状病毒的流行情况第14页
        2.2 牛轮状病毒的流行情况第14页
    3.牛冠状病毒和轮状病毒的检测方法研究进展第14-19页
        3.1 病毒分离培养鉴定第14页
        3.2 病毒中和试验(VN)第14-15页
        3.3 血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验第15页
        3.4 荧光抗体技术(FA)第15页
        3.5 乳胶凝集反应(LAT)第15页
        3.6 酶联免疫吸附试验(ELISA)第15-16页
        3.7 PCR技术第16-18页
        3.8 免疫胶体金技术的优点第18页
        3.9 其他方面的研究第18-19页
第二章 试验研究第19-67页
    试验一 新疆部分地区犊牛轮状病毒感染的调查第19-26页
        1.材料与方法第19-22页
            1.1 材料第19-20页
            1.2 方法第20-22页
        2.结果与分析第22-24页
            2.1 PCR检测牛轮状病毒结果第22-23页
            2.2 ELISA检测结果第23-24页
        3.讨论第24-26页
    试验二 新疆部分地区犊牛冠状病毒感染的调查第26-32页
        1.材料与方法第26-28页
            1.1 材料第26页
            1.2 方法第26-28页
        2.结果与分析第28-30页
            2.1 PCR检测牛冠状病毒结果第28-30页
            2.2 ELISA检测结果第30页
        3.讨论第30-32页
            3.1 ELISA检测牛冠状病毒第30页
            3.2 PCR第30-32页
    试验三 犊牛轮状病毒重组蛋白VP6间接ELISA诊断方法的建立与初步应用第32-50页
        1.材料与方法第33-37页
            1.1 材料第33页
            1.2 方法第33-35页
            1.3 重组蛋白VP6间接ELISA诊断方法的优化第35-37页
        2.结果与分析第37-49页
            2.1 目的基因的扩增第37页
            2.2 pET32a-VP6原核表达载体的构建及双酶切鉴定第37-38页
            2.3 重组蛋白VP6-32a-DE3的诱导表达图及经大量诱导后上清和包涵体的鉴定第38-39页
            2.4 His标签蛋白纯化.试剂盒(可溶性蛋白)和His标签蛋白纯化试剂盒(包涵体蛋白)重组蛋白VP6-32a-DE_3纯化图第39-42页
            2.5 重组蛋白VP6-32a-DE3Westernblotting鉴定第42-43页
            2.6 间接ELISA诊断最佳条件的优化第43-48页
            2.7 间接ELISA方法与进口的试剂盒比较第48-49页
        3.讨论第49-50页
    试验四 犊牛冠状病毒重组N蛋白间接ELISA诊断方法的建立与初步应用第50-67页
        1.材料方法第51-54页
            1.1 材料第51页
            1.2 方法第51-52页
            1.3 间接ELISA检测方法的优化第52-54页
            1.4 与进口的试剂盒符合率检验第54页
        2.结果与分析第54-64页
            2.1 牛冠状病毒N基因的扩增第54-55页
            2.2 鉴定重组克隆载体pMD19-T-N第55页
            2.3 重组表达载体pMD19-T-32a-N的双酶切及其表达的蛋白鉴定第55-57页
            2.4 BCV-N-32a-DE3表达的蛋白纯化结果和性能鉴定第57-58页
            2.5 牛冠状病毒重组表达BCV-N-32a-DE3的Westernblot鉴定第58-59页
            2.6 间接ELISA检测牛冠状病毒抗体方法的建立及条件优化结果第59-64页
            2.7 与进口的试剂盒符合率检验第64页
        3.讨论第64-67页
全文总结第67-68页
创新点第68-69页
参考文献第69-77页
致谢第77-78页
附录第78-89页
作者简介第89-90页
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表第90页

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