摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-10页 |
材料和方法 | 第10-19页 |
1 材料 | 第10页 |
2 主要设备及仪器 | 第10-11页 |
3 宫颈癌Hela细胞培养 | 第11-12页 |
3.1 细胞传代 | 第11页 |
3.2 细胞冻存 | 第11-12页 |
3.3 细胞复苏 | 第12页 |
3.4 细胞计数 | 第12页 |
4 慢病毒感染Hela细胞条件的优化 | 第12-14页 |
4.1 慢病毒载体RNAi的制备 | 第12-13页 |
4.2 慢病毒感染条件和感染参数的优化 | 第13页 |
4.3 最佳RNA干扰序列的筛选 | 第13-14页 |
5 Westernblot检测细胞蛋白表达 | 第14-16页 |
5.1 总蛋白提取 | 第14页 |
5.2 BCA法测蛋白浓度 | 第14页 |
5.3 SDS-PAGE电泳 | 第14-15页 |
5.4 转膜 | 第15页 |
5.5 免疫检测 | 第15-16页 |
5.6 化学发光 | 第16页 |
6 SIRT1RNAi对裸鼠宫颈癌移植瘤的抑制作用 | 第16-17页 |
6.1 细胞的收获 | 第16页 |
6.2 建立人宫颈癌裸鼠移植瘤模型 | 第16-17页 |
7 Westernblot检测组织蛋白表达 | 第17页 |
7.1 肿瘤组织总蛋白提取 | 第17页 |
7.2 Westernblot | 第17页 |
8 HE染色及免疫组化 | 第17-18页 |
8.1 组织切片的制备 | 第17页 |
8.2 HE染色 | 第17页 |
8.3 免疫组织化学染色法 | 第17-18页 |
9 统计学分析 | 第18-19页 |
结果 | 第19-28页 |
1 慢病毒感染Hela细胞的优化 | 第19-21页 |
2 SIRT1RNAi抑制Hela细胞SIRT1蛋白的表达 | 第21-22页 |
3 SIRT1RNAi对裸鼠宫颈癌移植瘤生长的抑制作用 | 第22-25页 |
3.1 裸鼠造模所用细胞活力检测 | 第22页 |
3.2 裸鼠成瘤情况 | 第22-23页 |
3.3 裸鼠移植瘤的生长情况比较 | 第23-24页 |
3.4 裸鼠移植瘤瘤体重量比较 | 第24-25页 |
4 裸鼠移植瘤模型瘤体组织病理学检查 | 第25-27页 |
5 WesternBlot检测相关蛋白的表达水平 | 第27-28页 |
讨论 | 第28-31页 |
结论 | 第31-32页 |
参考文献 | 第32-35页 |
综述 | 第35-45页 |
综述参考文献 | 第42-45页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |