| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-40页 |
| 1.1 精子发生概述 | 第12-13页 |
| 1.2 生殖细胞发育 | 第13-22页 |
| 1.2.1 性原细胞 | 第13页 |
| 1.2.2 精原干细胞 | 第13-15页 |
| 1.2.3 精原细胞的分化 | 第15-17页 |
| 1.2.4 精母细胞 | 第17-20页 |
| 1.2.5 精细胞 | 第20-22页 |
| 1.3 支持细胞 | 第22-28页 |
| 1.3.1 支持细胞概述 | 第22页 |
| 1.3.2 支持细胞的功能 | 第22-24页 |
| 1.3.3 支持细胞的增殖 | 第24-26页 |
| 1.3.4 支持细胞的成熟 | 第26页 |
| 1.3.5 支持细胞标记物 | 第26-28页 |
| 1.4 血睾屏障 | 第28-35页 |
| 1.4.0 血睾屏障概述 | 第28-30页 |
| 1.4.1 精子发生和血睾屏障 | 第30-31页 |
| 1.4.2 血睾屏障的结构和功能 | 第31-35页 |
| 1.4.2.1 血辜屏障的背景和独特的结构特点 | 第31-33页 |
| 1.4.2.2 血睾屏障功能 | 第33-35页 |
| 1.4.2.2.1 血睾屏障“篱笛”和“守门员”功能 | 第33-34页 |
| 1.4.2.2.2 免疫屏障 | 第34页 |
| 1.4.2.2.3 赋予生精上皮细胞极性 | 第34-35页 |
| 1.5 基因敲除技术 | 第35-40页 |
| 1.5.1 基因敲除概述 | 第35-36页 |
| 1.5.2 条件性基因敲除 | 第36-40页 |
| 第2章 材料和方法 | 第40-56页 |
| 2.1 材料 | 第40-46页 |
| 2.1.1 试剂 | 第40-44页 |
| 2.1.2 实验耗材 | 第44-45页 |
| 2.1.3 实验仪器和设备 | 第45页 |
| 2.1.4 实验动物 | 第45-46页 |
| 2.2 实验方法 | 第46-56页 |
| 2.2.1 主要溶液配置 | 第46页 |
| 2.2.2 小鼠血清收集、组织收集和固定 | 第46页 |
| 2.2.3 精子计数 | 第46-47页 |
| 2.2.4 支持细胞分离培养 | 第47页 |
| 2.2.5 睾丸组织石蜡包埋及切片 | 第47-48页 |
| 2.2.6 石蜡切片免疫组织化学 | 第48-49页 |
| 2.2.7 冰冻切片免疫荧光 | 第49-50页 |
| 2.2.8 mRNA抽提、基因表达Q-PCR检测 | 第50-51页 |
| 2.2.9 Western blot | 第51-52页 |
| 2.2.10 基因组抽提及小鼠基因型鉴定 | 第52页 |
| 2.2.11 细胞凋亡TUNEL染色 | 第52-53页 |
| 2.2.12 小鼠精母细胞荧光免疫染色 | 第53页 |
| 2.2.13 细胞倍型分析 | 第53-54页 |
| 2.2.14 减数分裂延滞分析 | 第54页 |
| 2.2.15 血睾屏障功能分析 | 第54-56页 |
| 第3章 结果和讨论 | 第56-107页 |
| 3.1 血睾屏障粘附连接基因Cdh2对精子发生的调节 | 第56-71页 |
| 3.1.1 CDH2在小鼠睾丸中的表达和定位 | 第56-58页 |
| 3.1.2 条件性敲除小鼠获得和鉴定 | 第58-59页 |
| 3.1.3 小鼠睾丸支持细胞Cdh2敲除对小鼠生育力和精子形成的影响 | 第59-61页 |
| 3.1.4 支持细胞Cdh2缺陷对支持细胞数量和血睾屏障功能的影响 | 第61-64页 |
| 3.1.5 小鼠睾丸支持细胞Cdh2敲除对生殖细胞发育的影响 | 第64-65页 |
| 3.1.6 小鼠支持细胞Cdh2敲除对精原细胞的影响 | 第65-66页 |
| 3.1.7 小鼠支持细胞Cdh2敲除对精母细胞的影响 | 第66-68页 |
| 3.1.8 小鼠支持细胞Cdh2敲除导致精母细胞减少的原因 | 第68-69页 |
| 3.1.9 小鼠生殖细胞Cdh2敲除细胞与精子发生 | 第69-71页 |
| 3.2 不同血睾屏障连接组分对精子发生的调节 | 第71-82页 |
| 3.2.1 支持细胞Cdh2和Cx43双敲除小鼠获得和鉴定 | 第71-73页 |
| 3.2.2 小鼠睾丸支持细胞Cdh2和Cx43双敲除对精子形成的影响 | 第73-76页 |
| 3.2.3 小鼠睾丸支持细胞Cdh2和Cx43双敲除对不同阶段生殖细胞的影响 | 第76-78页 |
| 3.2.4 小鼠睾丸支持细胞Cdh2和Cx43双敲除对支持细胞数量和功能的影响 | 第78-81页 |
| 3.2.5 小鼠睾丸支持细胞Cdh2和Cx43双敲除对支持细胞中β-catenin表达的影响 | 第81-82页 |
| 3.3 小G蛋白基因Rac1对精子发生的调节 | 第82-102页 |
| 3.3.1 RAC1在小鼠睾丸中的表达和定位 | 第83-84页 |
| 3.3.2 生殖细胞Rac1敲除不影响小鼠精子发生 | 第84-86页 |
| 3.3.3 条件性敲除小鼠获得和鉴定 | 第86-87页 |
| 3.3.4 支持细胞Rac1敲除对成年小鼠精子发生的影响 | 第87-90页 |
| 3.3.5 支持细胞Rac1敲除对青春期小鼠精子发生的影响 | 第90-91页 |
| 3.3.6 支持细胞Rac1敲除对不同阶段生殖细胞的影响 | 第91-97页 |
| 3.3.7 支持细胞Rac1敲除对支持细胞数量和功能的影响 | 第97-101页 |
| 3.3.8 支持细胞Rac1敲除导致精子发生异常的分子机理 | 第101-102页 |
| 3.3.9 小鼠生殖细胞和支持细胞同时Rac1敲除与支持细胞单独敲除表型一致 | 第102页 |
| 3.4 细胞周期调控基因Npat与精子发生 | 第102-106页 |
| 3.4.1 支持细胞Npat敲除对精子发生的影响 | 第103-106页 |
| 3.5 小结 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-126页 |
| 参加会议情况 | 第126-128页 |
| 致谢 | 第128-130页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的成果 | 第130页 |
