| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第15-17页 |
| 1 绪论 | 第17-31页 |
| 1.1 国内外研究进展 | 第17-28页 |
| 1.1.1 乙烯的生物合成及信号转导 | 第17-20页 |
| 1.1.2 乙烯的生物学功能 | 第20-22页 |
| 1.1.3 MADS-box蛋白的分类及结构 | 第22-24页 |
| 1.1.4 番茄中MADS-box蛋白的功能 | 第24-28页 |
| 1.2 问题的提出及研究意义 | 第28页 |
| 1.3 研究内容与技术路线 | 第28-30页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第28-30页 |
| 1.3.2 技术路线 | 第30页 |
| 1.4 课题的创新点 | 第30-31页 |
| 2 SlFYFL基因的克隆 | 第31-43页 |
| 2.1 实验材料、试剂及培养基 | 第31-32页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第31页 |
| 2.1.2 试剂与培养基 | 第31-32页 |
| 2.2 仪器与设备 | 第32-33页 |
| 2.3 实验方法 | 第33-39页 |
| 2.3.1 总RNA的提取 | 第33页 |
| 2.3.2 cDNA的合成 | 第33-34页 |
| 2.3.3 SlFYFL基因的引物设计 | 第34页 |
| 2.3.4 SlFYFL基因的PCR扩增及纯化 | 第34-35页 |
| 2.3.5 SlFYFL基因连接T载体 | 第35-36页 |
| 2.3.6 pMD18-T-SlFYFL转化大肠杆菌 | 第36-39页 |
| 2.4 结果与分析 | 第39-41页 |
| 2.4.1 SlFYFL基因的PCR扩增 | 第39页 |
| 2.4.2 pMD18-T-FYFL重组子的筛选及验证 | 第39-40页 |
| 2.4.3 SlFYFL基因的测序验证 | 第40-41页 |
| 2.5 小结 | 第41-43页 |
| 3 SlFYFL基因的生物信息学分析 | 第43-51页 |
| 3.1 分析方法 | 第43页 |
| 3.1.1 SlFYFL蛋白的一级结构 | 第43页 |
| 3.1.2 SlFYFL蛋白的二级结构 | 第43页 |
| 3.1.3 SlFYFL蛋白的理化性质分析及亚细胞定位预测 | 第43页 |
| 3.1.4 SlFYFL蛋白与其他MADS-box蛋白的同源比对 | 第43页 |
| 3.1.5 SlFYFL蛋白与其他MADS-box蛋白的系统进化分析 | 第43页 |
| 3.2 结果与分析 | 第43-49页 |
| 3.2.1 SlFYFL蛋白的一级结构 | 第43-46页 |
| 3.2.2 SlFYFL蛋白的二级结构 | 第46-47页 |
| 3.2.3 SlFYFL蛋白的理化性质分析及亚细胞定位 | 第47页 |
| 3.2.4 SlFYFL蛋白与其他MADS-box蛋白的同源比对 | 第47-48页 |
| 3.2.5 SlFYFL蛋白与其他MADS-box蛋白的系统发育分析 | 第48-49页 |
| 3.3 小结 | 第49-51页 |
| 4 SlFYFL基因的表达模式分析 | 第51-57页 |
| 4.1 实验材料和试剂 | 第51页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第51页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第51页 |
| 4.2 仪器设备 | 第51页 |
| 4.3 实验方法 | 第51-53页 |
| 4.3.1 样品收集 | 第51-52页 |
| 4.3.2 总RNA的提取及cDNA的合成 | 第52页 |
| 4.3.3 SlFYFL基因qRT-PCR引物设计及扩增条件摸索 | 第52-53页 |
| 4.3.4 SlFYFL基因的表达模式分析 | 第53页 |
| 4.4 结果与分析 | 第53-55页 |
| 4.4.1 SlFYFL基因qRT-PCR扩增条件 | 第53-54页 |
| 4.4.2 SlFYFL基因在番茄不同组织中的表达模式 | 第54-55页 |
| 4.5 小结 | 第55-57页 |
| 5 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默载体的构建 | 第57-85页 |
| 5.1 实验材料与试剂 | 第57-58页 |
| 5.2 仪器与设备 | 第58页 |
| 5.3 实验方法 | 第58-72页 |
| 5.3.1 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默载体的构建 | 第58-59页 |
| 5.3.2 SlFYFL基因超表达片段的克隆 | 第59-60页 |
| 5.3.3 pBI121-FYFL超表达载体的构建 | 第60-63页 |
| 5.3.4 SlFYFL基因沉默片段的克隆 | 第63-65页 |
| 5.3.5 pHANNIBAL-FYFLi载体的构建 | 第65-69页 |
| 5.3.6 pBI121-FYFLi沉默载体的构建 | 第69-72页 |
| 5.4 结果与分析 | 第72-84页 |
| 5.4.1 SlFYFL基因超表达片段克隆 | 第72页 |
| 5.4.2 pBI121-FYFL超表达载体重组子的筛选及验证 | 第72-75页 |
| 5.4.3 SlFYFL基因沉默片段的克隆 | 第75-76页 |
| 5.4.4 pHANNIBAL-FYFLi载体的构建 | 第76-81页 |
| 5.4.5 pBI121-FYFLi沉默载体的筛选及测序 | 第81-84页 |
| 5.5 小结 | 第84-85页 |
| 6 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默载体转化番茄 | 第85-105页 |
| 6.1 材料、试剂及培养基 | 第85-88页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第85页 |
| 6.1.2 实验试剂 | 第85-86页 |
| 6.1.3 实验培养基 | 第86-88页 |
| 6.2 仪器与设备 | 第88页 |
| 6.3 实验方法 | 第88-96页 |
| 6.3.1 超表达及沉默菌株与农杆菌结合转移（转化） | 第88-89页 |
| 6.3.2 pBI121-FYFL和pBI121-FYFLi载体转化农杆菌 | 第89-92页 |
| 6.3.3 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默载体转化番茄 | 第92-93页 |
| 6.3.4 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄的培育 | 第93-94页 |
| 6.3.5 SlFYFL基因阳性超表达及RNAi沉默转基因番茄株系的PCR筛选 | 第94-96页 |
| 6.3.6 SlFYFL基因在超表达及RNAi沉默转基因番茄株系中表达检测及筛选 | 第96页 |
| 6.4 结果与分析 | 第96-103页 |
| 6.4.1 pBI121-FYFL和pBI121-FYFLi载体转化农杆菌 | 第96-99页 |
| 6.4.2 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄的培育 | 第99-100页 |
| 6.4.3 SlFYFL基因阳性超表达及RNAi沉默转基因番茄株系的PCR筛选 | 第100-101页 |
| 6.4.4 SlFYFL基因在超表达及RNAi沉默转基因番茄株系中表达检测及筛选 | 第101-103页 |
| 6.5 小结 | 第103-105页 |
| 7 SlFYFL基因在番茄叶片衰老中的功能分析 | 第105-115页 |
| 7.1 材料及试剂 | 第105页 |
| 7.1.1 实验材料 | 第105页 |
| 7.1.2 实验试剂 | 第105页 |
| 7.2 仪器与设备 | 第105页 |
| 7.3 实验方法 | 第105-107页 |
| 7.3.1 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系叶片表型观察 | 第105页 |
| 7.3.2 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系叶片离体衰老诱导处理 | 第105-106页 |
| 7.3.3 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系叶片叶绿素含量测定 | 第106页 |
| 7.3.4 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系叶片光合作用相关基因检测 | 第106-107页 |
| 7.3.5 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系叶片乙烯合成相关基因检测 | 第107页 |
| 7.4 结果与分析 | 第107-113页 |
| 7.4.1 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系叶片表型观察 | 第107-108页 |
| 7.4.2 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系叶片离体衰老诱导处理表型 | 第108-109页 |
| 7.4.3 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系叶片叶绿素含量测定 | 第109-111页 |
| 7.4.4 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系叶片光合作用相关基因检测 | 第111-112页 |
| 7.4.5 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系叶片乙烯合成相关基因检测 | 第112-113页 |
| 7.5 小结 | 第113-115页 |
| 8 SlFYFL基因在番茄果实成熟及贮藏中的功能分析 | 第115-147页 |
| 8.1 材料及试剂 | 第115-120页 |
| 8.1.1 实验材料 | 第115-116页 |
| 8.1.2 试剂与培养基 | 第116-120页 |
| 8.2 仪器与设备 | 第120页 |
| 8.3 实验方法 | 第120-132页 |
| 8.3.1 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系果实成熟表型观察 | 第120-121页 |
| 8.3.2 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系果实成熟时间统计 | 第121页 |
| 8.3.3 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系果实类胡萝卜素含量测定 | 第121页 |
| 8.3.4 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果实类胡萝卜素合成相关基因检测105 | 第121-122页 |
| 8.3.5 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系果实乙烯合成量的检测 | 第122页 |
| 8.3.6 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系果实乙烯合成相关基因的检测106 | 第122-123页 |
| 8.3.7 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系果实中乙烯响应基因的检测 | 第123-124页 |
| 8.3.8 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系果实果皮硬度检测 | 第124页 |
| 8.3.9 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系果实耐贮藏性检测 | 第124页 |
| 8.3.10 SlFYFL基因超表达及沉默转基因番茄果实果皮细胞壁代谢相关基因检测 | 第124-125页 |
| 8.3.11 SlFYFL基因超表达及沉默转基因番茄果实脂肪氧化酶合成相关基因检测 | 第125-126页 |
| 8.3.12 SlFYFL与SlMADS-RIN及SlMADS1等成熟相关蛋白的互作分析 | 第126-132页 |
| 8.4 结果与分析 | 第132-145页 |
| 8.4.1 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄株系果实成熟表型观察 | 第132-133页 |
| 8.4.2 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果实成熟时间统计 | 第133-134页 |
| 8.4.3 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果实类胡萝卜素含量测定 | 第134-135页 |
| 8.4.4 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果实类胡萝卜素合成相关基因检测 | 第135-136页 |
| 8.4.5 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果实乙烯合成量的检测 | 第136-137页 |
| 8.4.6 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果实乙烯合成相关基因的检测 | 第137-139页 |
| 8.4.7 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果实中乙烯响应基因的检测 | 第139-140页 |
| 8.4.8 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果实果皮硬度检测 | 第140页 |
| 8.4.9 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果实耐贮藏性检测 | 第140-141页 |
| 8.4.10 SlFYFL基因超表达及沉默转基因番茄果实果皮细胞壁代谢相关基因检测 | 第141-143页 |
| 8.4.11 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果实脂肪氧化酶相关基因检测 | 第143-144页 |
| 8.4.12 SlFYFL与SlMADS-RIN及SlMADS1等番茄果实成熟相关蛋白的互作检测 | 第144-145页 |
| 8.5 小结 | 第145-147页 |
| 9 SlFYFL基因在番茄果柄离区发育中的功能分析 | 第147-163页 |
| 9.1 材料、试剂及培养基 | 第147页 |
| 9.1.1 实验材料 | 第147页 |
| 9.1.2 试剂与培养基 | 第147页 |
| 9.2 仪器与设备 | 第147页 |
| 9.3 实验方法 | 第147-151页 |
| 9.3.1 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果柄离区发育表型观察 | 第147页 |
| 9.3.2 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果柄离层细胞发育显微观察 | 第147-148页 |
| 9.3.3 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果柄离区断裂强度测试 | 第148页 |
| 9.3.4 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果柄离区形成相关基因的检测 | 第148-149页 |
| 9.3.5 SlFYFL基因超表达及沉默转基因番茄果柄离区中乙烯合成相关基因的检测 | 第149-150页 |
| 9.3.6 SlFYFL与SlJOINTLESS的蛋白互作分析 | 第150-151页 |
| 9.4 结果与分析 | 第151-161页 |
| 9.4.1 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果柄离区发育表型观察 | 第151-153页 |
| 9.4.2 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果柄离层细胞发育显微观察 | 第153-154页 |
| 9.4.3 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果柄离区断裂强度测试 | 第154-155页 |
| 9.4.4 SlFYFL基因超表达及RNAi沉默转基因番茄果柄离区形成相关基因的检测 | 第155-156页 |
| 9.4.5 SlFYFL基因超表达及沉默转基因番茄果柄细胞壁代谢相关基因的表达检测 | 第156-158页 |
| 9.4.6 SlFYFL基因超表达及沉默转基因番茄果柄离区发育相关转录因子的表达检测 | 第158页 |
| 9.4.7 SlFYFL基因超表达及沉默转基因番茄果柄离区乙烯合成相关基因的表达检测 | 第158-161页 |
| 9.4.8 SlFYFL与SlJOINTLESS蛋白互作分析 | 第161页 |
| 9.5 小结 | 第161-163页 |
| 10 讨论 | 第163-169页 |
| 10.1 SlFYFL基因在番茄叶片衰老中的功能 | 第163页 |
| 10.2 SlFYFL基因在番茄果实成熟中的功能 | 第163-165页 |
| 10.3 SlFYFL基因与番茄果实耐贮藏性的关系 | 第165页 |
| 10.4 SlFYFL基因在番茄果实果柄离区发育中的功能 | 第165-169页 |
| 11 结论与展望 | 第169-173页 |
| 11.1 主要结论 | 第169-170页 |
| 11.1.1 SlFYFL可能通过乙烯调节番茄的衰老及果实成熟 | 第169-170页 |
| 11.1.2 SlFYFL可能通过蛋白质相互作用调节番茄衰老及果实成熟 | 第170页 |
| 11.2 展望 | 第170-173页 |
| 致谢 | 第173-175页 |
| 参考文献 | 第175-187页 |
| 附录 | 第187-188页 |
| A.作者在攻读博士学位期间发表的论文目录 | 第187-188页 |
| B.作者在攻读博士学位期间的其他研究工作 | 第188页 |
| C.作者在攻读博士学位期间专利情况 | 第188页 |
| D.作者在攻读博士学位期间参加的科研项目 | 第188页 |
