英文缩略词 | 第8-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-13页 |
第一章 研究背景综述 | 第14-22页 |
1 水仙概述 | 第14-15页 |
2 SSR分子标记技术 | 第15-18页 |
2.1 SSR分子标记的定义和原理 | 第15页 |
2.2 SSR标记的优缺点 | 第15-16页 |
2.3 SSR分子标记在植物研究中的应用 | 第16-18页 |
2.3.1 植物种质资源的鉴定分析 | 第16-17页 |
2.3.2 植物亲缘关系及遗传多样性分析 | 第17页 |
2.3.3 构建植物遗传连锁图谱 | 第17-18页 |
2.3.4 SSR标记辅助育种 | 第18页 |
3 分子标记在水仙上的应用 | 第18-19页 |
4 开发SSR标记的途径 | 第19-21页 |
5 本研究的目的及意义 | 第21页 |
6 技术路线 | 第21-22页 |
第二章 水仙BES-SSR标记的开发及位点分析 | 第22-42页 |
1 材料与方法 | 第22-28页 |
1.1 材料 | 第22-23页 |
1.1.1 植物材料及BESs | 第22-23页 |
1.1.2 仪器设备 | 第23页 |
1.2 方法 | 第23-28页 |
1.2.1 水仙BES-SSR位点信息检索 | 第23-24页 |
1.2.2 水仙BES-SSR标记引物设计 | 第24页 |
1.2.3 水仙总DNA提取及检测 | 第24-25页 |
1.2.4 水仙BES-SSR-PCR体系的建立及优化 | 第25-27页 |
1.2.4.1 PCR反应体系的初步建立 | 第25-26页 |
1.2.4.2 PCR反应体系单因素梯度实验设计 | 第26页 |
1.2.4.3 PCR反应体系正交实验设计 | 第26-27页 |
1.2.5 水仙BES-SSR标记引物筛选 | 第27-28页 |
2 结果与分析 | 第28-38页 |
2.1 水仙BES-SSR出现频率及特点 | 第28-29页 |
2.2 水仙BES-SSR-PCR体系的建立及优化 | 第29-31页 |
2.2.1 DNA浓度单因素实验梯度分析 | 第29-30页 |
2.2.2 Taq酶量单因素实验梯度分析 | 第30页 |
2.2.3 dNTPs浓度单因素实验梯度分析 | 第30-31页 |
2.2.4 引物浓度单因素实验梯度分析 | 第31页 |
2.3 SSR-PCR反应体系正交实验结果分析 | 第31-34页 |
2.3.1 DNA模板对SSR-PCR体系的影响 | 第32-33页 |
2.3.2 dNTPs对SSR-PCR体系的影响 | 第33页 |
2.3.3 引物对SSR-PCR体系的影响 | 第33-34页 |
2.3.4 Taq酶对SSR-PCR体系的影响 | 第34页 |
2.4 最优PCR反应体系的验证分析 | 第34-38页 |
2.5 水仙BES-SSR标记引物的筛选分析 | 第38页 |
3 讨论 | 第38-40页 |
3.1 水仙BES-SSR分布特征 | 第38页 |
3.2 水仙BES-SSR反应体系的建立与优化 | 第38-39页 |
3.3 水仙BES-SSR标记引物的多态性分析 | 第39-40页 |
4 结论 | 第40-42页 |
第三章 水仙BES-SSR标记重复性检测及验证分析 | 第42-52页 |
1 材料与方法 | 第42-44页 |
1.1 植物材料 | 第42页 |
1.2 仪器与试剂 | 第42-43页 |
1.3 实验方法 | 第43-44页 |
1.3.1 样品总DNA提取及检测 | 第43页 |
1.3.2 水仙BES-SSR-PCR扩增及产物检测 | 第43页 |
1.3.3 SSR-PCR扩增产物片段的回收与纯化 | 第43页 |
1.3.4 SSR-PCR产物目的基因与载体的连接 | 第43页 |
1.3.5 SSR-PCR连接产物的转化与测序 | 第43-44页 |
1.3.6 核心位点序列比对分析 | 第44页 |
2 结果与分析 | 第44-49页 |
2.1 水仙SSR标记引物重复性验证分析 | 第44-45页 |
2.2 水仙SSR标记核心位点比对分析 | 第45-49页 |
2.2.1 引物扩增结果分析 | 第46页 |
2.2.2 扩增产物DNA片段菌液验证 | 第46-47页 |
2.2.3 核心位点比对分析 | 第47-49页 |
3 讨论 | 第49-52页 |
第四章 水仙BES-SSR在种质鉴定及遗传多样性分析上的应用 | 第52-66页 |
1 材料与方法 | 第52-55页 |
1.1 材料及引物 | 第52-54页 |
1.2 方法 | 第54-55页 |
1.2.1 水仙总DNA提取及检测 | 第54页 |
1.2.2 SSR-PCR扩增及程序 | 第54页 |
1.2.3 扩增产物检测分析 | 第54页 |
1.2.4 数据统计与分析 | 第54-55页 |
2 结果与分析 | 第55-63页 |
2.1 水仙材料总DNA检测分析 | 第55页 |
2.2 SSR标记扩增结果分析 | 第55-56页 |
2.3 SSR标记引物多态性分析 | 第56-57页 |
2.4 水仙BES-SSR聚类分析 | 第57-62页 |
2.5 水仙遗传多样性分析 | 第62-63页 |
3 讨论 | 第63-64页 |
4 结论 | 第64-66页 |
第五章 水仙BES-SSR标记在近缘属君子兰植物上的通用性分析 | 第66-76页 |
1 材料与方法 | 第66-68页 |
1.1 材料及处理 | 第66-67页 |
1.2 方法 | 第67-68页 |
1.2.1 君子兰总DNA提取及检测 | 第67页 |
1.2.2 SSR-PCR扩增体系及程序 | 第67-68页 |
1.2.3 SSR-PCR扩增产物检测 | 第68页 |
1.2.4 数据统计与分析 | 第68页 |
2 结果与分析 | 第68-73页 |
2.1 君子兰样品总DNA检测分析 | 第68页 |
2.2 SSR引物筛选扩增及通用性分析 | 第68-71页 |
2.3 水仙BES-SSR标记引物对君子兰的多态性分析 | 第71页 |
2.4 21份供试君子兰样品间的遗传相似性分析及聚类分析 | 第71-73页 |
3 讨论 | 第73-75页 |
3.1 水仙BES-SSR标记引物对君子兰的通用性分析 | 第73-74页 |
3.2 水仙BES-SSR标记引物对君子兰的多态性分析 | 第74页 |
3.3 21份君子兰样品间的遗传多样性分析 | 第74-75页 |
4 结论 | 第75-76页 |
第六章 总结及展望 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-86页 |
附录Ⅰ 水仙BES-SSR核心位点及其侧翼序列信息 | 第86-94页 |
附录Ⅱ 各引物对36份水仙材料的扩增结果 | 第94-102页 |
附录Ⅲ 各引物对21份君子兰品种的扩增结果 | 第102-110页 |
在读期间学术研究 | 第110-112页 |
致谢 | 第112页 |