摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-15页 |
1.1 果实样品蛋白质的提取方法 | 第11-12页 |
1.2 蛋白质分离鉴定的技术 | 第12-13页 |
1.2.1 双向凝胶电泳 | 第12页 |
1.2.2 质谱 (mass spectrometry) 技术 | 第12页 |
1.2.3 同位素标记的亲和标签(ICAT) | 第12-13页 |
1.2.4 同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ) | 第13页 |
1.3 蛋白质组学在果实成熟衰老研究中的应用 | 第13-14页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-20页 |
2.1 材料 | 第15页 |
2.2 试剂和仪器 | 第15-16页 |
2.2.1 试剂 | 第15页 |
2.2.2 仪器 | 第15-16页 |
2.3 试验方法 | 第16-20页 |
2.3.1 采样方法 | 第16页 |
2.3.2 生理指标的测定 | 第16页 |
2.3.2.1 果实单果重以及纵横径的测定 | 第16页 |
2.3.2.2 果实硬度、可溶性固形物和可滴定酸的测定 | 第16页 |
2.3.2.3 果实鲜重淀粉含量的测定 | 第16页 |
2.3.3 蛋白质提取方法 | 第16-17页 |
2.3.3.1 TCA/丙酮法 | 第16-17页 |
2.3.3.2 苯酚法 | 第17页 |
2.3.3.3 改良苯酚法 | 第17页 |
2.3.4 蛋白裂解及粗定量 | 第17页 |
2.3.5 双向凝胶电泳 | 第17-18页 |
2.3.6 图像采集和统计分析 | 第18页 |
2.3.7 胶内酶解和质谱分析 | 第18-19页 |
2.3.8 MASCOT 数据库检索 | 第19页 |
2.3.9 RNA 提取,cDNA 合成和实时定量 RT-PCR | 第19-20页 |
第三章 结果与分析 | 第20-34页 |
3.1 早酥及其极早熟芽变发育过程中成熟度确定和生理指标的比较分析 | 第20-22页 |
3.2 不同蛋白提取方法对果实提取效率分析 | 第22页 |
3.3 不同电泳体系的 2-DE 图谱结果 | 第22-24页 |
3.3.1 不同胶条长度 | 第22-23页 |
3.3.2 不同平衡时间 | 第23-24页 |
3.3.3 不同上样量 | 第24页 |
3.4 早酥和芽变发育过程中的差异蛋白组学分析 | 第24-32页 |
3.5 差异表达蛋白质的功能分析 | 第32-33页 |
3.6 差异蛋白质的亚细胞定位 | 第33-34页 |
第四章 讨论 | 第34-41页 |
4.1 蛋白质提取方法 | 第34页 |
4.2 不同电泳体系对 2-DE 图谱的影响 | 第34页 |
4.2.1 IPG 胶条长度 | 第34页 |
4.2.2 不同的平衡时间 | 第34页 |
4.2.3 不同的上样量 | 第34页 |
4.3 早酥及其早熟芽变差异蛋白的功能讨论 | 第34-41页 |
4.3.1 果实膨大相关蛋白 | 第35-37页 |
4.3.2 细胞壁代谢相关蛋白 | 第37-38页 |
4.3.3 氧化压力相关蛋白 | 第38-39页 |
4.3.4 碳代谢和能量产生相关蛋白 | 第39-40页 |
4.3.5 其他代谢相关蛋白 | 第40-41页 |
第五章 结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
缩略词 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
作者简介 | 第49页 |