| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 匍柄霉属研究概述 | 第12-13页 |
| 1.1.1 新西兰匍柄霉(Stemphyliumeturmiunum)的分类地位及其生物学特性 | 第12-13页 |
| 1.1.2 对S.eturmiunum开展研究的经济重要性 | 第13页 |
| 1.2 真菌生殖的研究进展 | 第13-17页 |
| 1.2.1 无性与有性进化分析 | 第13-14页 |
| 1.2.2 真菌中与有性生殖相关的基因 | 第14-17页 |
| 1.3 asf1基因的研究进展 | 第17-23页 |
| 1.3.1 组蛋白分子伴侣家族概述 | 第17-18页 |
| 1.3.2 asf1基因的发现及克隆 | 第18-19页 |
| 1.3.3 asf1基因的基本结构 | 第19-21页 |
| 1.3.4 asf1基因的生物学功能 | 第21-23页 |
| 1.4 转录组学研究进展及应用 | 第23-24页 |
| 1.4.1 转录组学研究概况 | 第23-24页 |
| 1.4.2 转录组学研究的应用 | 第24页 |
| 1.5 本研究的科学意义 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-31页 |
| 2.1.1 常用菌株与质粒 | 第26页 |
| 2.1.2 主要酶及试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.4 主要培养基配方 | 第27-28页 |
| 2.1.5 主要溶液配方 | 第28-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-49页 |
| 2.2.1 S.eturmiunumasf1基因的克隆及鉴定 | 第31-37页 |
| 2.2.2 asf1基因的生物信息学分析 | 第37页 |
| 2.2.4 敲除载体pXEH-asf1的构建 | 第37-40页 |
| 2.2.5 根癌农杆菌介导的S.eturmiunum遗传转化系统的建立 | 第40-41页 |
| 2.2.6 转化子的筛选及初步验证 | 第41-42页 |
| 2.2.7 Southernblot检测潮霉素拷贝数 | 第42-46页 |
| 2.2.8 转化子生物学性状分析 | 第46-47页 |
| 2.2.9 野生型菌株和转化子菌株的无参转录组分析 | 第47-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-68页 |
| 3.0 asf1基因的克隆与鉴定 | 第49-50页 |
| 3.1 asf1基因的生物信息学分析 | 第50-52页 |
| 3.1.1 asf1基因的序列分析 | 第50-51页 |
| 3.1.2 asf1基因的序列一致性和聚类分析 | 第51-52页 |
| 3.2 敲除载体pXEH-asf1的构建 | 第52-54页 |
| 3.2.1 asf1基因左右侧翼序列的克隆及鉴定 | 第52-53页 |
| 3.2.2 重组敲除载体pXEH-asf1的构建 | 第53-54页 |
| 3.3 根癌农杆菌介导的S.eturmiunum遗传转化系统的建立 | 第54-55页 |
| 3.3.1 抑制S.eturmiunum野生型生长的HygB最佳浓度筛选 | 第54-55页 |
| 3.4 S.eturmiunum的遗传转化及asf1基因敲除转化子的筛选鉴定 | 第55-57页 |
| 3.4.1 敲除转化子的获得及验证 | 第55页 |
| 3.4.2 敲除转化子的PCR分析 | 第55-56页 |
| 3.4.3 敲除转化子的Southernblot分析 | 第56-57页 |
| 3.5 转化子的生物学性状分析 | 第57-63页 |
| 3.5.1 S.eturmiunum野生型菌株和敲除转化子菌落形态的观察及其生长速率的测定 | 第57-58页 |
| 3.5.2 野生型菌株和敲除转化子菌丝形态观察 | 第58-59页 |
| 3.5.3 野生型菌株和敲除转化子分生孢子及分生孢子梗形态观察 | 第59-60页 |
| 3.5.4 野生型菌株和敲除转化子有性态的诱导 | 第60-62页 |
| 3.5.5 野生型菌株和敲除转化子细胞核分布情况分析 | 第62-63页 |
| 3.6 野生型菌株和敲除转化子的无参转录组分析 | 第63-68页 |
| 3.6.1 野生型菌株和敲除转化子高质量RNA的提取 | 第63-64页 |
| 3.6.2 野生型菌株和敲除转化子转录组测序及分析 | 第64-68页 |
| 4 结论与讨论 | 第68-70页 |
| 4.1 S.eturmiunumasf1基因的克隆与鉴定 | 第68页 |
| 4.2 asf1基因对S.eturmiunum有性及无性发育的影响 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第85页 |
