| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 杆状病毒的研究概论 | 第10-14页 |
| 1.1.1 杆状病毒的分类 | 第10-12页 |
| 1.1.2 杆状病毒的形态特征 | 第12-13页 |
| 1.1.3 杆状病毒的生活周期 | 第13-14页 |
| 1.2 杆状病毒的分子生物学研究概况 | 第14-18页 |
| 1.2.1 杆状病毒的基因组特征 | 第14-15页 |
| 1.2.2 杆状病毒晚期表达因子的特征及功能 | 第15-18页 |
| 1.3 杆状病毒的应用 | 第18-19页 |
| 1.3.1 杆状病毒表达系统 | 第18页 |
| 1.3.2 杆状病毒作为生物杀虫剂 | 第18-19页 |
| 1.4 选题目的、意义及依据 | 第19-21页 |
| 1.4.1 选题目的、意义 | 第19页 |
| 1.4.2 选题依据 | 第19-21页 |
| 第二章 野生型、lef-10 缺失型以及 lef-10 补回型重组病毒的构建 | 第21-32页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.1 载体质粒、菌株与细胞 | 第21-22页 |
| 2.1.2 工具酶、试剂盒及试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 主要溶液的配方 | 第22页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第22页 |
| 2.2 方法 | 第22-27页 |
| 2.2.1 lef-10 缺失型重组 bacmid 的构建 | 第22-23页 |
| 2.2.2 重组 bacmid DNA 的大量提取及 PCR 鉴定 | 第23-25页 |
| 2.2.3 pTriEx-innateP-lef-10 质粒的构建 | 第25-27页 |
| 2.2.4 野生型、lef-10 缺失型以及 lef-10 补回型重组病毒感染 Sf9 细胞 | 第27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-30页 |
| 2.3.1 lef-10 缺失型重组 bacmid 的构建 | 第27-28页 |
| 2.3.2 lef-10 缺失型重组 bacmid 的 PCR 鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.3 pTriEx-innateP-lef-10 质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
| 2.3.4 AcMNPV lef-10 缺失对病毒复制的影响 | 第29-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 利用 Red/ET 系统结合 rpsL 反向筛选敲除 AcMNPV lef-10 基因 | 第32-46页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第32页 |
| 3.1.1 载体质粒、菌株与细胞 | 第32页 |
| 3.1.2 工具酶、试剂盒及试剂 | 第32页 |
| 3.1.3 主要溶液的配方 | 第32页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第32页 |
| 3.2 方法 | 第32-40页 |
| 3.2.1 rpsL-AMP 筛选盒的构建 | 第32-37页 |
| 3.2.2 一次重组 bacmid 的构建 | 第37-39页 |
| 3.2.3 二次重组 bacmid 的构建 | 第39-40页 |
| 3.2.4 野生型、lef-10 缺失型以及 lef-10 补回型重组病毒感染 Sf9 细胞 | 第40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-43页 |
| 3.3.1 rpsL-AMP 筛选盒的鉴定 | 第40-41页 |
| 3.3.2 一次重组 bacmid 的检测 | 第41-42页 |
| 3.3.3 二次重组 bacmid 的检测 | 第42-43页 |
| 3.3.4 AcMNPV lef-10 点突变对病毒复制的影响 | 第43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-46页 |
| 第四章 AcMNPV LEF-10 羧基末端功能区的精细鉴定 | 第46-53页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第46页 |
| 4.1.1 菌株、质粒和细胞 | 第46页 |
| 4.1.2 工具酶、试剂盒及试剂 | 第46页 |
| 4.1.3 主要溶液的配制 | 第46页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第46页 |
| 4.2 方法 | 第46-48页 |
| 4.2.1 包含不同长度片段的 lef-10 质粒的构建 | 第46-48页 |
| 4.2.2 包含不同长度片段的 lef-10 重组病毒感染 Sf9 细胞 | 第48页 |
| 4.2.3 流式细胞仪定量分析被包含不同长度片段的 lef-10 重组病毒感染的细胞中绿色荧光蛋白的表达 | 第48页 |
| 4.3 结果与分析 | 第48-51页 |
| 4.3.1 包含不同长度片段的 lef-10 质粒的鉴定 | 第48-49页 |
| 4.3.2 包含不同长度片段的 lef-10 重组病毒对感染细胞的影响 | 第49-50页 |
| 4.3.3 被包含不同长度片段的 lef-10 重组病毒感染的细胞的流式细胞分析 | 第50-51页 |
| 4.4 讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介及硕士学位期间发表和参与的论文情况 | 第61页 |
