摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩略语 | 第10-17页 |
第一部分 :甲状腺乳头状癌血清1,25(OH)2D3水平及磷酸化组织信号转导与转录激活子3与维生素D受体表达情况的研究 | 第17-28页 |
1 前言 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-21页 |
2.1 材料 | 第18-19页 |
2.1.1 主要试剂 | 第18页 |
2.1.2 主要仪器 | 第18页 |
2.1.3 研究对象 | 第18-19页 |
2.2 方法 | 第19-20页 |
2.2.1 ELISA法检测外周血血清1,25(OH)2D3浓度 | 第19页 |
2.2.2 IHC步骤 | 第19-20页 |
2.3 统计学分析 | 第20-21页 |
3 结果 | 第21-25页 |
3.1 PTC与对照组血清1,25(OH)2D3浓度比较 | 第21页 |
3.2 p-STAT3与VDR在PTC中的表达情况 | 第21-22页 |
3.3 p-STAT3在PTC与癌旁组织中的表达比较 | 第22页 |
3.4 PTC组织中p-STAT3与VDR细胞核表达相关性分析 | 第22页 |
3.5 血清1,25(OH)2D3水平与PTC临床病理资料的关系 | 第22-23页 |
3.6 p-STAT3表达与PTC临床病理资料的关系 | 第23-25页 |
4 讨论 | 第25-27页 |
5 小结 | 第27-28页 |
第二部分 :1,25(OH)2D3促进阿霉素诱导甲状腺乳头状癌细胞凋亡的实验研究 | 第28-50页 |
1 前言 | 第28-30页 |
2 材料与方法 | 第30-40页 |
2.1 材料 | 第30-34页 |
2.1.1 细胞系 | 第30页 |
2.1.2 主要药物及试剂 | 第30-31页 |
2.1.3 实验用引物序列 | 第31-32页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第32-33页 |
2.1.5 细胞培养 | 第33页 |
2.1.6 慢病毒感染PTC细胞 | 第33-34页 |
2.2 方法 | 第34-38页 |
2.2.1 CCK-8法检测PTC细胞增殖能力 | 第34页 |
2.2.2 流式细胞仪检测PTC细胞凋亡 | 第34-35页 |
2.2.3 PTC细胞总蛋白的提取 | 第35页 |
2.2.4 蛋白浓度的测定 | 第35页 |
2.2.5 配胶及加样 | 第35-36页 |
2.2.6 电泳 | 第36页 |
2.2.7 转膜 | 第36页 |
2.2.8 切胶 | 第36-37页 |
2.2.9 抗体孵育 | 第37页 |
2.2.10 ECL发光 | 第37页 |
2.2.11 PTC细胞RNA的提取 | 第37-38页 |
2.2.12 测量RNA的浓度 | 第38页 |
2.2.13 反转录 | 第38页 |
2.2.14 Real time PCR | 第38页 |
2.3 统计学分析 | 第38-40页 |
3 结果 | 第40-47页 |
3.1 ADM对PTC细胞的抑制作用存在浓度依赖性 | 第40页 |
3.2 1 ,25(OH)2D3明显增加ADM对PTC细胞的抑制作用 | 第40-41页 |
3.3 1 ,25(OH)2D3明显增加ADM对PTC细胞的凋亡作用 | 第41页 |
3.4 1 ,25(OH)2D3明显增加ADM诱导PTC细胞cleaved caspase-3的表达 | 第41-42页 |
3.5 1 ,25(OH)2D3及ADM对PTC细胞p-STAT3表达的影响 | 第42页 |
3.6 ADM对PTC细胞内凋亡抑制蛋白表达情况 | 第42-43页 |
3.7 慢病毒过表达p-STAT3后PTC细胞活力及凋亡情况 | 第43-47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
5 小结 | 第49-50页 |
第三部分 :1,25(OH)2D3诱导甲状腺乳头状癌细胞非受体型酪氨酸磷酸酶2表达的机制研究 | 第50-67页 |
1 前言 | 第50-51页 |
2 材料与方法 | 第51-61页 |
2.1 材料 | 第51-55页 |
2.1.1 细胞系 | 第51页 |
2.1.2 主要药物及试剂 | 第51-52页 |
2.1.3 实验用引物序列 | 第52-53页 |
2.1.4 实验用到的小干扰RNA序列 | 第53页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第53-55页 |
2.1.6 细胞培养 | 第55页 |
2.2 方法 | 第55-59页 |
2.2.1 PTC细胞总蛋白的提取 | 第55-56页 |
2.2.2 PTC细胞核蛋白及浆蛋白的提取 | 第56页 |
2.2.3 蛋白浓度的测定 | 第56页 |
2.2.4 配胶及加样 | 第56-57页 |
2.2.5 电泳 | 第57页 |
2.2.6 转膜 | 第57-58页 |
2.2.8 抗体孵育 | 第58页 |
2.2.9 ECL发光 | 第58页 |
2.2.10 PTC细胞RNA的提取 | 第58-59页 |
2.2.11 测量RNA的浓度 | 第59页 |
2.2.13 反转录 | 第59页 |
2.2.14 Real time PCR | 第59页 |
2.3 统计学分析 | 第59-61页 |
3 结果 | 第61-65页 |
3.1 1 ,25(OH)2D3对PTC细胞内p-STAT3负性调节因子表达的情况 | 第61页 |
3.2 siRNA干扰PTPN2后1,25(OH)2D3对PTC细胞p-STAT3表达的影响 | 第61-62页 |
3.3 siRNA干扰PTPN2后PTC细胞内p-STAT3表达变化情况 | 第62-63页 |
3.4 1 ,25(OH)2D3促进VDR细胞核内表达增加 | 第63页 |
3.5 siRNA干扰VDR后VDR的表达情况 | 第63-64页 |
3.6 siRNA干扰VDR后1,25(OH)2D3对PTC细胞PTPN2、p-STAT3的表达 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-66页 |
5 小结 | 第66-67页 |
结论 | 第67-68页 |
本研究创新性的自我评价 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
文献综述 | 第76-87页 |
参考文献 | 第81-87页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
个人简历 | 第89页 |