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氧化葡萄糖酸杆菌中两个NADPH依赖的氧化还原酶基因的克隆表达及其酶学性质分析

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
第一章 文献综述第9-24页
   ·氧化葡萄糖酸杆菌的特性第9-10页
   ·氧化葡萄糖酸杆菌的应用第10-16页
     ·羟基丙酮和甘油酸生产第11-13页
     ·D-塔格糖的生产第13页
     ·莽草素的生产第13页
     ·1-脱氧野尻霉素和米格列醇的合成第13-14页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌的其它应用第14-16页
   ·氧化葡萄糖酸杆菌的酶学和分子生物学研究第16-21页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌基因组一般特征第16-17页
     ·基因组学水平分析G.oxydans中间代谢第17-18页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌酶学研究第18-21页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌酶基因克隆常用手段第21页
   ·醛酮还原酶家族概述第21-23页
   ·本课题的研究意义与内容第23-24页
第二章 材料与方法第24-33页
   ·实验材料第24-25页
     ·菌株及质粒第24页
     ·内切酶、DNA分子标准、蛋白质分子标准及试剂盒第24页
     ·主要试剂第24页
     ·培养基配方第24-25页
     ·主要仪器及设备第25页
     ·应用软件及程序第25页
   ·实验方法第25-33页
     ·生物信息学分析第25页
     ·基因克隆第25-29页
     ·重组蛋白表达及纯化第29-30页
     ·重组蛋白浓度的测定第30页
     ·酶学性质分析第30-33页
第三章 结果与讨论第33-55页
   ·生物信息学分析第33-39页
     ·序列基本信息第33-34页
     ·基因序列同源性比对(BLAST)第34-39页
   ·基因的克隆第39-42页
     ·氧化葡萄糖酸杆菌M5基因组DNA的提取第39页
     ·PCR扩增产物的电泳鉴定第39-40页
     ·重组质粒的构建与酶切鉴定第40-41页
     ·Gox0644和gox1615全基因序列及蛋白序列第41-42页
   ·GOX0644和GOX1615重组蛋白在大肠杆菌表达与纯化第42-45页
   ·重组蛋白浓度测定第45-46页
   ·酶学性质分析第46-55页
     ·底物谱研究第46-48页
     ·最适pH和最适温度的测定第48-50页
     ·酶动力学研究第50-51页
     ·酶热稳定性和酸碱稳定性第51-53页
     ·金属离子对GOX0644活性的影响第53-55页
第四章 结论与展望第55-56页
   ·结论第55页
   ·展望第55-56页
参考文献第56-64页
致谢第64-65页

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