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海洋桔青霉W1抗真菌蛋白的分离纯化与特性研究

Content第7-11页
摘要第11-13页
Abstract第13-15页
第一章 前言第16-30页
    1.1 真菌的危害第16页
    1.2 微生物农药第16-17页
    1.3 海洋活性微生物资源第17-19页
        1.3.1 海洋微生物的多样性第18页
        1.3.2 海洋微生物是新型活性物质的重要来源第18-19页
    1.4 微生物来源的抗菌蛋白第19-25页
        1.4.1 微生物来源抗菌蛋白的分类第19-24页
        1.4.2 真菌来源抗菌蛋白的作用机制第24-25页
    1.5 抗菌蛋白在农业防治中的应用第25-28页
        1.5.1 利用抗菌蛋白控制植物疾病第25-26页
        1.5.2 抗菌蛋白的合成第26-27页
        1.5.3 利用转基因植物表达抗菌蛋白第27-28页
    1.6 本课题的研究意义和目的第28-30页
第二章 材料与方法第30-50页
    2.1 实验材料第30-39页
        2.1.1 样品来源第30页
        2.1.2 受试菌第30-31页
        2.1.3 培养基第31-34页
        2.1.4 寡核苷酸引物第34-35页
        2.1.5 主要试剂及材料第35页
        2.1.6 主要溶液第35-38页
        2.1.7 主要仪器设备第38-39页
    2.2 实验方法第39-50页
        2.2.1 菌株的初筛及保藏第39页
        2.2.2 拮抗活性菌株的复筛第39-40页
        2.2.3 拮抗活性菌株的分子生物学鉴定第40-44页
        2.2.4 粗蛋白的分离第44-45页
        2.2.5 色谱分析法分离抗真菌蛋白第45-46页
        2.2.6 硝酸银染色第46页
        2.2.7 质谱分析第46页
        2.2.8 N端测序第46-47页
        2.2.9 抗真菌蛋白MIC(最低抑制浓度)测定第47页
        2.2.10 抗真菌蛋白的理化性质分析第47-49页
        2.2.11 添加营养源对发酵上清活性的影响第49页
        2.2.12 抗菌物质应用于农作物病害防治第49-50页
第三章 结果与分析第50-91页
    3.1 抗菌活性菌株的分离筛选及初步鉴定第50-69页
        3.1.1 活性菌株筛选第50-57页
        3.1.2 活性菌株的鉴定与统计第57-69页
    3.2 海洋桔青霉W1抗真菌蛋白的分离纯化第69-78页
        3.2.1 海洋真菌W1的鉴定第69-70页
        3.2.2 海洋桔青霉W1发酵上清的抑菌活性第70-71页
        3.2.3 饱和硫酸铵沉淀及抗菌物质的初步鉴定第71-72页
        3.2.4 DEAE离子交换层析及活性检测第72-73页
        3.2.5 CM离子交换层析及活性检测第73-74页
        3.2.6 SDS-PAGE和硝酸银染色第74-75页
        3.2.7 抗真菌蛋白的质谱分析第75-77页
        3.2.8 抗真菌蛋白的N端测序分析第77-78页
    3.3 海洋桔青霉W1抗真菌蛋白的理化性质分析第78-89页
        3.3.1 抗真菌蛋白的MIC(最低抑制浓度)测定第78-81页
        3.3.2 紫外辐射对抗真菌蛋白活性的影响第81页
        3.3.3 温度对抗真菌蛋白活性的影响第81-83页
        3.3.4 加热时间对抗真菌蛋白活性的影响第83-84页
        3.3.5 金属离子对抗真菌蛋白活性的影响第84-85页
        3.3.6 有机溶剂对抗真菌蛋白活性的影响第85-86页
        3.3.7 pH对抗真菌蛋白活性的影响第86-87页
        3.3.8 表面活性剂对抗真菌蛋白活性的影响第87-88页
        3.3.9 蛋白酶对抗真菌蛋白活性的影响第88-89页
    3.4 添加营养源对发酵上清活性的影响第89-90页
    3.5 海洋桔青霉W1在作物病害防治上的应用第90-91页
第四章 小结与讨论第91-95页
    4.1 小结第91-92页
    4.2 讨论第92-95页
展望第95-96页
参考文献第96-102页
附录1 第21次大洋科考采集的印度洋样品站位信息表第102-105页
附录2 第22次大洋科考采集的南大西洋样品站位信息表第105-107页
附录3 第26次大洋科考采集的南大西洋样品站位信息表第107-109页
附录4 第5次北极科考采集的沉积物样品站位信息表第109-112页
附录5 第28次南极科考采集的水样站位信息表第112-115页
附录6 第29次南极科考采集的样品站位信息表第115-122页
硕士期间发表的研究成果第122-123页
致谢第123页

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