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锌与双酚A胁迫下福建牡蛎性腺差异表达蛋白的研究

摘要第9-11页
Abstract第11-14页
1 前言第15-26页
    1.1 锌污染研究概况第15-18页
        1.1.1 锌污染概述第15-16页
        1.1.2 贝类富集锌机制的研究进展第16-17页
        1.1.3 牡蛎应对Zn~(2+)毒性的抵抗机制研究进展第17-18页
    1.2 双酚A污染研究概况第18-21页
        1.2.1 双酚A污染概况第19-20页
        1.2.2 双酚A生殖毒性及其机制研究进展第20-21页
    1.3 福建牡蛎的生物学特性第21-22页
    1.4 毒理蛋白质组学研究进展第22-24页
        1.4.1 毒理蛋白质组学第22页
        1.4.2 非标定量蛋白质组学第22-23页
        1.4.3 蛋白质组学技术在环境重金属污染和环境类激素污染的研究应用第23-24页
    1.5 本论文主要研究内容和意义第24-26页
2 Zn~(2+)胁迫下牡蛎性腺差异表达蛋白的研究第26-72页
    2.1 材料与方法第26-41页
        2.1.1 仪器与试剂第26-27页
        2.1.2 Zn~(2+)胁迫的处理方法第27-28页
        2.1.3 SOD酶与CAT酶活力测定第28-30页
        2.1.4 组织切片制作第30-31页
        2.1.5 Zn富集量的ICP-MS测定第31-32页
        2.1.6 非标定量蛋白质组技术研究Zn~(2+)胁迫下牡蛎性腺差异表达蛋白第32-41页
            2.1.6.1 蛋白样品的制备第32-33页
            2.1.6.2 SDS-PAGE与IPG双向电泳检测蛋白提取效果第33-36页
            2.1.6.3 液质联用技术进行差异表达蛋白质组学分析第36-38页
            2.1.6.4 差异表达蛋白的Real-Time PCR验证第38-41页
    2.2 Zn~(2+)对牡蛎的慢性毒性效应的分析第41-45页
        2.2.1 Zn~(2+)对牡蛎半致死剂量(LC50)第41页
        2.2.2 Zn在牡蛎性腺中富集量第41-43页
        2.2.3 Zn~(2+)胁迫下性腺的形态学观察第43-44页
        2.2.4 Zn~(2+)胁迫对性腺内SOD与CAT酶活的影响第44-45页
    2.3 Zn~(2+)胁迫下牡蛎性腺差异表达蛋白的分析第45-69页
        2.3.1 全蛋白提取效率的检验第45-47页
        2.3.2 LC-MS/MS结果质量评价第47-49页
        2.3.3 差异表达蛋白的比对第49-50页
        2.3.4 Real-time PCR验证部分差异表达蛋白第50-52页
        2.3.5 差异表达蛋白功能关联网络图的构建第52-53页
        2.3.6 蛋白功能关联网络的分析第53-61页
        2.3.7 牡蛎富锌机制的初步探讨第61-64页
        2.3.8 Zn~(2+)胁迫给雄性造成较雌性更严重的损伤第64-65页
        2.3.9 筛选指示锌污染的生物标志蛋白第65-69页
    2.4 本章小结第69-72页
3 双酚A胁迫下牡蛎性腺差异表达蛋白的研究第72-107页
    3.1 材料与方法第72-76页
        3.1.1 仪器与试剂第72页
        3.1.2 双酚A胁迫的处理方法第72-73页
        3.1.3 性腺指数的测定第73页
        3.1.4 SOD酶与CAT酶活的测定第73页
        3.1.5 组织切片的制作第73页
        3.1.6 双酚A富集量的气质联用测定第73-75页
        3.1.7 非标定量蛋白质组技术研究双酚A胁迫下牡蛎性腺差异表达蛋白第75-76页
            3.1.7.1 蛋白样品的制备第75页
            3.1.7.2 液质联用技术进行差异表达蛋白质组学分析第75页
            3.1.7.3 差异表达蛋白的Real-Time PCR验证第75-76页
    3.2 双酚A对牡蛎的慢性毒性效应的分析第76-84页
        3.2.1 双酚A对牡蛎半致死剂量(LC50)第76页
        3.2.2 双酚A胁迫下性别比例与性腺指数变化第76-78页
        3.2.3 双酚A在牡蛎性腺中富集量的测定第78-81页
        3.2.4 双酚A胁迫下牡蛎性腺的形态学观察第81-83页
        3.2.5 双酚A对牡蛎性腺SOD和CAT酶活的影响第83-84页
    3.3 双酚A胁迫下牡蛎性腺差异表达蛋白的分析第84-105页
        3.3.1 LC-MS/MS结果质量评价第84-86页
        3.3.2 差异表达蛋白的比对第86-87页
        3.3.3 Real-time PCR验证部分差异表达蛋白结果第87-88页
        3.3.4 差异表达蛋白功能关联网络的构建第88页
        3.3.5 蛋白功能关联网络的分析第88-97页
        3.3.6 筛选双酚A的生物标志蛋白第97-105页
    3.4 本章小结第105-107页
4 总结第107-109页
参考文献第109-121页
缩略语表第121-123页
附录第123-131页
在学期间发表论文与获奖情况第131-132页
致谢第132页

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