摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
1 前言 | 第15-26页 |
1.1 锌污染研究概况 | 第15-18页 |
1.1.1 锌污染概述 | 第15-16页 |
1.1.2 贝类富集锌机制的研究进展 | 第16-17页 |
1.1.3 牡蛎应对Zn~(2+)毒性的抵抗机制研究进展 | 第17-18页 |
1.2 双酚A污染研究概况 | 第18-21页 |
1.2.1 双酚A污染概况 | 第19-20页 |
1.2.2 双酚A生殖毒性及其机制研究进展 | 第20-21页 |
1.3 福建牡蛎的生物学特性 | 第21-22页 |
1.4 毒理蛋白质组学研究进展 | 第22-24页 |
1.4.1 毒理蛋白质组学 | 第22页 |
1.4.2 非标定量蛋白质组学 | 第22-23页 |
1.4.3 蛋白质组学技术在环境重金属污染和环境类激素污染的研究应用 | 第23-24页 |
1.5 本论文主要研究内容和意义 | 第24-26页 |
2 Zn~(2+)胁迫下牡蛎性腺差异表达蛋白的研究 | 第26-72页 |
2.1 材料与方法 | 第26-41页 |
2.1.1 仪器与试剂 | 第26-27页 |
2.1.2 Zn~(2+)胁迫的处理方法 | 第27-28页 |
2.1.3 SOD酶与CAT酶活力测定 | 第28-30页 |
2.1.4 组织切片制作 | 第30-31页 |
2.1.5 Zn富集量的ICP-MS测定 | 第31-32页 |
2.1.6 非标定量蛋白质组技术研究Zn~(2+)胁迫下牡蛎性腺差异表达蛋白 | 第32-41页 |
2.1.6.1 蛋白样品的制备 | 第32-33页 |
2.1.6.2 SDS-PAGE与IPG双向电泳检测蛋白提取效果 | 第33-36页 |
2.1.6.3 液质联用技术进行差异表达蛋白质组学分析 | 第36-38页 |
2.1.6.4 差异表达蛋白的Real-Time PCR验证 | 第38-41页 |
2.2 Zn~(2+)对牡蛎的慢性毒性效应的分析 | 第41-45页 |
2.2.1 Zn~(2+)对牡蛎半致死剂量(LC50) | 第41页 |
2.2.2 Zn在牡蛎性腺中富集量 | 第41-43页 |
2.2.3 Zn~(2+)胁迫下性腺的形态学观察 | 第43-44页 |
2.2.4 Zn~(2+)胁迫对性腺内SOD与CAT酶活的影响 | 第44-45页 |
2.3 Zn~(2+)胁迫下牡蛎性腺差异表达蛋白的分析 | 第45-69页 |
2.3.1 全蛋白提取效率的检验 | 第45-47页 |
2.3.2 LC-MS/MS结果质量评价 | 第47-49页 |
2.3.3 差异表达蛋白的比对 | 第49-50页 |
2.3.4 Real-time PCR验证部分差异表达蛋白 | 第50-52页 |
2.3.5 差异表达蛋白功能关联网络图的构建 | 第52-53页 |
2.3.6 蛋白功能关联网络的分析 | 第53-61页 |
2.3.7 牡蛎富锌机制的初步探讨 | 第61-64页 |
2.3.8 Zn~(2+)胁迫给雄性造成较雌性更严重的损伤 | 第64-65页 |
2.3.9 筛选指示锌污染的生物标志蛋白 | 第65-69页 |
2.4 本章小结 | 第69-72页 |
3 双酚A胁迫下牡蛎性腺差异表达蛋白的研究 | 第72-107页 |
3.1 材料与方法 | 第72-76页 |
3.1.1 仪器与试剂 | 第72页 |
3.1.2 双酚A胁迫的处理方法 | 第72-73页 |
3.1.3 性腺指数的测定 | 第73页 |
3.1.4 SOD酶与CAT酶活的测定 | 第73页 |
3.1.5 组织切片的制作 | 第73页 |
3.1.6 双酚A富集量的气质联用测定 | 第73-75页 |
3.1.7 非标定量蛋白质组技术研究双酚A胁迫下牡蛎性腺差异表达蛋白 | 第75-76页 |
3.1.7.1 蛋白样品的制备 | 第75页 |
3.1.7.2 液质联用技术进行差异表达蛋白质组学分析 | 第75页 |
3.1.7.3 差异表达蛋白的Real-Time PCR验证 | 第75-76页 |
3.2 双酚A对牡蛎的慢性毒性效应的分析 | 第76-84页 |
3.2.1 双酚A对牡蛎半致死剂量(LC50) | 第76页 |
3.2.2 双酚A胁迫下性别比例与性腺指数变化 | 第76-78页 |
3.2.3 双酚A在牡蛎性腺中富集量的测定 | 第78-81页 |
3.2.4 双酚A胁迫下牡蛎性腺的形态学观察 | 第81-83页 |
3.2.5 双酚A对牡蛎性腺SOD和CAT酶活的影响 | 第83-84页 |
3.3 双酚A胁迫下牡蛎性腺差异表达蛋白的分析 | 第84-105页 |
3.3.1 LC-MS/MS结果质量评价 | 第84-86页 |
3.3.2 差异表达蛋白的比对 | 第86-87页 |
3.3.3 Real-time PCR验证部分差异表达蛋白结果 | 第87-88页 |
3.3.4 差异表达蛋白功能关联网络的构建 | 第88页 |
3.3.5 蛋白功能关联网络的分析 | 第88-97页 |
3.3.6 筛选双酚A的生物标志蛋白 | 第97-105页 |
3.4 本章小结 | 第105-107页 |
4 总结 | 第107-109页 |
参考文献 | 第109-121页 |
缩略语表 | 第121-123页 |
附录 | 第123-131页 |
在学期间发表论文与获奖情况 | 第131-132页 |
致谢 | 第132页 |