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酵母表面展示EtMic1蛋白不同结构域及其作为抗球虫活载体疫苗的研究

符号说明第4-10页
中文摘要第10-12页
Abstract第12-13页
1 前言第14-29页
    1.1 鸡球虫入侵机理研究第14-16页
    1.2 鸡球虫免疫原性研究进展第16-17页
        1.2.1 不同种类的球虫免疫原性不同第16页
        1.2.2 球虫各发育阶段的免疫原性不同第16-17页
    1.3 抗鸡球虫感染免疫保护机理研究第17-21页
        1.3.1 T 淋巴细胞在鸡球虫保护性免疫中的作用第17-18页
        1.3.2 细胞因子在鸡球虫保护性免疫中的作用第18-20页
        1.3.3 抗体在鸡球虫免疫中的作用第20-21页
    1.4 鸡球虫疫苗研究进展第21-25页
        1.4.1 鸡球虫活苗的研究第21-22页
        1.4.2 鸡球虫重组苗的研究第22-23页
        1.4.3 活载体疫苗的研究第23-25页
    1.5 鸡柔嫩艾美耳球虫微线蛋白的研究第25-28页
        1.5.1 微线蛋白第25页
        1.5.2 TRAP 家族结构与功能第25-26页
        1.5.3 鸡柔嫩艾美耳球虫微线蛋白 1(EtMIC1)第26-27页
        1.5.4 其它微线蛋白第27-28页
    1.6 本研究目的和意义第28-29页
2 材料与方法第29-42页
    2.1 材料第29-30页
        2.1.1 虫种、菌株和实验动物第29页
        2.1.2 主要试剂第29页
        2.1.3 相关试剂与培养基配制第29页
        2.1.4 主要仪器第29-30页
    2.2 方法第30-42页
        2.2.1 柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子总 RNA 的提取及 cDNA 的合成第30-31页
        2.2.2 EtMIC1 基因的扩增、克隆与测序第31-33页
        2.2.3 真核表达载体的构建第33-35页
        2.2.4 酵母细胞的转化及筛选第35-38页
        2.2.5 免疫与攻虫第38页
        2.2.6 免疫保护力评价第38-39页
        2.2.7 抗体水平检测第39-40页
        2.2.8 体外诱导细胞因子及其表达水平检测第40页
        2.2.9 T 淋巴细胞转化第40-41页
        2.2.10 CD4~+、CD8~+T 淋巴细胞亚群检测第41页
        2.2.11 统计分析第41-42页
3 结果第42-56页
    3.1 EtMIC1 基因克隆及序列分析第42-43页
    3.2 重组展示载体的构建及酶切鉴定第43-45页
    3.3 酵母表面展示 EtMic1 蛋白片段的鉴定第45-49页
        3.3.1 IFA 鉴定 EtMic1 蛋白片段在酵母细胞表面的展示第45-47页
        3.3.2 流式细胞仪检测 EtMic1 蛋白片段在酵母细胞表面的展示第47-48页
        3.3.3 Western-blot 检测 EtMic1 蛋白片段在酵母细胞表面的展示第48-49页
    3.4 抗柔嫩艾美耳球虫免疫保护效果第49-52页
        3.4.1 体重增长第49-50页
        3.4.2 卵囊排出量及卵囊减少率第50页
        3.4.3 盲肠病变计分第50-51页
        3.4.4 抗球虫指数(ACI)第51-52页
    3.5 血清中特异性抗体水平第52-53页
    3.6 脾淋巴细胞亚群检测及脾淋巴细胞转化第53-54页
    3.7 细胞因子水平的检测第54-56页
4 讨论第56-60页
5 结论第60-61页
参考文献第61-69页
致谢第69-70页
发表论文情况第70-71页
附录第71-73页

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