| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-24页 |
| 1.1 L-叔亮氨酸 | 第10-11页 |
| 1.1.1 L-叔亮氨酸的性质 | 第10-11页 |
| 1.1.2 L-叔亮氨酸的应用 | 第11页 |
| 1.2 化学法合成光学纯叔亮氨酸 | 第11-12页 |
| 1.2.1 拆分法 | 第11-12页 |
| 1.2.2 化学合成法 | 第12页 |
| 1.3 酶法合成光学纯叔亮氨酸 | 第12-18页 |
| 1.3.1 青霉素G酰化酶 | 第13-15页 |
| 1.3.2 支链转氨酶 | 第15-16页 |
| 1.3.3 亮氨酸脱氢酶 | 第16-18页 |
| 1.4 辅酶NADH的再生 | 第18-22页 |
| 1.4.1 酶法再生辅酶NADH | 第19-20页 |
| 1.4.2 化学法再生NADH | 第20-21页 |
| 1.4.3 电化学法再生NADH | 第21页 |
| 1.4.4 光化学法再生NADH | 第21-22页 |
| 1.5 研究工作的提出 | 第22-24页 |
| 1.5.1 立项依据 | 第22-23页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第23-24页 |
| 第2章 亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的筛选、表达纯化和活性测定 | 第24-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-29页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第24页 |
| 2.1.2 基因及引物 | 第24-25页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.5 培养基 | 第27-28页 |
| 2.1.6 主要试剂的配制 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-36页 |
| 2.2.1 重组表达载体的构建 | 第29-32页 |
| 2.2.2 重组表达载体转化感受态细胞 | 第32-33页 |
| 2.2.3 重组亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的诱导表达 | 第33页 |
| 2.2.4 亮氨酸脱氢酶/甲酸脱氢酶的纯化 | 第33-35页 |
| 2.2.5 蛋白浓度和酶活的测定 | 第35-36页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第36-40页 |
| 2.3.1 重组蛋白质的纯化 | 第36-38页 |
| 2.3.2 蛋白浓度的测定 | 第38-40页 |
| 2.3.3 酶活性的测定 | 第40页 |
| 2.4 本章小结 | 第40-42页 |
| 第3章 甲酸脱氢酶和亮氨酸脱氢酶偶联体系应用于L-叔亮氨酸的生成 | 第42-56页 |
| 3.1 实验材料 | 第42-44页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第42-43页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第43页 |
| 3.1.3 主要试剂的配制 | 第43-44页 |
| 3.2 实验方法 | 第44-46页 |
| 3.2.1 AmLeuDH酶学性质的探究 | 第44-45页 |
| 3.2.2 Op-FDH酶学性质的探究 | 第45-46页 |
| 3.3 双酶偶联系统的构建及优化 | 第46-47页 |
| 3.3.1 不同的底物浓度对L-叔亮氨酸产量的影响 | 第46页 |
| 3.3.2 不同的辅因子量对L-叔亮氨酸产量的影响 | 第46页 |
| 3.3.3 不同的酶活比例对L-叔亮氨酸产量的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.4 产物的检测 | 第47页 |
| 3.4 L-叔亮氨酸的扩大生产 | 第47页 |
| 3.5 结果与讨论 | 第47-54页 |
| 3.5.1 AmLeuDH/Op-FDH酶学性质的探究 | 第47-51页 |
| 3.5.2 L-叔亮氨酸标准曲线的绘制 | 第51页 |
| 3.5.3 不同底物浓度比对L-叔亮氨酸产量的影响 | 第51页 |
| 3.5.4 不同的NAD+浓度对L-叔亮氨酸产量的影响 | 第51-53页 |
| 3.5.5 不同的酶活比对L-叔亮氨酸生成量的影响 | 第53页 |
| 3.5.6 L-叔亮氨酸的扩大生产 | 第53-54页 |
| 3.6 本章小结 | 第54-56页 |
| 第4章 光再生NADH应用于L-叔亮氨酸的合成的探究 | 第56-68页 |
| 4.1 实验材料 | 第56-57页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第56-57页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-60页 |
| 4.2.1 光催化剂制备 | 第57-58页 |
| 4.2.2 光再生NADH效率的研究 | 第58-59页 |
| 4.2.3 光再生NADH应用于L-叔亮氨酸的合成的条件探究 | 第59-60页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第60-65页 |
| 4.3.1 光再生NADH效率的研究 | 第60-62页 |
| 4.3.2 光再生NADH应用于L-叔亮氨酸的合成 | 第62-65页 |
| 4.4 本章小结 | 第65-68页 |
| 第5章 结论和展望 | 第68-70页 |
| 5.1 结论 | 第68-69页 |
| 5.2 展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第78-80页 |
| 附录 | 第80-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
