| 中文摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 缩写说明 | 第17-20页 |
| 第一章 前言 | 第20-57页 |
| 1.1 细胞增殖 | 第20-24页 |
| 1.1.1 细胞周期 | 第20-22页 |
| 1.1.2 有丝分裂 | 第22-23页 |
| 1.1.3 有丝分裂障碍与疾病 | 第23-24页 |
| 1.2 微管 | 第24-33页 |
| 1.2.1 微管概述 | 第24-27页 |
| 1.2.2 微管的组装与去组装 | 第27-29页 |
| 1.2.3 纺锤体概述 | 第29-33页 |
| 1.3 有丝分裂检查点 | 第33-38页 |
| 1.3.1 有丝分裂检查点的概述 | 第33-35页 |
| 1.3.2 SAC的激活 | 第35-37页 |
| 1.3.3 SAC的失活 | 第37-38页 |
| 1.4 微管靶向剂 | 第38-47页 |
| 1.4.1 微管蛋白组装抑制剂 | 第38-41页 |
| 1.4.2 微管稳定剂 | 第41-43页 |
| 1.4.3 微管靶向剂在临床的应用及困惑 | 第43-46页 |
| 1.4.4 微管蛋白靶向剂在生物学研究中的应用 | 第46-47页 |
| 1.5 总结 | 第47页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| 第二章 材料与方法 | 第57-79页 |
| 2.1 实验材料 | 第57-61页 |
| 2.1.1 细胞学实验材料 | 第57-58页 |
| 2.1.2 分子生物学及蛋白质学实验材料 | 第58-59页 |
| 2.1.3 抗体 | 第59-60页 |
| 2.1.4 实验仪器与耗材 | 第60-61页 |
| 2.2 培养基及试剂配制 | 第61-64页 |
| 2.2.1 细胞学实验试剂的配制 | 第61-62页 |
| 2.2.2 蛋白操作实验试剂的配制 | 第62-63页 |
| 2.2.3 分子生物学实验试剂的配制 | 第63-64页 |
| 2.3 实验方法 | 第64-77页 |
| 2.3.1 细胞培养及其同步化 | 第64-65页 |
| 2.3.2 细胞转染 | 第65-66页 |
| 2.3.3 细胞增殖检测 | 第66-67页 |
| 2.3.4 细胞实时成像分析 | 第67页 |
| 2.3.5 细胞周期分析 | 第67-68页 |
| 2.3.6 Chromosome spread分析 | 第68页 |
| 2.3.7 细胞免疫荧光 | 第68页 |
| 2.3.8 蛋白提取及其免疫沉淀 | 第68-69页 |
| 2.3.9 电泳 | 第69-70页 |
| 2.3.10 质粒的提取及转化 | 第70页 |
| 2.3.11 质粒构建 | 第70-72页 |
| 2.3.12 CENPA蛋白的异源表达及体外磷酸化 | 第72-73页 |
| 2.3.13 微管蛋白动力学分析实验 | 第73-74页 |
| 2.3.14 细胞内微管动力学分析实验 | 第74-75页 |
| 2.3.15 组蛋白磷酸化组学 | 第75-77页 |
| 2.3.16 统计分析 | 第77页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 第三章 CS1抑制HeLa细胞增殖的机制研究 | 第79-112页 |
| 3.1 CS1抑制HeLa细胞有丝分裂的进行 | 第79-85页 |
| 3.1.1 CS1诱导HeLa细胞发生G2/M期阻滞 | 第79-80页 |
| 3.1.2 CS1抑制HeLa细胞M期的进行 | 第80-82页 |
| 3.1.3 CS1诱导细胞发生细胞凋亡 | 第82-83页 |
| 3.1.4 CS1诱导caspases依赖的细胞调亡 | 第83-85页 |
| 3.2 CS1抑制染色体臂的分离 | 第85-90页 |
| 3.2.1 CS1抑制细胞中期板的形成 | 第85-87页 |
| 3.2.2 CS1抑制染色体臂的分离 | 第87-89页 |
| 3.2.3 CS1抑制不依赖于cohesin解离的染色体臂分离 | 第89-90页 |
| 3.3 CS1激活SAC | 第90-96页 |
| 3.3.1 CS1激活SAC相关蛋白 | 第90-91页 |
| 3.3.2 CS1激活SAC | 第91-92页 |
| 3.3.3 CS1引起SAC依赖的有丝分裂阻滞 | 第92-94页 |
| 3.3.4 CS1激活SAC不依赖于Topo Ⅱα | 第94-96页 |
| 3.4 CS1抑制微管的聚合 | 第96-99页 |
| 3.4.1 CS1破坏纺锤体的形成 | 第96-97页 |
| 3.4.2 CS1抑制细胞内微管的生长 | 第97-98页 |
| 3.4.3 CS1减少细胞内聚合的微管蛋白 | 第98-99页 |
| 3.5 CS1是微管蛋白抑制剂 | 第99-101页 |
| 3.5.1 CS1抑制tubulin的体外聚合 | 第99-100页 |
| 3.5.2 CS1结合于tubulin的秋水仙碱结合口袋 | 第100-101页 |
| 3.6 CS1诱导组蛋白发生独特的磷酸化修饰 | 第101-107页 |
| 3.6.1 CS1对HeLa细胞组蛋白磷酸化的影响 | 第102-103页 |
| 3.6.2 定量分析CS1对组蛋白磷酸化的影响 | 第103-105页 |
| 3.6.3 CENPA磷酸化的探索 | 第105-107页 |
| 3.7 总结与讨论 | 第107-110页 |
| 参考文献 | 第110-112页 |
| 第四章 PMN抑制结肠癌细胞增殖的作用机制研究 | 第112-127页 |
| 4.1 PMN呈现潜在的抗结肠癌活性 | 第112-114页 |
| 4.1.1 PMN抑制结肠癌细胞增殖 | 第112-113页 |
| 4.1.2 PMN抑制结肠癌细胞的克隆形成 | 第113-114页 |
| 4.2 PMN诱导结肠癌细胞发生M期阻滞和细胞凋亡 | 第114-118页 |
| 4.2.1 PMN诱导结肠癌细胞发生G_2/M阻滞 | 第114-115页 |
| 4.2.2 PMN阻断细胞有丝分裂的进行 | 第115-116页 |
| 4.2.3 PMN对有丝分裂和细胞凋亡蛋白的影响 | 第116-118页 |
| 4.3 PMN诱导细胞调亡依赖于M期停滞 | 第118-120页 |
| 4.3.1 敲低MAD2降低结肠癌细胞对PMN的敏感性 | 第118-119页 |
| 4.3.2 敲低MAD2减弱PMN上调细胞凋亡蛋白 | 第119-120页 |
| 4.4 PMN抑制微管的组装 | 第120-121页 |
| 4.4.1 PMN破坏纺锤体的形成 | 第120-121页 |
| 4.4.2 PMN抑制微管蛋白的体外聚合 | 第121页 |
| 4.5 p53介导PMN诱导的细胞凋亡 | 第121-123页 |
| 4.5.1 敲低p53减低结肠癌细胞对PMN的敏感性 | 第121-122页 |
| 4.5.2 敲低p53抑制PMN诱导的细胞凋亡 | 第122-123页 |
| 4.6 结果与讨论 | 第123-125页 |
| 参考文献 | 第125-127页 |
| 第五章 总结与展望 | 第127-130页 |
| 致谢 | 第130-132页 |
| 攻读博士期间发表的学术论文 | 第132-134页 |
| 附件 | 第134-155页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第155页 |
