中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 前言 | 第13-21页 |
1.1 研究问题的由来 | 第13-14页 |
1.2 miRNA的研究进展 | 第14-15页 |
1.3 猪IMF的研究进展 | 第15-18页 |
1.3.1 IMF的生物学特征 | 第15页 |
1.3.2 猪IMF研究现状 | 第15-16页 |
1.3.3 影响猪IA沉积的基因 | 第16-18页 |
1.4 ACSL4基因的研究进展 | 第18-19页 |
1.5 本试验研究的目的意义 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-44页 |
2.1 试验材料 | 第21-24页 |
2.1.1 试验动物及样品采集 | 第21页 |
2.1.2 主要数据库 | 第21页 |
2.1.3 主要试剂 | 第21-22页 |
2.1.4 主要仪器 | 第22-23页 |
2.1.5 常用试剂的配制方法 | 第23-24页 |
2.2 试验方法 | 第24-44页 |
2.2.1 差异表达miRNAs的定量验证 | 第24-27页 |
2.2.2 miR-34a与候选靶基因ACSL4基因靶向关系的验证 | 第27-38页 |
2.2.3 miR-34a在IA增殖分化过程中的作用研究 | 第38-43页 |
2.2.4 数据处理与分析 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-58页 |
3.1 差异表达miRNA的验证 | 第44-45页 |
3.1.1 肝脏组织总RNA提取结果 | 第44-45页 |
3.1.2 miRNAsRT-qPCR结果 | 第45页 |
3.2 miR-34a靶基因的预测 | 第45-46页 |
3.3 ACSL4基因重组野生型载体和突变型载体的构建 | 第46-48页 |
3.4 miR-34a与其预测靶基因ACSL4基因靶向关系验证结果 | 第48-50页 |
3.5 探究miR-34a对IA的影响试验结果 | 第50-54页 |
3.5.1 IA形态学观察 | 第50页 |
3.5.2 IA转染最佳时间的确定 | 第50页 |
3.5.3 油红O染色鉴定 | 第50-52页 |
3.5.4 IA分化阶段ACSL4及脂肪代谢标志基因的时序表达谱 | 第52-54页 |
3.6 miR-34amimic/NC和miR-34ainhibitor/NC转染IA试验结果 | 第54-58页 |
3.6.1 ACSL4mRNA及其他标志基因的相对表达量 | 第54-57页 |
3.6.2 转染miR-34amimic和inhibitor后对细胞内脂滴含量的影响 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-61页 |
4.1 猪肌内前体脂肪细胞的分离 | 第58-59页 |
4.2 miR-34a靶基因的筛选 | 第59-60页 |
4.3 miR-34a与ACSL4基因影响肌内脂肪细胞增殖分化的机理 | 第60-61页 |
5 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第73页 |