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尿酸对鸡肠道氧化应激的影响和作用机制

中文摘要第9-11页
Abstract第11-14页
1 前言第15-27页
    1.1 家禽尿酸代谢第16-19页
        1.1.1 尿酸合成与去路第16-18页
        1.1.2 合成尿酸的组织第18-19页
    1.2 尿酸的生物学功能第19-20页
        1.2.1 抗氧化功能第19-20页
        1.2.2 免疫功能第20页
        1.2.3 其他功能第20页
    1.3 氧化应激第20-25页
        1.3.1 肠道氧化应激的诱因第21-22页
        1.3.2 氧化应激对肠道的影响第22页
        1.3.3 抗氧化防御系统第22-23页
        1.3.4 Keap1/Nrf2-ARE抗氧化通路第23-25页
    1.4 本研究的目的与意义第25-27页
2 材料与方法第27-47页
    2.1 试验动物第27页
    2.2 试验仪器与试剂第27-31页
        2.2.1 主要仪器第27-28页
        2.2.2 耗材第28-29页
        2.2.3 抗体第29-30页
        2.2.4 试剂配制第30-31页
    2.3 试验设计第31-32页
        2.3.1 前体物对肠上皮细胞尿酸合成的影响(试验一)第31页
        2.3.2 肠上皮细胞氧化应激模型的建立(试验二)第31-32页
        2.3.3 尿酸对肠上皮细胞氧化应激的影响(试验三)第32页
        2.3.4 肠道组织急性氧化应激对尿酸合成的影响(试验四)第32页
        2.3.5 低水平氧化刺激对肠上皮细胞尿酸合成的影响(试验五)第32页
    2.4 试验方法第32-46页
        2.4.1 原代鸡胚肠上皮细胞培养第32-33页
        2.4.2 外翻肠囊法离体培养十二指肠第33-34页
        2.4.3 1日龄蛋公雏灌服Fe~(2+)第34页
        2.4.4 细胞活力检测第34页
        2.4.5 细胞内ROS水平测定第34页
        2.4.6 细胞/组织中MDA的检测第34-35页
        2.4.7 相关基因mRNA表达水平检测第35-42页
        2.4.8 蛋白提取和WesternBlotting第42-44页
        2.4.9 尿囊素与尿酸测定第44-45页
        2.4.10 其他指标测定第45-46页
    2.5 数据处理第46-47页
3 结果与分析第47-69页
    3.1 前体物对肠上皮细胞尿酸合成的影响(试验一)第47-53页
        3.1.1 小肠组织尿酸合成通路表达第47-48页
        3.1.2 尿酸及氧化产物尿囊素的检测第48-49页
        3.1.3 次黄嘌呤与肌苷对肠上皮细胞尿酸合成和分泌的影响第49-52页
        3.1.4 肌苷对十二指肠组织尿酸合成的影响第52-53页
    3.2 肠上皮细胞氧化应激模型的建立(试验二)第53-56页
        3.2.1 梯度浓度的H_2O_2处理第53-55页
        3.2.2 梯度时间的处理第55页
        3.2.3 模型验证第55-56页
    3.3 尿酸对肠上皮细胞氧化应激的影响(试验三)第56-59页
        3.3.1 尿酸对肠上皮细胞细胞活力与氧化损伤标志物的影响第56页
        3.3.2 尿酸对肠上皮细胞抗氧化系统的影响第56-58页
        3.3.3 尿酸对Nrf2-ARE通路的影响第58-59页
    3.4 肠道组织急性氧化应激对尿酸合成的影响(试验四)第59-65页
        3.4.1 灌服Fe~(2+)对鸡肠道组织尿酸合成的影响第59-63页
        3.4.2 梯度浓度H_2O_2对肠上皮细胞尿酸合成与分泌的影响第63-65页
    3.5 低水平氧化刺激对肠上皮细胞尿酸合成与分泌的影响(试验五)第65-69页
        3.5.1 低浓度H_2O_2处理36h对肠上皮细胞尿酸合成与分泌的影响第65-67页
        3.5.2 低浓度H_2O_2处理2h对离体培养十二指肠尿酸分泌的影响第67-69页
4 讨论第69-76页
    4.1 肠道组织尿酸合成能力第69-71页
    4.2 尿酸对肠上皮细胞的抗氧化保护作用第71-74页
    4.3 氧化刺激对肠上皮细胞尿酸合成的影响第74-76页
5 结论第76-77页
6 创新与展望第77-78页
    6.1 创新点第77页
    6.2 研究展望第77-78页
参考文献第78-93页
致谢第93-94页

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