中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
1 前言 | 第15-27页 |
1.1 家禽尿酸代谢 | 第16-19页 |
1.1.1 尿酸合成与去路 | 第16-18页 |
1.1.2 合成尿酸的组织 | 第18-19页 |
1.2 尿酸的生物学功能 | 第19-20页 |
1.2.1 抗氧化功能 | 第19-20页 |
1.2.2 免疫功能 | 第20页 |
1.2.3 其他功能 | 第20页 |
1.3 氧化应激 | 第20-25页 |
1.3.1 肠道氧化应激的诱因 | 第21-22页 |
1.3.2 氧化应激对肠道的影响 | 第22页 |
1.3.3 抗氧化防御系统 | 第22-23页 |
1.3.4 Keap1/Nrf2-ARE抗氧化通路 | 第23-25页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第25-27页 |
2 材料与方法 | 第27-47页 |
2.1 试验动物 | 第27页 |
2.2 试验仪器与试剂 | 第27-31页 |
2.2.1 主要仪器 | 第27-28页 |
2.2.2 耗材 | 第28-29页 |
2.2.3 抗体 | 第29-30页 |
2.2.4 试剂配制 | 第30-31页 |
2.3 试验设计 | 第31-32页 |
2.3.1 前体物对肠上皮细胞尿酸合成的影响(试验一) | 第31页 |
2.3.2 肠上皮细胞氧化应激模型的建立(试验二) | 第31-32页 |
2.3.3 尿酸对肠上皮细胞氧化应激的影响(试验三) | 第32页 |
2.3.4 肠道组织急性氧化应激对尿酸合成的影响(试验四) | 第32页 |
2.3.5 低水平氧化刺激对肠上皮细胞尿酸合成的影响(试验五) | 第32页 |
2.4 试验方法 | 第32-46页 |
2.4.1 原代鸡胚肠上皮细胞培养 | 第32-33页 |
2.4.2 外翻肠囊法离体培养十二指肠 | 第33-34页 |
2.4.3 1日龄蛋公雏灌服Fe~(2+) | 第34页 |
2.4.4 细胞活力检测 | 第34页 |
2.4.5 细胞内ROS水平测定 | 第34页 |
2.4.6 细胞/组织中MDA的检测 | 第34-35页 |
2.4.7 相关基因mRNA表达水平检测 | 第35-42页 |
2.4.8 蛋白提取和WesternBlotting | 第42-44页 |
2.4.9 尿囊素与尿酸测定 | 第44-45页 |
2.4.10 其他指标测定 | 第45-46页 |
2.5 数据处理 | 第46-47页 |
3 结果与分析 | 第47-69页 |
3.1 前体物对肠上皮细胞尿酸合成的影响(试验一) | 第47-53页 |
3.1.1 小肠组织尿酸合成通路表达 | 第47-48页 |
3.1.2 尿酸及氧化产物尿囊素的检测 | 第48-49页 |
3.1.3 次黄嘌呤与肌苷对肠上皮细胞尿酸合成和分泌的影响 | 第49-52页 |
3.1.4 肌苷对十二指肠组织尿酸合成的影响 | 第52-53页 |
3.2 肠上皮细胞氧化应激模型的建立(试验二) | 第53-56页 |
3.2.1 梯度浓度的H_2O_2处理 | 第53-55页 |
3.2.2 梯度时间的处理 | 第55页 |
3.2.3 模型验证 | 第55-56页 |
3.3 尿酸对肠上皮细胞氧化应激的影响(试验三) | 第56-59页 |
3.3.1 尿酸对肠上皮细胞细胞活力与氧化损伤标志物的影响 | 第56页 |
3.3.2 尿酸对肠上皮细胞抗氧化系统的影响 | 第56-58页 |
3.3.3 尿酸对Nrf2-ARE通路的影响 | 第58-59页 |
3.4 肠道组织急性氧化应激对尿酸合成的影响(试验四) | 第59-65页 |
3.4.1 灌服Fe~(2+)对鸡肠道组织尿酸合成的影响 | 第59-63页 |
3.4.2 梯度浓度H_2O_2对肠上皮细胞尿酸合成与分泌的影响 | 第63-65页 |
3.5 低水平氧化刺激对肠上皮细胞尿酸合成与分泌的影响(试验五) | 第65-69页 |
3.5.1 低浓度H_2O_2处理36h对肠上皮细胞尿酸合成与分泌的影响 | 第65-67页 |
3.5.2 低浓度H_2O_2处理2h对离体培养十二指肠尿酸分泌的影响 | 第67-69页 |
4 讨论 | 第69-76页 |
4.1 肠道组织尿酸合成能力 | 第69-71页 |
4.2 尿酸对肠上皮细胞的抗氧化保护作用 | 第71-74页 |
4.3 氧化刺激对肠上皮细胞尿酸合成的影响 | 第74-76页 |
5 结论 | 第76-77页 |
6 创新与展望 | 第77-78页 |
6.1 创新点 | 第77页 |
6.2 研究展望 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-93页 |
致谢 | 第93-94页 |