| 中文摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 英文缩略词表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 技术路线 | 第17-18页 |
| 第一部分 桂枝挥发油及桂皮醛对THP-1巨噬样细胞NLRP3炎症小体通路的影响 | 第18-49页 |
| 1.实验材料 | 第18-21页 |
| 1.1 细胞株 | 第18页 |
| 1.2 药物 | 第18-19页 |
| 1.3 主要试剂 | 第19-21页 |
| 1.4 仪器 | 第21页 |
| 2.实验方法 | 第21-28页 |
| 2.1 桂枝挥发油的成分分析 | 第21-22页 |
| 2.2 THP-1细胞生长曲线及细胞活力测定 | 第22页 |
| 2.3 PMA诱导THP-1细胞为M0型巨噬样细胞的条件确定 | 第22页 |
| 2.4 桂枝挥发油及桂皮醛对M1型THP-1巨噬样细胞的毒性考察 | 第22页 |
| 2.5 基于NLRP3炎症小体通路研究桂枝挥发油及桂皮醛对THP-1巨噬样细胞的作用 | 第22-28页 |
| 3.统计方法 | 第28页 |
| 4.实验结果 | 第28-46页 |
| 4.1 桂枝挥发油的成分 | 第28-30页 |
| 4.2 THP-1细胞的生长曲线及细胞活力 | 第30页 |
| 4.3 PMA诱导THP-1细胞为M0型巨噬样细胞的条件 | 第30页 |
| 4.4 桂枝挥发油及桂皮醛对M1型THP-1巨噬样细胞的毒性考察 | 第30-31页 |
| 4.5 药物对THP-1巨噬样细胞上清中IL-1β分泌水平的影响 | 第31-32页 |
| 4.6 药物对细胞上清液中ASC、Caspase-1(p20)和pro-IL-1β蛋白表达的影响 | 第32-33页 |
| 4.7 药物对细胞中NLRP3、ASC、Pro-Caspase-1和pro-IL-1β蛋白表达的影响 | 第33-36页 |
| 4.8 免疫荧光法测定CathepsinB、NLRP3和ASC蛋白表达 | 第36-38页 |
| 4.9 药物对细胞中NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1α、IL-1β和IL-6mRNA表达的影响 | 第38-41页 |
| 4.10 药物对THP-1巨噬样细胞ROS含量的影响 | 第41页 |
| 4.11 K~+对nigericin致THP-1巨噬样细胞上清中IL-1β分泌的影响 | 第41-46页 |
| 5.小结 | 第46-49页 |
| 第二部分 桂枝挥发油及桂皮醛对内毒素中毒小鼠的作用与机制研究 | 第49-81页 |
| 1.实验材料 | 第49-51页 |
| 1.1 实验动物 | 第49页 |
| 1.2 实验药物 | 第49页 |
| 1.3 主要试剂 | 第49-50页 |
| 1.4 仪器 | 第50-51页 |
| 2.实验方法 | 第51-56页 |
| 2.1 C57BL/6J小鼠内毒素中毒模型构建条件探索 | 第51页 |
| 2.2 C57BL/6J小鼠内毒素中毒模型的动态观察 | 第51-52页 |
| 2.3 内毒素中毒C57BL/6J小鼠模型的建立与给药 | 第52页 |
| 2.4 内毒素中毒小鼠的一般状态观察与体重测定 | 第52页 |
| 2.5 内毒素中毒小鼠WBC和PLT及脏器指数的测定 | 第52页 |
| 2.6 ELISA法测定血清中IL-18的含量 | 第52页 |
| 2.7 液相蛋白芯片技术测定血清中前炎症因子和趋化因子的含量 | 第52页 |
| 2.8 肺组织HE病理切片的制备 | 第52-53页 |
| 2.9 肺组织中NO含量的测定 | 第53页 |
| 2.10 RT-PCR | 第53-55页 |
| 2.11 WesternBlotting | 第55页 |
| 2.12 免疫组化法测定肺组织中P2X7R和CathepsinB蛋白的表达 | 第55-56页 |
| 2.13 表达谱基因芯片测定 | 第56页 |
| 3.统计方法 | 第56-57页 |
| 4.实验结果 | 第57-79页 |
| 4.1 LPS不同造模剂量和攻击时间对C57BL/6J小鼠的影响 | 第57页 |
| 4.2 动态观察LPS对C57BL/6J小鼠的影响 | 第57-59页 |
| 4.3 给药期间小鼠一般状态与体重的变化 | 第59页 |
| 4.4 桂枝挥发油及桂皮醛对全血WBC、PLT及脏器指数的影响 | 第59页 |
| 4.5 药物对血清中前炎症因子和趋化因子的影响 | 第59-62页 |
| 4.6 药物对肺组织病理形态学的影响 | 第62-63页 |
| 4.7 药物对肺组织中NO含量的影响 | 第63-64页 |
| 4.8 肺组织中目标基因的测定 | 第64-71页 |
| 4.9 肺组织中目标蛋白的表达 | 第71-73页 |
| 4.10 药物对肺组织CathepsinB、P2X7R蛋白表达水平的影响 | 第73-75页 |
| 4.11 基于基因芯片技术检测桂枝挥发油和桂皮醛对内毒素中毒小鼠的影响 | 第75-79页 |
| 5.小结 | 第79-81页 |
| 第三部分 桂枝乙酸乙酯部位和桂皮酸对内毒素中毒小鼠的作用及其机制研究 | 第81-100页 |
| 1.实验材料 | 第81-82页 |
| 1.1 药物及试剂 | 第81-82页 |
| 1.2 动物 | 第82页 |
| 1.3 实验仪器 | 第82页 |
| 2.实验方法 | 第82-84页 |
| 2.1 桂枝乙酸乙酯部位的制备与GC-MS分析 | 第82-83页 |
| 2.2 KM种小鼠内毒素中毒模型构建条件探索 | 第83页 |
| 2.3 内毒素中毒小鼠模型的建立与给药 | 第83页 |
| 2.4 测定脏器指数和肺相对含水量 | 第83页 |
| 2.5 测定血清BUN、CRE、ALT、AST和肝脏SOD、MDA的含量 | 第83页 |
| 2.6 测定血清中IL-1β、IL-18、TNF-α和IFN-γ的含量 | 第83页 |
| 2.7 肺、肝、肾、脾脏HE病理切片的制作 | 第83-84页 |
| 2.8 RT-PCR | 第84页 |
| 2.9 WesternBlotting | 第84页 |
| 3.统计方法 | 第84-85页 |
| 4.实验结果 | 第85-98页 |
| 4.1 桂枝乙酸乙酯部位的成分 | 第85页 |
| 4.2 KM种小鼠内毒素中毒模型构建条件确立 | 第85-87页 |
| 4.3 药物对脏器指数和肺干湿重比的影响 | 第87页 |
| 4.4 基于血液生化指标检测药物对内毒素中毒小鼠肝脏、肾脏的影响 | 第87-88页 |
| 4.5 药物对血清中IL-18、TNF-α、IL-1β和IFN-γ的影响 | 第88页 |
| 4.6 基于HE病理切片观察药物对肺、肝、肾、脾脏的影响 | 第88-92页 |
| 4.7 药物对肺组织中NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1βmRNA表达的影响 | 第92-95页 |
| 4.8 药物对肺组织中NLRP3、ASC、Pro-Caspase-1、Caspase-1(p20)和Pro-IL-1β蛋白表达的影响 | 第95-98页 |
| 5.小结 | 第98-100页 |
| 讨论 | 第100-113页 |
| 1.内毒素中毒小鼠模型的构建 | 第101页 |
| 2.桂枝挥发油和桂皮醛对内毒素中毒小鼠的保护作用研究 | 第101-103页 |
| 2.1 对肺组织中嗜中性粒细胞数量和NO水平的影响 | 第101-102页 |
| 2.2 对血清中前炎症因子和趋化因子的影响 | 第102-103页 |
| 3.桂枝乙酸乙酯部位和桂皮酸对内毒素中毒小鼠的保护作用研究 | 第103-104页 |
| 3.1 对胸腺、肾、肝、肺、脾脏的影响 | 第103-104页 |
| 3.2 对血清中前炎症因子的影响 | 第104页 |
| 4.基于NLRP3炎症小体信号通路药物作用机制研究 | 第104-110页 |
| 4.1 桂枝挥发油和桂皮醛抗炎作用机制研究 | 第105-109页 |
| 4.1.1 以THP-1巨噬样细胞炎症模型为载体 | 第105-107页 |
| 4.1.2 以内毒素中毒小鼠模型为载体 | 第107页 |
| 4.1.3 桂枝挥发油和桂皮醛抗炎作用机制初步比较 | 第107-109页 |
| 4.2 桂枝乙酸乙酯部位及桂皮酸对内毒素中毒小鼠的保护作用机制研究 | 第109-110页 |
| 5.药物对内毒素中毒小鼠保护作用的综合评价 | 第110-113页 |
| 5.1 桂枝挥发油和桂皮醛对内毒素中毒小鼠的作用 | 第110-111页 |
| 5.2 桂枝乙酸乙酯部位及桂皮酸对内毒素中毒小鼠的作用 | 第111-113页 |
| 结论 | 第113-114页 |
| 创新与特色 | 第114-115页 |
| 问题与展望 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-121页 |
| 综述一 | 第121-129页 |
| 参考文献 | 第125-129页 |
| 综述二 | 第129-140页 |
| 参考文献 | 第138-140页 |
| 致谢 | 第140-141页 |
| 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第141-142页 |
