| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 绪论 | 第15-41页 |
| 第一节 造血作用研究 | 第15-20页 |
| 一、造血作用的主要特征 | 第15-17页 |
| 二、无脊椎动物造血作用研究概述 | 第17-20页 |
| 第二节 造血细胞的发生及其调节机制 | 第20-33页 |
| 一、造血细胞的发生 | 第21-25页 |
| 二、造血细胞发生的调控机制 | 第25-33页 |
| 第三节 无脊椎动物血淋巴细胞再生及其调节机制 | 第33-39页 |
| 一、无脊椎动物的血淋巴细胞及其介导的免疫反应 | 第33-36页 |
| 二、无脊椎动物血淋巴细胞再生的转录调控 | 第36-37页 |
| 三、体液免疫分子参与调节无脊椎动物血淋巴细胞再生 | 第37-39页 |
| 第四节 本研究的目的和意义 | 第39-41页 |
| 第二章 材料与方法 | 第41-61页 |
| 第一节 实验材料 | 第41-46页 |
| 一、实验动物和菌株 | 第41页 |
| 二、试剂信息 | 第41-43页 |
| 三、仪器设备信息 | 第43-44页 |
| 四、引物信息 | 第44-46页 |
| 第二节 实验方法 | 第46-61页 |
| 一、中华绒螯蟹的细菌处理、药物注射以及样品采集 | 第46-47页 |
| 二、中华绒螯蟹造血组织的分离及消化 | 第47页 |
| 三、细胞滴片、造血组织石蜡切片的制备及苏木精伊红染色观察 | 第47-49页 |
| 四、扫描电镜及透射电镜样品制备及观察 | 第49页 |
| 五、蛋白免疫印迹检测及免疫荧光定位 | 第49-50页 |
| 六、EdU检测细胞增殖 | 第50页 |
| 七、中华绒螯蟹组织总RNA的提取及cDNA模板的制备 | 第50-51页 |
| 八、荧光实时定量PCR(RT-PCR)检测 | 第51-52页 |
| 九、中华绒螯蟹血淋巴细胞吞噬活性、凋亡率、ROS、Ca~(2+)含量的检测 | 第52-53页 |
| 十、基于流式细胞仪的细胞分选 | 第53页 |
| 十一、血淋巴细胞及造血组织cDNA文库的构建和测序 | 第53页 |
| 十二、转录组数据分析 | 第53-54页 |
| 十三、细胞活力及血细胞总数检测 | 第54页 |
| 十四、目的基因克隆 | 第54-55页 |
| 十五、目的基因的生物信息学分析 | 第55-56页 |
| 十六、目的蛋白的重组表达、纯化 | 第56-58页 |
| 十七、重组蛋白的活性检测 | 第58页 |
| 十八、RNA干扰实验及检测 | 第58-60页 |
| 十九、数据的统计处理 | 第60-61页 |
| 第三章 实验结果 | 第61-103页 |
| 第一节 中华绒螯蟹造血组织的鉴定 | 第61-69页 |
| 一、中华绒螯蟹造血组织的位置、组化特征及超微结构 | 第61-65页 |
| 二、GATA1和Runx1同源蛋白在造血组织以及血细胞中的表达模式 | 第65-67页 |
| 三、造血组织中的DNA复制活动 | 第67-69页 |
| 第二节 中华绒螯蟹血淋巴细胞分类及功能研究 | 第69-80页 |
| 一、中华绒螯蟹血淋巴细胞的分类及其特征 | 第69-71页 |
| 二、血淋巴细胞亚群对于免疫刺激的响应 | 第71-76页 |
| 三、细胞分选、染色观察及相关基因表达模式分析 | 第76-80页 |
| 第三节 中华绒螯蟹造血组织及血淋巴细胞转录组学研究 | 第80-86页 |
| 一、转录组文库的构建和测序 | 第80页 |
| 二、基因本组装、表达丰度估计以及差异基因的鉴定 | 第80-81页 |
| 三、差异基因的GO注释及富集分析 | 第81-83页 |
| 四、差异基因的KEGG通路分析 | 第83-84页 |
| 五、差异基因的表达分析 | 第84-86页 |
| 第四节 中华绒螯蟹造血相关因子的鉴定及功能分析 | 第86-103页 |
| 一、造血组织细胞ROS水平对中华绒螯蟹造血过程的调控作用 | 第86-89页 |
| 二、Astakine对中华绒螯蟹造血过程的调控作用 | 第89-103页 |
| 第四章 讨论 | 第103-113页 |
| 第一节 中华绒螯蟹存在特化的造血组织 | 第103-105页 |
| 第二节 中华绒螯蟹的血淋巴细胞分为不同的功能亚群 | 第105-108页 |
| 第三节 中华绒螯蟹造血组织细胞与血淋巴细胞分子特征差异显著 | 第108-109页 |
| 第四节 ROS促进中华绒螯蟹的造血组织细胞的增殖分化 | 第109-110页 |
| 第五节 EsAstakine通过ROS依赖的信号通路促进造血细胞的增殖以及血淋巴细胞的再生 | 第110-113页 |
| 第五章 结论 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-139页 |
| 致谢 | 第139-141页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文及研究成果 | 第141-147页 |
