| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-17页 |
| 1.1 课题的提出 | 第11-12页 |
| 1.2 国内外研究现状的分析 | 第12-15页 |
| 1.2.1 水稻转基因的方法 | 第12-14页 |
| 1.2.2 大片段DNA在农杆菌中稳定性的研究进展 | 第14页 |
| 1.2.3 大片段DNA遗传转化的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-25页 |
| 2.1 水稻材料、菌株和载体 | 第17页 |
| 2.2 检测B73 BIBAC文库克隆的插入片段大小 | 第17页 |
| 2.3 检测B73 BIBAC克隆在E.coli DH10B中的稳定性 | 第17-18页 |
| 2.4 检测B73 BIBAC克隆在农杆菌EHA105中的稳定性 | 第18-20页 |
| 2.4.1 直接检测B73 BIBAC克隆在农杆菌EHA105中的稳定性 | 第18-19页 |
| 2.4.2 间接检测B73 BIBAC质粒在农杆菌EHA105中的稳定性 | 第19-20页 |
| 2.5 B73 BIBAC克隆转化水稻中花11 | 第20页 |
| 2.6 PCR检测再生植株 | 第20-21页 |
| 2.7 Tail-PCR扩增阳性植株插入片段的两端序列 | 第21-25页 |
| 2.7.1 特异引物和简并引物序列 | 第21页 |
| 2.7.2 Tail-PCR反应流程图 | 第21-22页 |
| 2.7.3 Tail-PCR反应体系及程序 | 第22-24页 |
| 2.7.4 Tail-PCR序列的分析 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-54页 |
| 3.1 B73 BIBAC文库克隆的插入片段大小 | 第25-28页 |
| 3.2 B73 BIBAC克隆在E.coli DH10B中的稳定性 | 第28-31页 |
| 3.3 B73 BIBAC克隆在农杆菌EHA105中的稳定性 | 第31-44页 |
| 3.3.1 直接法检测B73 BIBAC克隆在农杆菌EHA105中的稳定性 | 第31-37页 |
| 3.3.2 间接法检测B73 BIBAC克隆在农杆菌EHA105中的稳定性 | 第37-44页 |
| 3.4 B73 BIBAC克隆遗传转化水稻 | 第44-46页 |
| 3.5 Tail-PCR序列分析 | 第46-54页 |
| 3.5.1 Tail-PCR序列 | 第46-49页 |
| 3.5.2 Tail-PCR序列的分析 | 第49-54页 |
| 3.5.2.1 Tail-PCR序列所属的重复序列类型 | 第49页 |
| 3.5.2.2 Tail-PCR序列比对BIBAC末端序列 | 第49-50页 |
| 3.5.2.3 Tail-PCR序列和b6质粒末端序列比对玉米B73基因组 | 第50-51页 |
| 3.5.2.4 第5号阳性植株的Tail-PCR序列和b6质粒的末端序列在B | 第51-53页 |
| 3.4.2.5 定位于Chr7的164kb区域的基本分析 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 4.1 玉米B73 BIBAC克隆在农杆菌EHA105中稳定性的检测方法的比较 | 第54-55页 |
| 4.2 Tail-PCR扩增阳性植株插入片段的两端序列的方法 | 第55页 |
| 4.3 单链T-DNA的形成方向和再生植株PCR检测阳性率的联系 | 第55页 |
| 4.4 玉米BIBAC大片段DNA在农杆菌中的稳定性 | 第55-56页 |
| 4.5 玉米BIBAC大片段DNA的遗传转化 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录 | 第62-76页 |
| 1. 质粒提取的试剂配置 | 第62-63页 |
| 2. 农杆菌EHA105质粒DNA的提取 | 第63页 |
| 3. 植物DNA提取和脉冲电泳的试剂配置 | 第63-64页 |
| 4. 农杆菌介导的水稻中花11的转化 | 第64-72页 |
| 5. BIBAC原始载体图和辅助质粒pCH32 | 第72-73页 |
| 6. Tail-PCR序列 | 第73-76页 |
