摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
文献综述 | 第9-17页 |
第一章 人巨细胞病毒疫苗的研究进展 | 第9-17页 |
1.1 HCMV 生物学特性 | 第9-10页 |
1.1.1 HCMV 的分类及结构特征 | 第9页 |
1.1.2 HCMV 入侵细胞的机制 | 第9-10页 |
1.2 HCMV 感染及危害 | 第10-11页 |
1.2.1 先天性HCMV 感染及其危害 | 第10-11页 |
1.2.2 器官移植患者及免疫力低下者HCMV 感染及危害 | 第11页 |
1.3 HCMV 疫苗研究的必要性及依据 | 第11-12页 |
1.4 HCMV 疫苗研究现状 | 第12-16页 |
1.4.1 减毒活疫苗 | 第12-13页 |
1.4.2 蛋白亚单位疫苗 | 第13-14页 |
1.4.3 病毒载体疫苗 | 第14-15页 |
1.4.4 DNA 疫苗 | 第15页 |
1.4.5 致密体候选疫苗 | 第15-16页 |
1.5 展望 | 第16-17页 |
试验研究 | 第17-41页 |
第二章 基于HCMV-gB 抗原的疫苗分子设计及其免疫效果评价 | 第17-41页 |
2.1 材料 | 第17-21页 |
2.1.1 仪器和设备 | 第17-18页 |
2.1.2 病毒标本、载体及细胞系 | 第18-19页 |
2.1.3 主要试剂 | 第19页 |
2.1.4 常用溶液配方 | 第19-21页 |
2.1.5 实验动物 | 第21页 |
2.2 方法 | 第21-30页 |
2.2.1 目的基因的克隆 | 第21-25页 |
2.2.2 重组表达载体 pCI-neo- gB1、pCI-neo- gB2 和 pET21b(+)-gB90 的构建 | 第25页 |
2.2.3 gB90 蛋白表达纯化 | 第25-26页 |
2.2.4 重组质粒转染293FT 细胞及目的蛋白表达纯化 | 第26-28页 |
2.2.5 蛋白浓度测定(Bradford 法) | 第28页 |
2.2.6 目的蛋白的Western blot 验证 | 第28页 |
2.2.7 免疫效果评价 | 第28-29页 |
2.2.8 数据分析 | 第29-30页 |
2.3 结果与分析 | 第30-39页 |
2.3.1 HCMV-gB 三维结构的模拟以及候选抗原gB1 和gB2 的分子设计 | 第30-33页 |
2.3.2 HCMV-gB、gB1 和gB2 融合基因的PCR 检测结果 | 第33-34页 |
2.3.3 哺乳动物细胞表达载体的构建及酶切鉴定 | 第34页 |
2.3.4 gB1 和gB2 在哺乳动物细胞中的表达和纯化结果 | 第34-35页 |
2.3.5 gB1 和gB2 的Western blot 验证结果 | 第35-37页 |
2.3.6 gB1 和 gB2 的免疫效果评价 | 第37-39页 |
2.4 讨论 | 第39-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
附录 | 第47-52页 |
缩略词 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54页 |