胰激肽释放酶的分离纯化
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-29页 |
| 1.1 胰酶简介 | 第11-13页 |
| 1.2 蛋白质纯化技术简介 | 第13-18页 |
| 1.2.1 利用分子大小差异的分离纯化 | 第13-14页 |
| 1.2.2 利用溶解度差异的分离纯化 | 第14-15页 |
| 1.2.3 利用电荷差异的分离纯化 | 第15-16页 |
| 1.2.4 利用对配基亲和力差异的分离纯化 | 第16-17页 |
| 1.2.5 其他方法 | 第17-18页 |
| 1.3 激肽释放酶简介 | 第18-24页 |
| 1.3.1 激肽释放酶的发现及种类 | 第18页 |
| 1.3.2 猪胰激肽释放酶的性质与结构 | 第18-20页 |
| 1.3.3 激肽释放酶-激肽系统 | 第20页 |
| 1.3.4 激肽释放酶的临床功效 | 第20-24页 |
| 1.4 激肽释放酶的检测方法 | 第24-25页 |
| 1.4.1 生物检定法 | 第25页 |
| 1.4.2 吸光度增值法 | 第25页 |
| 1.4.3 电位滴定法 | 第25页 |
| 1.4.4 MBTH法 | 第25页 |
| 1.5 激肽释放酶的纯化方法研究进展 | 第25-27页 |
| 1.5.1 离子交换层析法 | 第26页 |
| 1.5.2 亲和层析法 | 第26-27页 |
| 1.5.3 疏水层析法 | 第27页 |
| 1.6 激肽释放酶的研究方向及趋势 | 第27-28页 |
| 1.7 本研究的目的及所需解决的问题 | 第28-29页 |
| 第二章 激肽释放酶检测方法的建立 | 第29-37页 |
| 2.1 试验试剂及其配制 | 第29-30页 |
| 2.1.1 SDS-PAGE蛋白质电泳检测 | 第29页 |
| 2.1.2 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 | 第29-30页 |
| 2.1.3 激肽释放酶活性测定 | 第30页 |
| 2.2 仪器设备 | 第30页 |
| 2.3 检测步骤及标准品检测结果 | 第30-37页 |
| 2.3.1 SDS-PAGE蛋白质电泳检测 | 第30-32页 |
| 2.3.2 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 | 第32-33页 |
| 2.3.3 激肽释放酶活性测定 | 第33-37页 |
| 第三章 激肽释放酶盐析及超滤研究 | 第37-43页 |
| 3.1 胰酶的制备 | 第37-38页 |
| 3.1.1 实验原理 | 第37页 |
| 3.1.2 材料与试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.3 试验仪器 | 第38页 |
| 3.1.4 工艺流程 | 第38页 |
| 3.2 盐析研究 | 第38-40页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第38-39页 |
| 3.2.2 试验仪器 | 第39页 |
| 3.2.3 盐析沉淀范围研究 | 第39页 |
| 3.2.4 盐析时间对效果的影响 | 第39-40页 |
| 3.3 超滤研究 | 第40页 |
| 3.3.1 材料与试剂 | 第40页 |
| 3.3.2 试验仪器 | 第40页 |
| 3.3.3 超滤浓缩倍数研究 | 第40页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第40-43页 |
| 3.4.1 盐析的研究 | 第40-41页 |
| 3.4.2 超滤的研究 | 第41-43页 |
| 第四章 激肽释放酶离子交换层析研究 | 第43-51页 |
| 4.1 实验原理 | 第43页 |
| 4.2 材料与试剂 | 第43-44页 |
| 4.3 试验仪器 | 第44页 |
| 4.4 试验设计 | 第44-45页 |
| 4.4.1 吸附pH的选择试验 | 第44页 |
| 4.4.2 吸附盐离子浓度选择试验 | 第44-45页 |
| 4.4.3 洗脱盐浓度选择试验 | 第45页 |
| 4.4.4 DEAE-Sepharose洗脱试验 | 第45页 |
| 4.5 结果与讨论 | 第45-51页 |
| 4.5.1 吸附pH的选择试验 | 第45-46页 |
| 4.5.2 吸附盐离子浓度选择试验 | 第46-47页 |
| 4.5.3 洗脱盐浓度选择试验 | 第47-48页 |
| 4.5.4 DEAE-Sepharose洗脱试验 | 第48-51页 |
| 第五章 总结与展望 | 第51-52页 |
| 5.1 总结 | 第51页 |
| 5.2 展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
