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剪接因子RBM25/LUC7L3在梗死后心力衰竭及恶性心律失常发生发展中的作用机制及基因干预策略

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
缩略语表第8-11页
第一部分:前言第11-15页
第二部分:研究目的与框架第15-17页
    2.1 主要研究目的第15页
    2.2 研究框架第15-17页
第三部分:研究中设计的仪器、材料与耗材第17-30页
    3.1 仪器第17-20页
    3.2 试剂/耗材第20-25页
    3.3 自制溶液配方第25-28页
    3.4 siRNA和引物序列第28-30页
第四部分:实验具体研究设计与方法第30-64页
    4.1 siRNA设计与制备第30-31页
    4.2 慢病毒包埋与检测第31-33页
    4.3 乳鼠原代心肌细胞提取第33-35页
    4.4 乳鼠原代心肌细胞转染第35-36页
    4.5 流式细胞仪检测转染效率第36-37页
    4.6 全细胞蛋白提取第37页
    4.7 蛋白浓度测定第37-38页
    4.8 Western Blot第38-40页
    4.9 全细胞RNA提取第40-41页
    4.10 RNA逆转录方法第41页
    4.11 qPCR方法第41-42页
    4.12 RNA结合蛋白免疫共沉淀第42-47页
    4.13 RNA质量检测第47-48页
    4.14 SD大鼠慢性心衰模型制作:高位结扎冠状动脉法第48页
    4.15 慢病毒心肌多点注射第48-49页
    4.16 大鼠超声心动图测量及数据分析方法第49页
    4.17 乌头碱诱发心律失常实验第49-50页
    4.18 大鼠血流动力学检查方法第50-51页
    4.19 大鼠取材及保存方法第51页
    4.20 病理组织脱水及包埋、切片方法第51页
    4.21 HE染色第51-52页
    4.22 Masson染色第52-53页
    4.23 组织免疫荧光染色第53-54页
    4.24 ELISA法检测血液Angll和BNP第54-59页
    4.25 Langendoff灌流取大鼠心室肌细胞第59-61页
    4.26 膜片钳检测Na+电流方法第61-64页
第五部分:细胞实验结果与分析讨论第64-80页
    5.1 siRNA的设计、构建和筛选结果第64-66页
    5.2 病毒包埋与滴度测定第66-67页
    5.3 RBM25/LUC7L3对Nav1.5表达的影响第67-75页
    5.4 RAAS轴干预对RBM25/LUC7L3表达的影响及对Nav1.5表达的影响第75-80页
第六部分:动物实验结果分析与讨论第80-113页
    6.1 RNA结合蛋白免疫共沉淀结果第80-82页
    6.2 动物模型建立情况第82-84页
    6.3 基因、药物干预大鼠的生存情况和生理指标结果及讨论第84-97页
        6.3.1 生存曲线分析第85-88页
        6.3.2 超声心动图分析第88-92页
        6.3.3 乌头碱诱发心律失常结果分析第92-97页
    6.4 基因、药物干预大鼠大体标本的病理分析第97-105页
        6.4.1 HE染色分析第97-98页
        6.4.2 Masson染色分析胶原容积分数第98-101页
        6.4.3 免疫荧光半定量分析第101-105页
    6.5 基因、药物干预大鼠组织标本分析第105-109页
        6.5.1 血清BNP、Angll结果分析第105-106页
        6.5.2 组织RNA的qPCR结果分析第106-109页
    6.6 膜片钳钠通道测定初步结果分析第109-110页
    6.7 RNA-Seq数据以及RIP-Seq数据中SCN5A mRNA可变剪接初步分析第110-113页
第七部分:研究结果总结与不足分析第113-115页
    7.1 研究结果总结第113-114页
    7.2 研究不足第114-115页
参考文献第115-119页
综述:钠通道分子生物学特点及研究进展第119-130页
    综述参考文献第126-130页
致谢第130-132页

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