摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语表 | 第8-11页 |
第一部分:前言 | 第11-15页 |
第二部分:研究目的与框架 | 第15-17页 |
2.1 主要研究目的 | 第15页 |
2.2 研究框架 | 第15-17页 |
第三部分:研究中设计的仪器、材料与耗材 | 第17-30页 |
3.1 仪器 | 第17-20页 |
3.2 试剂/耗材 | 第20-25页 |
3.3 自制溶液配方 | 第25-28页 |
3.4 siRNA和引物序列 | 第28-30页 |
第四部分:实验具体研究设计与方法 | 第30-64页 |
4.1 siRNA设计与制备 | 第30-31页 |
4.2 慢病毒包埋与检测 | 第31-33页 |
4.3 乳鼠原代心肌细胞提取 | 第33-35页 |
4.4 乳鼠原代心肌细胞转染 | 第35-36页 |
4.5 流式细胞仪检测转染效率 | 第36-37页 |
4.6 全细胞蛋白提取 | 第37页 |
4.7 蛋白浓度测定 | 第37-38页 |
4.8 Western Blot | 第38-40页 |
4.9 全细胞RNA提取 | 第40-41页 |
4.10 RNA逆转录方法 | 第41页 |
4.11 qPCR方法 | 第41-42页 |
4.12 RNA结合蛋白免疫共沉淀 | 第42-47页 |
4.13 RNA质量检测 | 第47-48页 |
4.14 SD大鼠慢性心衰模型制作:高位结扎冠状动脉法 | 第48页 |
4.15 慢病毒心肌多点注射 | 第48-49页 |
4.16 大鼠超声心动图测量及数据分析方法 | 第49页 |
4.17 乌头碱诱发心律失常实验 | 第49-50页 |
4.18 大鼠血流动力学检查方法 | 第50-51页 |
4.19 大鼠取材及保存方法 | 第51页 |
4.20 病理组织脱水及包埋、切片方法 | 第51页 |
4.21 HE染色 | 第51-52页 |
4.22 Masson染色 | 第52-53页 |
4.23 组织免疫荧光染色 | 第53-54页 |
4.24 ELISA法检测血液Angll和BNP | 第54-59页 |
4.25 Langendoff灌流取大鼠心室肌细胞 | 第59-61页 |
4.26 膜片钳检测Na+电流方法 | 第61-64页 |
第五部分:细胞实验结果与分析讨论 | 第64-80页 |
5.1 siRNA的设计、构建和筛选结果 | 第64-66页 |
5.2 病毒包埋与滴度测定 | 第66-67页 |
5.3 RBM25/LUC7L3对Nav1.5表达的影响 | 第67-75页 |
5.4 RAAS轴干预对RBM25/LUC7L3表达的影响及对Nav1.5表达的影响 | 第75-80页 |
第六部分:动物实验结果分析与讨论 | 第80-113页 |
6.1 RNA结合蛋白免疫共沉淀结果 | 第80-82页 |
6.2 动物模型建立情况 | 第82-84页 |
6.3 基因、药物干预大鼠的生存情况和生理指标结果及讨论 | 第84-97页 |
6.3.1 生存曲线分析 | 第85-88页 |
6.3.2 超声心动图分析 | 第88-92页 |
6.3.3 乌头碱诱发心律失常结果分析 | 第92-97页 |
6.4 基因、药物干预大鼠大体标本的病理分析 | 第97-105页 |
6.4.1 HE染色分析 | 第97-98页 |
6.4.2 Masson染色分析胶原容积分数 | 第98-101页 |
6.4.3 免疫荧光半定量分析 | 第101-105页 |
6.5 基因、药物干预大鼠组织标本分析 | 第105-109页 |
6.5.1 血清BNP、Angll结果分析 | 第105-106页 |
6.5.2 组织RNA的qPCR结果分析 | 第106-109页 |
6.6 膜片钳钠通道测定初步结果分析 | 第109-110页 |
6.7 RNA-Seq数据以及RIP-Seq数据中SCN5A mRNA可变剪接初步分析 | 第110-113页 |
第七部分:研究结果总结与不足分析 | 第113-115页 |
7.1 研究结果总结 | 第113-114页 |
7.2 研究不足 | 第114-115页 |
参考文献 | 第115-119页 |
综述:钠通道分子生物学特点及研究进展 | 第119-130页 |
综述参考文献 | 第126-130页 |
致谢 | 第130-132页 |