| 致谢 | 第4-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-33页 |
| 1.1 对虾养殖业发展现状与白斑综合症病毒的威胁 | 第13-17页 |
| 1.1.1 凡纳滨对虾及对虾养殖业发展现状 | 第13-14页 |
| 1.1.2 白斑综合症病毒简介 | 第14-17页 |
| 1.2 白斑综合症病毒的宿主及传播途径 | 第17-19页 |
| 1.2.1 白斑综合症病毒的宿主范围 | 第17页 |
| 1.2.2 白斑综合症病毒的传播途径研究 | 第17-19页 |
| 1.3 白斑综合症病毒的结构蛋白研究 | 第19-24页 |
| 1.3.1 白斑综合症病毒结构蛋白的发现与命名 | 第19-22页 |
| 1.3.2 白斑综合症病毒结构蛋白间的互作研究 | 第22-24页 |
| 1.4 白斑综合症病毒与宿主蛋白相互作用研究进展 | 第24-31页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第31-33页 |
| 第二章 凡纳滨对虾消化道酵母双杂交文库的构建及质量鉴定 | 第33-47页 |
| 2.1 引言 | 第33页 |
| 2.2 实验材料 | 第33-34页 |
| 2.2.1 实验试剂与材料 | 第33-34页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第34页 |
| 2.2.3 实验动物 | 第34页 |
| 2.3 实验方法 | 第34-42页 |
| 2.3.1 基因组DNA提取及病毒检测 | 第34-36页 |
| 2.3.2 Total RNA的提取 | 第36-37页 |
| 2.3.3 mRNA的分离 | 第37页 |
| 2.3.4 cDNA文库（Uncut型）的构建 | 第37页 |
| 2.3.5 cDNA文库（Uncut型）质量鉴定 | 第37-38页 |
| 2.3.6 消化道酵母双杂交cDNA文库的构建 | 第38-39页 |
| 2.3.7 消化道酵母双杂交cDNA文库质量鉴定 | 第39-40页 |
| 2.3.8 消化道酵母双杂交文库的构建及质量鉴定 | 第40-42页 |
| 2.4 实验结果 | 第42-45页 |
| 2.4.1 建库用凡纳滨对虾个体病毒检测结果 | 第42-43页 |
| 2.4.2 消化道酵母双杂交cDNA文库质量鉴定结果 | 第43-44页 |
| 2.4.3 消化道酵母双杂交文库质量鉴定结果 | 第44-45页 |
| 2.5 讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 凡纳滨对虾鳃酵母双杂交文库的构建及质量鉴定 | 第47-61页 |
| 3.1 引言 | 第47页 |
| 3.2 实验材料 | 第47-48页 |
| 3.2.1 实验试剂与材料 | 第47页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第47-48页 |
| 3.2.3 实验动物 | 第48页 |
| 3.3 实验方法 | 第48-55页 |
| 3.3.1 基因组DNA提取及病毒检测 | 第48页 |
| 3.3.2 Total RNA的提取 | 第48-49页 |
| 3.3.3 cDNA第一链合成 | 第49页 |
| 3.3.4 LD PCR（ds cDNA的合成） | 第49-50页 |
| 3.3.5 ds cDNA纯化 | 第50页 |
| 3.3.6 ds cDNA文库均一化 | 第50-51页 |
| 3.3.7 PCR放大 | 第51-53页 |
| 3.3.8 均一化的ds cDNA纯化及质量检测 | 第53-54页 |
| 3.3.9 鳃酵母双杂交文库的构建及质量鉴定 | 第54-55页 |
| 3.4 实验结果 | 第55-59页 |
| 3.4.1 建库用凡纳滨对虾个体病毒检测结果 | 第55页 |
| 3.4.2 ds cDNA质量检测结果 | 第55-56页 |
| 3.4.3 第一轮均一化后的琼脂糖电泳结果 | 第56页 |
| 3.4.4 第二轮均一化后的检测结果 | 第56-58页 |
| 3.4.5 鳃酵母双杂交文库的文库质量鉴定结果 | 第58-59页 |
| 3.5 讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 白斑综合症病毒囊膜蛋白诱饵菌株的构建和酵母双杂交筛选 | 第61-83页 |
| 4.1 引言 | 第61页 |
| 4.2 实验材料 | 第61-62页 |
| 4.2.1 实验试剂与材料 | 第61-62页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第62页 |
| 4.3 实验方法 | 第62-72页 |
| 4.3.1 WSSV囊膜蛋白基因的克隆 | 第62-67页 |
| 4.3.2 诱饵载体的构建 | 第67-68页 |
| 4.3.3 WSSV囊膜蛋白诱饵菌株的制备及检测 | 第68-69页 |
| 4.3.4 酵母双杂交筛选与结果分析 | 第69-72页 |
| 4.4 实验结果 | 第72-81页 |
| 4.4.1 WSSV囊膜蛋白基因的克隆 | 第72-73页 |
| 4.4.2 诱饵载体的构建 | 第73-75页 |
| 4.4.3 WSSV囊膜蛋白诱饵菌株的制备及检测 | 第75-76页 |
| 4.4.4 测序结果分析 | 第76-81页 |
| 4.5 讨论 | 第81-83页 |
| 第五章 凡纳滨对虾围食膜蛋白（LvPT）功能分析 | 第83-117页 |
| 5.1 引言 | 第83页 |
| 5.2 实验材料 | 第83-85页 |
| 5.2.1 实验试剂与材料 | 第83-84页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第84-85页 |
| 5.2.3 实验动物 | 第85页 |
| 5.3 实验方法 | 第85-105页 |
| 5.3.1 凡纳滨对虾各组织总RNA提取及LvPT的各组织表达量检测 | 第85-87页 |
| 5.3.2 LvPT与WSSV囊膜蛋白在酵母双杂交系统中的互作验证 | 第87-91页 |
| 5.3.3 昆虫表达载体构建 | 第91-95页 |
| 5.3.4 Sf9细胞培养及转染条件的优化 | 第95-97页 |
| 5.3.5 LvPT-V5和VP37-FLAG在Sf9细胞中的表达及免疫共沉淀实验（CO-IP） | 第97-99页 |
| 5.3.6 Lv PT-V5 的信号肽功能验证及几丁质结合活性检测 | 第99-100页 |
| 5.3.7 LvPT抗体制备 | 第100-101页 |
| 5.3.8 LvPT的双链RNA干扰实验与病毒拷贝数检测 | 第101-105页 |
| 5.4 实验结果 | 第105-114页 |
| 5.4.1 LvPT的各组织表达量检测 | 第105-106页 |
| 5.4.2 LvPT与WSSV囊膜蛋白在酵母双杂交系统中的相互作用 | 第106-107页 |
| 5.4.3 Sf9细胞转染条件的优化 | 第107-108页 |
| 5.4.4 LvPT-V5和VP37-FLAG的表达与免疫共沉淀 | 第108-109页 |
| 5.4.5 LvPT-V5的信号肽功能验证及几丁质结合活性检测 | 第109页 |
| 5.4.6 LvPT-V5的几丁质结合活性检测 | 第109-110页 |
| 5.4.7 LvPT抗体制备及结合特异性检测 | 第110-111页 |
| 5.4.8 LvPT双链RNA的合成及质量检测 | 第111-112页 |
| 5.4.9 LvPT双链RNA最佳干扰剂量摸索实验 | 第112-113页 |
| 5.4.10 LvPT沉默后的WSSV攻毒实验 | 第113-114页 |
| 5.5 讨论 | 第114-117页 |
| 结论 | 第117-119页 |
| 参考文献 | 第119-135页 |
| 个人简历 | 第135-136页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第136页 |
