| 致谢 | 第4-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 第一章 热胁迫响应机制和耐高温育种的研究进展 | 第16-31页 |
| 1.1 热休克反应和热休克蛋白 | 第16-19页 |
| 1.1.1 热休克蛋白 100（HSP100） | 第16-17页 |
| 1.1.2 热休克蛋白 90（HSP90） | 第17页 |
| 1.1.3 热休克蛋白 70（HSP70） | 第17-18页 |
| 1.1.4 热休克蛋白 60（HSP60）和热休克蛋白 10（HSP10） | 第18-19页 |
| 1.1.5 小分子热休克蛋白（sHSP） | 第19页 |
| 1.2 热休克反应的调控机制 | 第19-21页 |
| 1.2.1 HSF1因子的结构与功能 | 第19-20页 |
| 1.2.2 HSBP1对热胁迫反应的负调节作用 | 第20-21页 |
| 1.2.3 HSPs对热胁迫反应的负反馈调节 | 第21页 |
| 1.3 耐热性状的遗传规律和标记辅助育种 | 第21-25页 |
| 1.3.1 耐热性状的遗传规律 | 第22页 |
| 1.3.2 耐热性状的数量性状基因座 | 第22-23页 |
| 1.3.3 耐热性状标记辅助育种 | 第23-25页 |
| 1.4 刺参热胁迫响应机制和耐高温育种的研究进展 | 第25-28页 |
| 1.4.1 刺参热胁迫响应机制的研究进展 | 第25-27页 |
| 1.4.2 刺参耐高温品种选育的研究进展 | 第27-28页 |
| 1.5 本研究的目的、意义与研究思路 | 第28-30页 |
| 1.5.1 目的与意义 | 第28-29页 |
| 1.5.2 科学问题 | 第29页 |
| 1.5.3 研究内容与技术路线 | 第29-30页 |
| 1.5.4 预期成果 | 第30页 |
| 1.6 本章小结 | 第30-31页 |
| 第二章 刺参肠道对热胁迫的组织学、细胞学和HSP70蛋白的响应 | 第31-45页 |
| 2.1 前言 | 第31-32页 |
| 2.2 材料与方法 | 第32-36页 |
| 2.2.1 样品采集 | 第32页 |
| 2.2.2 石蜡切片的制作与观察 | 第32-33页 |
| 2.2.3 透射电镜切片的制作与观察 | 第33页 |
| 2.2.4 HSP70的免疫组织化学研究 | 第33-34页 |
| 2.2.5 HSP70的Western blot研究 | 第34-36页 |
| 2.2.6 数据分析 | 第36页 |
| 2.3 实验结果 | 第36-42页 |
| 2.3.1 热胁迫下刺参肠道组织形态变化 | 第36-38页 |
| 2.3.2 热胁迫下刺参肠道细胞超微结构变化 | 第38-39页 |
| 2.3.3 热胁迫下HSP70的定位表达 | 第39-41页 |
| 2.3.4 热胁迫下HSP70的定量表达 | 第41-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-43页 |
| 2.4.1 热胁迫导致刺参肠道组织退化 | 第42页 |
| 2.4.2 热胁迫诱导刺参肠道组织的细胞凋亡 | 第42页 |
| 2.4.3 热胁迫下HSP70的表达量显著升高 | 第42-43页 |
| 2.5 本章小结 | 第43-45页 |
| 第三章 刺参热胁迫下iTRAQ蛋白质组学研究 | 第45-60页 |
| 3.1 前言 | 第45-46页 |
| 3.2 材料与方法 | 第46-48页 |
| 3.2.1 样品采集 | 第46页 |
| 3.2.2 蛋白提取及浓度测定 | 第46-47页 |
| 3.2.3 蛋白消化及iTRAQ标记 | 第47页 |
| 3.2.4 SCX分离和LC-MS/MS分析 | 第47页 |
| 3.2.5 蛋白质鉴定和定量 | 第47-48页 |
| 3.2.6 Gene Ontology (GO) 和Kyoto Encyclopedia of Genes andGenomes (KEGG) 通路分析 | 第48页 |
| 3.3 实验结果 | 第48-55页 |
| 3.3.1 蛋白质数据统计分析 | 第48-49页 |
| 3.3.2 差异蛋白分析 | 第49-54页 |
| 3.3.3 GO注释和KEGG分析 | 第54-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-58页 |
| 3.4.1 组织保护和解毒 | 第55-56页 |
| 3.4.2 脂类、氨基酸和糖类代谢 | 第56-57页 |
| 3.4.3 能量的生成和利用 | 第57页 |
| 3.4.4 转录和翻译 | 第57-58页 |
| 3.4.5 细胞凋亡和增殖 | 第58页 |
| 3.4.6 其他过程 | 第58页 |
| 3.5 本章小结 | 第58-60页 |
| 第四章 刺参热胁迫响应关键基因的克隆和表达 | 第60-86页 |
| 4.1 前言 | 第60-61页 |
| 4.2 材料与方法 | 第61-66页 |
| 4.2.1 样品采集 | 第61页 |
| 4.2.2 mRNA提取 | 第61-62页 |
| 4.2.3 cDNA全长的克隆 | 第62-64页 |
| 4.2.4 全长序列的分析和进化树的构建 | 第64页 |
| 4.2.5 Real time PCR | 第64-65页 |
| 4.2.6 数据分析 | 第65-66页 |
| 4.3 实验结果 | 第66-82页 |
| 4.3.1 hsf1、hsbp1、hsp10和hsp60 cDNA全长和序列特征 | 第66-71页 |
| 4.3.2 hsf1、hsbp1、hsp10和hsp60物种间多重序列比对 | 第71-76页 |
| 4.3.3 hsf1、hsbp1、hsp10和hsp60系统进化树的构建 | 第76-79页 |
| 4.3.4 热胁迫下hsf1、hsbp1和hsp70 mRNA水平的表达变化 | 第79-81页 |
| 4.3.5 热胁迫下hsp10和hsp60的mRNA水平的表达变化 | 第81-82页 |
| 4.4 讨论 | 第82-85页 |
| 4.4.1 HSF1和HSBP1的氨基酸组成与结构 | 第82-83页 |
| 4.4.2 hsf1、hsbp1、hsp10和hsp60的组成型表达 | 第83页 |
| 4.4.3 热胁迫下hsf1和hsbp1表达变化 | 第83-84页 |
| 4.4.4 热胁迫下各HSPs mRNA表达变化 | 第84-85页 |
| 4.5 本章小结 | 第85-86页 |
| 第五章 刺参hsp90基因序列中多态性位点的筛选及其与耐热性状的关联分析 | 第86-103页 |
| 5.1 前言 | 第86-87页 |
| 5.2 材料与方法 | 第87-93页 |
| 5.2.1 样品采集 | 第87-88页 |
| 5.2.2 体壁DNA提取 | 第88-89页 |
| 5.2.3 hsp90基因序列的扩增及SNP多态性位点的筛选 | 第89-90页 |
| 5.2.4 敏感组和耐受组SNP分型 | 第90-92页 |
| 5.2.5 数据分析 | 第92-93页 |
| 5.2.6 耐高温品系和普通品系的验证 | 第93页 |
| 5.3 实验结果 | 第93-100页 |
| 5.3.1 刺参个体温度耐受性差异 | 第93-94页 |
| 5.3.2 hsp90的基因序列和外显子SNP多态性位点 | 第94-95页 |
| 5.3.3 敏感组和耐受组的SNP分型和关联分析 | 第95-98页 |
| 5.3.4 单倍型分析 | 第98-99页 |
| 5.3.5 耐高温品系和普通品系的验证 | 第99-100页 |
| 5.4 讨论 | 第100-102页 |
| 5.4.1 与刺参耐温性状相关的SNPs | 第100-101页 |
| 5.4.2 刺参hsp90序列中的三态SNP | 第101-102页 |
| 5.5 本章小结 | 第102-103页 |
| 第六章 总结与展望 | 第103-105页 |
| 6.1 总结 | 第103页 |
| 6.2 创新性 | 第103页 |
| 6.3 存在问题 | 第103页 |
| 6.4 研究展望 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-130页 |
| 作者简介 | 第130-131页 |
| 攻读学位期间的学术成果 | 第131页 |
