| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 第1章 前言 | 第13-29页 |
| 1.1 角蛋白及其应用 | 第13-16页 |
| 1.1.1 角蛋白概述 | 第13页 |
| 1.1.2 角蛋白的降解 | 第13-14页 |
| 1.1.3 角蛋白的应用 | 第14-16页 |
| 1.2 角蛋白酶概述 | 第16-19页 |
| 1.2.1 角蛋白酶概述 | 第16页 |
| 1.2.2 角蛋白酶的来源 | 第16-18页 |
| 1.2.3 角蛋白酶的分类 | 第18-19页 |
| 1.3 角蛋白酶的理化性质 | 第19-23页 |
| 1.3.1 角蛋白酶的分子量 | 第19页 |
| 1.3.2 角蛋白酶的底物特异性 | 第19-20页 |
| 1.3.3 角蛋白酶的最适反应条件及耐受性 | 第20页 |
| 1.3.4 角蛋白酶活性的抑制与促进 | 第20-21页 |
| 1.3.5 角蛋白酶的活性测定方法 | 第21-22页 |
| 1.3.6 角蛋白酶的降解机理 | 第22-23页 |
| 1.3.7 角蛋白酶的基因工程 | 第23页 |
| 1.4 角蛋白酶的应用 | 第23-27页 |
| 1.4.1 食品加工 | 第24页 |
| 1.4.2 肥料 | 第24页 |
| 1.4.3 饲料 | 第24-25页 |
| 1.4.4 制革行业 | 第25页 |
| 1.4.5 化妆品 | 第25-26页 |
| 1.4.6 医药行业 | 第26页 |
| 1.4.7 洗涤剂添加剂 | 第26-27页 |
| 1.4.8 其他 | 第27页 |
| 1.4.9 小结 | 第27页 |
| 1.5 研究目的、意义及内容 | 第27-29页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第27-28页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第28-29页 |
| 第2章 产角蛋白酶菌株的筛选及菌种鉴定 | 第29-46页 |
| 2.1 仪器与试剂 | 第29-31页 |
| 2.1.1 仪器设备 | 第29页 |
| 2.1.2 主要试剂与试剂盒 | 第29-30页 |
| 2.1.3 培养基及其配制 | 第30-31页 |
| 2.2 菌株的初筛及复筛 | 第31-32页 |
| 2.2.1 取样 | 第31页 |
| 2.2.2 菌株的分离纯化 | 第31页 |
| 2.2.3 产蛋白酶菌株的初筛 | 第31-32页 |
| 2.2.4 复筛及产角蛋白能力比较 | 第32页 |
| 2.2.5 蛋白酶酶活测定 | 第32页 |
| 2.2.6 角蛋白酶酶活测定 | 第32页 |
| 2.3 菌种鉴定 | 第32-36页 |
| 2.3.1 细菌基因组提取 | 第32-33页 |
| 2.3.2 16S rRNA基因克隆 | 第33-34页 |
| 2.3.3 琼脂糖凝胶电泳及胶回收 | 第34-35页 |
| 2.3.4 转化子测序 | 第35-36页 |
| 2.4 结果与分析 | 第36-43页 |
| 2.4.1 初筛结果 | 第36-40页 |
| 2.4.2 复筛结果 | 第40-43页 |
| 2.5 讨论 | 第43-46页 |
| 第3章 B.subtilis FJ-3-16产酶条件优化及角蛋白酶KerFJ的分离纯化 | 第46-58页 |
| 3.1 仪器与试剂 | 第46-48页 |
| 3.1.1 仪器设备 | 第46-47页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第47-48页 |
| 3.1.3 发酵培养基及配制 | 第48页 |
| 3.2 B.subtilis FJ-3-16产酶条件优化 | 第48-49页 |
| 3.2.1 种子液制备 | 第48页 |
| 3.2.2 接种量对酶活的影响 | 第48页 |
| 3.2.3 发酵时间对酶活的影响 | 第48页 |
| 3.2.4 培养温度对酶活的影响 | 第48-49页 |
| 3.2.5 pH对酶活的影响 | 第49页 |
| 3.3 角蛋白酶KerFJ的分离纯化 | 第49-53页 |
| 3.3.1 粗酶液提取及硫酸铵分级沉淀 | 第49页 |
| 3.3.2 离子交换层析 | 第49-51页 |
| 3.3.3 酶活测定及电泳检测 | 第51-52页 |
| 3.3.4 蛋白浓度的测定 | 第52-53页 |
| 3.4 结果与分析 | 第53-57页 |
| 3.4.1 发酵条件优化结果 | 第53-54页 |
| 3.4.2 硫酸铵分级沉淀结果 | 第54-55页 |
| 3.4.3 离子交换层析纯化结果 | 第55-56页 |
| 3.4.4 目标蛋白纯化结果 | 第56-57页 |
| 3.5 讨论 | 第57-58页 |
| 第4章 角蛋白酶KerFJ的酶学性质研究及应用初探 | 第58-80页 |
| 4.1 仪器与试剂 | 第58-59页 |
| 4.1.1 仪器设备 | 第58页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第58-59页 |
| 4.2 角蛋白酶KerFJ的理化性质 | 第59-63页 |
| 4.2.1 底物特异性 | 第59-60页 |
| 4.2.2 最适反应温度 | 第60-61页 |
| 4.2.3 最适反应pH | 第61页 |
| 4.2.4 温度稳定性 | 第61页 |
| 4.2.5 pH稳定性 | 第61页 |
| 4.2.6 酶动力学研究 | 第61-62页 |
| 4.2.7 角蛋白酶KerFJ的转膜及N端测序 | 第62-63页 |
| 4.3 角蛋白酶KerFJ的耐受性研究 | 第63-64页 |
| 4.3.1 抑制剂对酶活的影响 | 第63页 |
| 4.3.2 还原剂对酶活的影响 | 第63页 |
| 4.3.3 氧化剂对酶活的影响 | 第63页 |
| 4.3.4 去垢剂对酶活的影响 | 第63-64页 |
| 4.3.5 金属离子对酶活的影响 | 第64页 |
| 4.3.6 盐浓度对酶活的影响 | 第64页 |
| 4.3.7 商品化洗衣液对酶活的影响 | 第64页 |
| 4.4 角蛋白酶KerFJ的生物降解及应用初探 | 第64-66页 |
| 4.4.1 羽毛及羊毛降解 | 第64-65页 |
| 4.4.2 脱毛实验 | 第65页 |
| 4.4.3 去污效果研究 | 第65-66页 |
| 4.4.4 电镜扫描 | 第66页 |
| 4.5 结果与分析 | 第66-78页 |
| 4.5.1 底物特异性 | 第66页 |
| 4.5.2 最适反应温度 | 第66-67页 |
| 4.5.3 最适反应pH | 第67-68页 |
| 4.5.4 角蛋白酶KerFJ的温度稳定性 | 第68页 |
| 4.5.5 角蛋白酶KerFJ的pH稳定性 | 第68-69页 |
| 4.5.6 角蛋白酶KerFJ酶动力学研究 | 第69-70页 |
| 4.5.7 抑制剂、还原剂、氧化剂、去垢剂对角蛋白酶KerFJ酶活性的影响 | 第70-72页 |
| 4.5.8 金属离子对角蛋白酶KerFJ酶活性的影响 | 第72-73页 |
| 4.5.9 盐浓度对角蛋白酶KerFJ酶活性的影响 | 第73页 |
| 4.5.10 商品化洗衣液对角蛋白酶KerFJ酶活性的影响 | 第73-74页 |
| 4.5.11 角蛋白酶KerFJ的生物降解结果 | 第74-75页 |
| 4.5.12 角蛋白酶KerFJ的脱毛能力结果 | 第75-76页 |
| 4.5.13 角蛋白酶KerFJ的去污能力结果 | 第76-77页 |
| 4.5.14 电镜扫描结果 | 第77-78页 |
| 4.6 讨论 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-87页 |
| 研究生就读期间发表论文及专利 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第90页 |
