| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 图目录 | 第9-10页 |
| 表目录 | 第10-11页 |
| 缩写对比表 | 第11-12页 |
| 第一部分 引言 | 第12-22页 |
| ·铜绿假单胞菌简介 | 第12-18页 |
| ·铜绿假单胞菌特征 | 第12-13页 |
| ·铜绿假单胞菌的致病性 | 第13-15页 |
| ·铜绿假单胞菌的耐药性 | 第15-18页 |
| ·抗生素 | 第18-21页 |
| ·抗生素的分类 | 第19-20页 |
| ·常用抗生素的作用机制 | 第20-21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| 第二部分 实验材料和方法 | 第22-40页 |
| ·试验材料 | 第22-25页 |
| ·菌株和质粒 | 第22-23页 |
| ·培养基及溶液的配置 | 第23-24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·仪器 | 第25页 |
| ·抗生素使用浓度 | 第25页 |
| ·基本实验方法 | 第25-40页 |
| ·质粒的提取 | 第25-26页 |
| ·细菌基因组DNA的制备 | 第26-27页 |
| ·质粒或DNA片段的酶切 | 第27页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR)的反应体系 | 第27页 |
| ·DNA或PCR片段的纯化 | 第27-28页 |
| ·粘性末端的连接 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·铜绿假单胞菌感受态细胞的快速制备 | 第28-29页 |
| ·电转化 | 第29页 |
| ·突变体PAO1(△PA2800)的构建 | 第29-34页 |
| ·构建三亲株杂交供体菌质粒 | 第30-32页 |
| ·三亲株杂交构建突变体 | 第32-34页 |
| ·PA2800的耐药性测定 | 第34-35页 |
| ·PA2800在固体LB中耐药性变化 | 第34页 |
| ·PA2800在液体LB中MIC的变化 | 第34-35页 |
| ·PA2800在低于抑制浓度抗生素条件下的表达检测 | 第35-37页 |
| ·构建启动子报道子载体 | 第35-36页 |
| ·低于抑制浓度抗生素条件下的发光测定 | 第36-37页 |
| ·PA2800的致病性测定 | 第37-38页 |
| ·果蝇感染实验 | 第37-38页 |
| ·相关因子毒性在突变体里的表达 | 第38页 |
| ·PAO1(△PA2800)与PAO1的运动性观察 | 第38-39页 |
| ·泳动和丛动 | 第38-39页 |
| ·蹭行运动 | 第39页 |
| ·PAO1(△PA2800)与PAO1生物膜的测定 | 第39-40页 |
| 第三部分 结果 | 第40-54页 |
| ·突变体PAO1(△PA2800)的构建 | 第40-41页 |
| ·PA2800与耐药性的关系 | 第41-46页 |
| ·PAO1(△PA2800)在固体LB中的耐药性 | 第41-42页 |
| ·PAO1(△PA2800)在液体LB中的耐药性 | 第42-46页 |
| ·抗生素对PA2800基因表达的影响 | 第46-49页 |
| ·基因表达载体的构建 | 第46页 |
| ·次抑制浓度抗生素条件下PA2800的表达情况 | 第46-49页 |
| ·PA2800与致病性的关系 | 第49-51页 |
| ·PAO1(△PA2800)与PAO1相比的致病性变化 | 第49页 |
| ·PAO相关毒性因子在PAO1(△PA2800)与PAO1中的表达情况 | 第49-51页 |
| ·PAO1(△PA2800)与PAO1相比的运动性变化 | 第51-52页 |
| ·PAO1(△PA2800)与PAO1在生物膜生成量上的比较 | 第52-54页 |
| 第四部分 讨论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
