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转录因子C/EBPβ功能结构域LIP原核表达、纯化与功能探讨

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 绪论第7-24页
   ·基因表达调控第7-11页
     ·转录因子的功能第7-8页
     ·转录因子的调节机制第8-10页
     ·转录因子的结构第10-11页
   ·C/EBP的研究概况第11-17页
     ·C/EBP的发现第12页
     ·C/EBPs的结构特点第12-14页
     ·C/EBPs的组成与分布第14-15页
     ·C/EBPs的功能第15-17页
   ·C/EBPβ的生物学功能第17-20页
     ·参与细胞的分化、增殖第18页
     ·参与肿瘤细胞的发生与凋亡第18页
     ·参与炎症和急性期反应第18-19页
     ·参与能量代谢第19页
     ·C/EBPβ的磷酸化第19-20页
     ·其他功能第20页
   ·生物核磁共振第20-21页
   ·研究目的和意义第21-24页
第二章 实验材料第24-27页
   ·实验仪器第24-25页
   ·菌株和质粒第25页
   ·酶及主要试剂第25页
   ·培养基第25-27页
第三章 实验结果与分析第27-90页
   ·pGEX-6P-1/LIP表达及纯化条件的摸索第27-42页
     ·PSP的表达与纯化第27-34页
     ·pGEX-6P-1/LIP的表达与纯化第34-42页
   ·pET-28a、pSJ2、pSMT3/LIPwt重组质粒的构建及表达纯化条件的摸索第42-64页
     ·PCR第42-44页
     ·双酶切反应第44-45页
     ·酶切回收后的PCR产物与载体连接第45页
     ·连接产物转化第45页
     ·重组子鉴定第45-46页
     ·质粒转化第46页
     ·目的蛋白表达条件和可溶性条件的筛选第46-47页
     ·目的蛋白的大量表达和纯化条件摸索第47-64页
   ·pET-28a、pSJ2、pSMT3/LIPM重组质粒的构建及表达纯化条件的摸索第64-69页
     ·PCR第64-65页
     ·目的蛋白表达条件和可溶性条件的筛选第65-66页
     ·目的蛋白的大量表达和纯化第66-69页
   ·LIP蛋白的表征第69-80页
     ·质谱分析第69-71页
     ·LIPwt的磷酸化第71-73页
     ·NMR实验及~1H-~(15)N HSQC谱图的分析第73-80页
   ·LIP与DNA的相互作用研究第80-90页
     ·凝胶迁移实验第80-82页
     ·~1H-~(15)N HSQC实验第82-90页
总结第90-92页
参考文献第92-99页
附录第99-107页
攻读硕士学位期间取得的科研成果第107-108页
致谢第108-109页

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