摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-24页 |
1.1 禽致病性大肠杆菌研究进展 | 第14-17页 |
1.1.1 禽大肠杆菌病 | 第14页 |
1.1.2 禽致病性大肠杆菌的多样性 | 第14页 |
1.1.3 禽致病性大肠杆菌的致病机制 | 第14-15页 |
1.1.4 禽致病性大肠杆菌毒力因子研究进展 | 第15-16页 |
1.1.5 禽致病性大肠杆菌的防治措施 | 第16-17页 |
1.2 密度感应系统研究进展 | 第17-19页 |
1.2.1 密度感应概述 | 第17-18页 |
1.2.2 密度感应系统分类 | 第18-19页 |
1.3 LUXS/AI-2 型密度感应系统 | 第19-24页 |
1.3.1 AI-2 的合成 | 第19-20页 |
1.3.2 AI-2 内化通路的研究进展 | 第20-23页 |
1.3.3 AI-2 信号分子的应用 | 第23-24页 |
第二章 大肠杆菌MG1655Δ lsrB缺失株构建及AI-2 内化特性的检测 | 第24-31页 |
2.1 材料 | 第24-25页 |
2.1.1 菌株及质粒 | 第24页 |
2.1.2 主要试剂及培养基 | 第24-25页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第25页 |
2.2 方法 | 第25-27页 |
2.2.1 PCR引物设计 | 第25-26页 |
2.2.2 MG1655Δlsr缺失株的构建 | 第26-27页 |
2.2.3 缺失株内化外源AI-2 能力检测试验 | 第27页 |
2.3 结果 | 第27-29页 |
2.3.1.MG1655ΔlsrB突变株的鉴定 | 第27-28页 |
2.3.2 MG1655与MG1655ΔlsrB内化外源性AI-2 的检测 | 第28-29页 |
2.4 讨论 | 第29-31页 |
第三章 禽致病性大肠杆菌lsr操纵子的检测 | 第31-39页 |
3.1 材料与方法 | 第31-32页 |
3.1.1 菌株 | 第31页 |
3.1.2 主要试剂 | 第31-32页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第32页 |
3.2 方法 | 第32-34页 |
3.2.1 PCR引物设计 | 第32-33页 |
3.2.2 菌株培养 | 第33页 |
3.2.3 PCR扩增禽致病性大肠杆菌不同血清型中的lsr操纵子基因 | 第33-34页 |
3.3 结果 | 第34-37页 |
3.3.1 PCR检测APEC的lsr操纵子 | 第34页 |
3.3.2 lsr操纵子基因在59株禽致病性大肠杆菌中分布统计 | 第34-37页 |
3.4 讨论 | 第37-39页 |
第四章 禽致病性大肠杆菌LsrB蛋白与AI-2 的结合活性验证 | 第39-48页 |
4.1 材料 | 第39-40页 |
4.1.1 菌株 | 第39页 |
4.1.2 主要试剂及培养基 | 第39页 |
4.1.3 主要仪器设备 | 第39-40页 |
4.2 方法 | 第40-43页 |
4.2.1 LsrB蛋白表达载体的构建 | 第40-41页 |
4.2.2 LsrB蛋白表达 | 第41-42页 |
4.2.3 LsrB蛋白大量表达,纯化 | 第42页 |
4.2.4 LsrB重组蛋白与AI-2 结合活性验证 | 第42-43页 |
4.3 结果 | 第43-46页 |
4.3.1 pCold-lsrB载体鉴定 | 第43-44页 |
4.3.2 LsrB重组蛋白的表达、可溶性分析及纯化 | 第44-45页 |
4.3.3 LsrB重组蛋白与AI-2 结合的活性验证 | 第45-46页 |
4.4 讨论 | 第46-48页 |
第五章 lsr操纵子缺失及生物学特性分析 | 第48-55页 |
5.1 材料 | 第48-49页 |
5.1.1 菌株及质粒 | 第48页 |
5.1.2 主要试剂及培养基 | 第48页 |
5.1.3 主要仪器设备 | 第48-49页 |
5.2 方法 | 第49-50页 |
5.2.1 PCR引物设计 | 第49页 |
5.2.2 APEC94 lsr操纵子缺失株的构建 | 第49-50页 |
5.2.3 APEC94及APEC94Δlsr(Cm)生长曲线测定 | 第50页 |
5.2.4 生物被膜形成能力检测 | 第50页 |
5.2.5 APEC94野生株、APEC94Δlsr(Cm)缺失株半数致死量LD50的检测 | 第50页 |
5.2.6 体内分布 | 第50页 |
5.3 结果 | 第50-53页 |
5.3.1 APEC94Δlsr突变株的鉴定 | 第50-51页 |
5.3.2 生长曲线测定 | 第51-52页 |
5.3.3 生物被膜形成能力检测 | 第52页 |
5.3.4 APEC94野生株、APEC94Δlsr(Cm)缺失株LD50的测定 | 第52-53页 |
5.3.5 体内分布 | 第53页 |
5.4 讨论 | 第53-55页 |
第六章 全文结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简历 | 第64页 |