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水貂阿留申病毒抗体ELISA检测方法的建立及应用

摘要第6-7页
Abstract第7页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-19页
    1.1 病原学特征第12-13页
    1.2 主要蛋白第13-14页
        1.2.1 结构蛋白第13-14页
        1.2.2 非结构蛋白第14页
    1.3 流行病学第14-15页
    1.4 致病机理第15页
    1.5 临床症状及病理变化第15页
    1.6 诊断第15-17页
        1.6.1 病原学诊断第16页
        1.6.2 血清学诊断第16-17页
        1.6.3 分子生物学诊断第17页
    1.7 预防和控制第17页
    1.8 目的和意义第17-19页
第二章 水貂阿留申病毒分离株序列分析第19-28页
    2.1 材料第19页
        2.1.1 克隆载体、菌株和毒株第19页
        2.1.2 酶和试剂第19页
    2.2 方法第19-22页
        2.2.1 病毒DNA的提取第19页
        2.2.2 引物设计第19-20页
        2.2.3 病毒PCR鉴定第20页
        2.2.4 病毒基因克隆与拼接第20-21页
        2.2.5 序列分析和进化树构建第21-22页
    2.3 结果第22-26页
        2.3.1 病毒的PCR鉴定结果第22-23页
        2.3.2 编码区基因序列分析第23-24页
        2.3.3 结构蛋白VP2生物信息学分析第24-26页
    2.4 讨论第26-28页
第三章 水貂阿留申病毒VP2332-452蛋白的原核表达与纯化第28-36页
    3.1 材料第28页
        3.1.1 毒株第28页
        3.1.2 载体和菌株第28页
        3.1.3 主要试剂第28页
        3.1.4 主要仪器第28页
    3.2 方法第28-31页
        3.2.1 引物设计第28-29页
        3.2.2 目的基因的扩增与纯化第29页
        3.2.3 目的基因与pMAL-c2x载体的双酶切第29页
        3.2.4 目的基因与pMAL-c2x载体连接第29-30页
        3.2.5 连接产物的转化与摇菌第30页
        3.2.6 重组质粒的提取与鉴定第30页
        3.2.7 融合蛋白的原核表达第30-31页
        3.2.8 蛋白质免疫印迹(Western blotting)鉴定融合蛋白第31页
        3.2.9 融合蛋白的纯化第31页
    3.3 结果第31-34页
        3.3.1 水貂阿留申病毒VP2994-1356基因的扩增结果第31-32页
        3.3.2 重组质粒的构建和鉴定结果第32页
        3.3.3 融合蛋白的表达结果第32-33页
        3.3.4 Western blotting鉴定结果第33-34页
        3.3.5 融合蛋白的纯化结果第34页
    3.4 讨论第34-36页
第四章 ELISA检测方法的建立及应用第36-45页
    4.1 材料第36页
        4.1.1 主要试剂第36页
        4.1.2 主要仪器第36页
        4.1.3 待检血清第36页
    4.2 方法第36-39页
        4.2.1 水貂阿留申病毒抗体ELISA检测方法的操作步骤第36页
        4.2.2 ELISA检测条件的优化第36-37页
        4.2.3 阴阳性临界值的确定第37页
        4.2.4 特异性试验第37页
        4.2.5 敏感性试验第37-38页
        4.2.6 重复性试验第38页
        4.2.7 比对试验第38-39页
        4.2.8 临床样品的检测第39页
    4.3 结果第39-43页
        4.3.1 ELISA检测条件优化第39-41页
        4.3.2 阴阳性临界值第41页
        4.3.3 特异性试验结果第41-42页
        4.3.4 敏感性试验结果第42页
        4.3.5 重复性试验结果第42页
        4.3.6 比对试验结果第42-43页
        4.3.7 临床样品检测结果第43页
    4.4 讨论第43-45页
第五章 全文结论第45-46页
参考文献第46-51页
附录第51-58页
致谢第58-59页
作者简历第59页

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