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小麦醇溶蛋白和赤霉病抗性研究

摘要第1-13页
Abstract第13-17页
第一章 文献综述第17-29页
   ·小麦及其近缘属种第17-19页
     ·小麦的起源和进化第17-18页
     ·小麦近缘属种资源第18-19页
   ·醇溶蛋白第19-25页
     ·分类第19-20页
     ·遗传多样性第20页
     ·醇溶蛋白结构和氨基酸组成分析第20-22页
     ·醇溶蛋白与小麦品质的关系第22-24页
     ·醇溶蛋白基因的进化第24-25页
   ·赤霉病抗病机理研究第25-28页
     ·赤霉病的危害第25-26页
     ·赤霉病的侵染和防治第26-27页
     ·植物激素在抗病反应中的作用第27-28页
   ·立体依据及研究内容第28-29页
第二章 α-醇溶蛋白基因的分离和鉴定第29-49页
   ·前言第29-30页
   ·材料与方法第30-35页
     ·供试材料第30页
     ·DNA、RNA的提取和cDNA的合成第30-31页
     ·引物设计和PCR扩增第31-32页
     ·感受态细胞的制备第32页
     ·转化大肠杆菌第32页
     ·筛选阳性克隆第32-33页
     ·序列分析第33页
     ·α-醇溶蛋白基因的原核表达第33-34页
     ·种子储藏蛋白的提取第34页
     ·SDS-PAGE分析第34-35页
     ·目的蛋白条带的质谱检测第35页
   ·结果与分析第35-45页
     ·野生二粒小麦α-醇溶蛋白基因的序列分析第35-38页
       ·一级结构分析第36-38页
       ·氨基酸组成分析第38页
     ·新型α-醇溶蛋白基因的鉴定第38-45页
       ·一级结构分析第40-42页
       ·新型α-醇溶蛋白基因的体外表达第42-43页
       ·种子内新型α-醇溶蛋白的鉴定第43-44页
       ·聚类分析第44-45页
   ·讨论第45-49页
第三章 6D染色体特异的α-醇溶蛋白基因SNP标记开发及其应用第49-64页
   ·前言第49-50页
   ·材料与方法第50-53页
     ·植物材料及DNA的提取第50页
     ·SNP标记引物设计第50-52页
     ·SNP标记引物的验证第52-53页
   ·结果与分析第53-62页
     ·序列分析第53-56页
     ·SNP标记在中国春中的染色体定位第56页
     ·中国春缺失的SNP标记的发掘第56页
     ·SNP标记染色体定位的确认第56页
     ·六倍体小麦Gli-D2位点的多态性第56-59页
     ·人工合成六倍体小麦及其亲本Gli-D2位点的多态性第59-61页
     ·SNP对应的氨基酸变化第61-62页
   ·讨论第62-64页
第四章 γ-醇溶蛋白基因序列分析第64-89页
   ·前言第64-65页
   ·材料与方法第65-67页
     ·植物材料及DNA的提取第65页
     ·引物设计第65页
     ·γ-醇溶蛋白基因的克隆第65-66页
     ·序列分析第66页
     ·氨基酸组成分析第66-67页
     ·乳糜泻抗原分析第67页
   ·结果与分析第67-86页
     ·基因多样性第68-69页
     ·基因重组和连锁不平衡第69-70页
     ·重复区第70页
     ·γ-醇溶蛋白基因亲缘关系分析第70-81页
     ·半胱氨酸和蛋白分类第81-82页
     ·氨基酸组成分析第82-85页
     ·乳糜泻抗原表位第85-86页
   ·讨论第86-89页
     ·序列多样性第86-87页
     ·γ-醇溶蛋白基因家族的进化第87页
     ·基因分类第87-88页
     ·营养品质第88页
     ·育种展望第88-89页
第五章 新型γ-醇溶蛋白基因的分离和鉴定第89-101页
   ·前言第89页
   ·材料与方法第89-91页
     ·供试材料第89页
     ·DNA、RNA的提取和cDNA的合成第89-90页
     ·新型γ-醇溶蛋白基因的克隆第90页
     ·序列分析第90-91页
     ·新型γ-醇溶蛋白基因的原核表达第91页
     ·种子储藏蛋白的提取、SDS-PAGE和质谱分析第91页
   ·结果与分析第91-97页
     ·新型γ-醇溶蛋白基因的序列分析第91-94页
     ·新型γ-醇溶蛋白基因的体外表达第94-95页
     ·种子内新型γ-醇溶蛋白的鉴定第95页
     ·系统进化分析第95-97页
   ·讨论第97-101页
     ·新型γ-醇溶蛋白的特征第97-98页
     ·新型γ-醇溶蛋白的起源第98页
     ·醇溶蛋白的进化第98-101页
第六章 α-和γ-醇溶蛋白基因多样性和进化研究第101-114页
   ·前言第101-102页
   ·材料与方法第102-104页
     ·植物材料及基因克隆第102页
     ·序列分析第102-104页
   ·结果与分析第104-111页
     ·α -醇溶蛋白基因第104-107页
     ·γ-醇溶蛋白基因第107-110页
     ·半胱氨酸和基因分类第110-111页
   ·讨论第111-114页
第七章 水杨酸与F. graminearum相互作用关系研究第114-138页
   ·前言第114-115页
   ·材料与方法第115-120页
     ·植物材料及生长条件第115页
     ·F. graminearum菌株及培养条件第115-117页
     ·培养基内DON含量的测定第117页
     ·水杨酸含量的测定第117页
     ·穗部接种和病情鉴定第117-118页
     ·基因表达分析第118-120页
     ·统计学分析第120页
   ·结果与分析第120-135页
     ·水杨酸对F. graminearum的直接作用第120-130页
     ·水杨酸对小麦赤霉病抗性的影响第130-135页
   ·讨论第135-138页
第八章 植物激素调控F. graminearum侵染小麦的作用研究第138-168页
   ·前言第138-140页
   ·材料与方法第140-145页
     ·植物材料及生长条件第140页
     ·F. graminearum菌株及培养条件第140-141页
     ·穗部接种和病情鉴定第141页
     ·施加外源植物激素第141页
     ·基因表达分析第141-143页
     ·植物激素合成基因和信号转导途径基因的确认第143页
     ·植物激素含量的测定第143页
     ·DON含量的测定第143页
     ·序列分析和引物设计第143-144页
     ·BSMV γ重组载体的构建第144页
     ·病毒RNA的体外转录和接种第144-145页
     ·统计学分析第145页
   ·结果与分析第145-164页
     ·F. graminearum侵染改变穗子内源植物激素的含量第145-147页
     ·F. graminearum在PDB培养基上合成的植物激素第147页
     ·小麦穗部的激素网络第147-149页
     ·植物激素对F. graminearum的直接作用第149-154页
     ·植物激素对赤霉病可见症状的影响第154-161页
     ·施加外源植物激素对穗子内F. graminearum毒性的影响第161-163页
     ·下调JA和ABA合成途径关键基因的表达量改变赤霉病抗性水平第163-164页
   ·讨论第164-168页
参考文献第168-185页
主要创新点第185-186页
致谢第186-188页
在读期间已发表和待发表论文第188页

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