| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 目录 | 第11-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-36页 |
| 1 南方水稻黑条矮缩病毒的研究进展 | 第15-21页 |
| 1.1 寄主范围、传播介体及传播方式 | 第15-16页 |
| 1.2 病害症状和分布 | 第16-17页 |
| 1.3 分子生物学特性 | 第17-18页 |
| 1.4 SRBSDV检测技术的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.4.1 生物学检测方法 | 第18页 |
| 1.4.2 电镜观测 | 第18-19页 |
| 1.4.3 血清学方法 | 第19页 |
| 1.4.4 分子生物学方法 | 第19-20页 |
| 1.4.5 不同检测方法的比较 | 第20页 |
| 1.5 防治策略 | 第20-21页 |
| 2 中国小麦花叶病毒的研究进展 | 第21-27页 |
| 2.1 传毒介体、症状和分布 | 第21-22页 |
| 2.2 病毒粒子形态和理化性质 | 第22-23页 |
| 2.3 分子生物学特性 | 第23-24页 |
| 2.4 CWMV的检测技术 | 第24-26页 |
| 2.4.1 生物学检测方法 | 第25页 |
| 2.4.2 电镜观测 | 第25页 |
| 2.4.3 血清学方法 | 第25-26页 |
| 2.4.4 分子生物学方法 | 第26页 |
| 2.5 防治策略 | 第26-27页 |
| 3 单克隆抗体技术及其在植物病毒学中的应用 | 第27-36页 |
| 3.1 抗体的基本结构及其特性 | 第28-29页 |
| 3.2 单克隆抗体技术 | 第29-31页 |
| 3.2.1 杂交瘤技术基本原理 | 第29-31页 |
| 3.2.2 杂交瘤技术的基本流程 | 第31页 |
| 3.3 单克隆抗体在植物病毒学中的应用 | 第31-36页 |
| 3.3.1 病毒病害的诊断与检测 | 第32-33页 |
| 3.3.2 病毒株系鉴定及分离物分型 | 第33页 |
| 3.3.3 病毒蛋白抗原表位分析 | 第33页 |
| 3.3.4 作为探针分析病毒基因产物的功能 | 第33-34页 |
| 3.3.5 其他方面的应用 | 第34-36页 |
| 第二章 南方水稻黑条矮缩病毒单克隆抗体的制备及应用技术 | 第36-58页 |
| 1 材料与方法 | 第37-49页 |
| 1.1 病毒、培养基和抗体 | 第37页 |
| 1.2 抗原的制备 | 第37页 |
| 1.3 单克隆抗体的制备 | 第37-40页 |
| 1.3.1 小鼠免疫 | 第37-38页 |
| 1.3.2 细胞融合与培养 | 第38页 |
| 1.3.3 杂交瘤细胞的单克隆化及扩增 | 第38页 |
| 1.3.4 杂交瘤细胞株的保存和复苏 | 第38-39页 |
| 1.3.5 腹水抗体制备及纯化 | 第39页 |
| 1.3.6 腹水抗体效价的测定 | 第39-40页 |
| 1.3.7 单克隆抗体类型及亚类鉴定 | 第40页 |
| 1.4 Western blot分析单抗的特异性 | 第40-44页 |
| 1.4.1 SDS-PAGE | 第40-42页 |
| 1.4.2 半干式电转移 | 第42-43页 |
| 1.4.3 Western blot | 第43-44页 |
| 1.5 用制备的抗体建立dot-ELISA测定水稻和稻飞虱中的SRBSDV | 第44-46页 |
| 1.5.1 dot-ELISA检测样品的核心步骤 | 第44-45页 |
| 1.5.2 dot-ELISA测定单抗的特异性 | 第45页 |
| 1.5.3 dot-ELISA检测灵敏度测定 | 第45页 |
| 1.5.4 dot-ELISA方法田间检测的应用 | 第45-46页 |
| 1.6 dot-ELISA检测试剂盒的制备和应用 | 第46-49页 |
| 2 结果分析 | 第49-56页 |
| 2.1 抗原的合成 | 第49页 |
| 2.2 杂交瘤细胞的融合、筛选和克隆 | 第49-50页 |
| 2.3 腹水抗体制备、效价测定及抗体亚类鉴定 | 第50页 |
| 2.4 Western blot分析单抗的特异性 | 第50-51页 |
| 2.5 dot-ELISA的建立及其特异性和灵敏度分析 | 第51-53页 |
| 2.6 dot-ELISA的田间样品检测 | 第53-55页 |
| 2.7 dot-ELISA试剂盒的制备及推广 | 第55-56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| 第三章 中国小麦花叶病毒单克隆抗体的制备及其检测应用 | 第58-70页 |
| 1 材料和方法 | 第58-62页 |
| 1.1 病毒、培养基和抗体 | 第58-59页 |
| 1.2 中国小麦黄花叶病毒的提纯 | 第59页 |
| 1.3 单克隆抗体的制备 | 第59-60页 |
| 1.4 腹水制备和抗体纯化 | 第60页 |
| 1.5 抗体类型及亚类鉴定和腹水效价测定 | 第60页 |
| 1.6 Western blot分析单抗的特异性 | 第60页 |
| 1.7 用制备的单抗建立测定CWMV的酶联免疫吸附测定法(ELISA) | 第60-62页 |
| 1.7.1 ACP-ELISA方法检测小麦中CWMV | 第60-61页 |
| 1.7.2 dot-ELISA检测小麦中CWMV | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-68页 |
| 2.1 中国小麦花叶病毒的提纯及抗原制备 | 第62-63页 |
| 2.2 杂交瘤细胞的融合、筛选和克隆 | 第63页 |
| 2.3 腹水抗体制备、效价测定及抗体亚类鉴定 | 第63-64页 |
| 2.4 Western blot分析单抗的特异性 | 第64页 |
| 2.5 ACP-ELISA的建立及其特异性和灵敏度分析 | 第64-66页 |
| 2.6 dot-ELISA的建立及其特异性和灵敏度分析 | 第66-67页 |
| 2.7 dot-ELISA的田间样品检测 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 附录A 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第78-80页 |
| 附录B 常用缓冲液及培养基配方 | 第80-85页 |
| 在学期间所取得的科研成果 | 第85页 |
