摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-23页 |
1.1.Rac1的特点 | 第12-13页 |
1.2 Rac1相关的信号通路 | 第13-14页 |
1.3 Rac1的生物学作用 | 第14-16页 |
1.3.1 Rac1与细胞运动 | 第14页 |
1.3.2 Rac1与细胞增殖 | 第14-15页 |
1.3.3 Rac1与血管生成 | 第15-16页 |
1.4 Rac1参与免疫调节 | 第16-18页 |
1.4.1 Rac1与T细胞 | 第16-17页 |
1.4.2 Rac1与巨噬细胞 | 第17-18页 |
1.5 Rac1与疾病 | 第18-21页 |
1.5.1 Rac1与哮喘 | 第18-20页 |
1.5.2 Rac1与肿瘤 | 第20页 |
1.5.3 Rac1与其他疾病 | 第20-21页 |
1.6 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第21-23页 |
1.6.1 研究目的 | 第21页 |
1.6.2 研究方法 | 第21页 |
1.6.3 实验设计方案 | 第21-22页 |
1.6.4 研究意义 | 第22-23页 |
第二章 pCDNA3.1-Rac1表达载体的构建 | 第23-42页 |
2.1 实验仪器和材料 | 第23-26页 |
2.1.1 实验仪器 | 第23-24页 |
2.1.2 实验材料 | 第24页 |
2.1.3 实验试剂 | 第24-26页 |
2.1.4 主要溶液配制 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-36页 |
2.2.1 细胞培养 | 第26-27页 |
2.2.2 pCDNA3.1-Rac1质粒的构建 | 第27-33页 |
2.2.3 细胞质粒转染与si RNA干扰 | 第33页 |
2.2.4 引物的设计与合成 | 第33-34页 |
2.2.5 实时荧光定量PCR | 第34页 |
2.2.6 细胞蛋白的提取 | 第34-35页 |
2.2.7 Western blot检测Rac1蛋白的表达 | 第35-36页 |
2.2.8 统计学分析 | 第36页 |
2.3 实验结果 | 第36-40页 |
2.3.1 小鼠Rac1全长基因的扩增 | 第36-37页 |
2.3.2 重组质粒的酶切鉴定结果 | 第37-38页 |
2.3.3 重组质粒的测序鉴定结果 | 第38-39页 |
2.3.4 qRT-PCR检测RAW264.7 细胞转染及干扰后Rac1 mRNA的表达情况 | 第39-40页 |
2.3.5 Western blot检测RAW264.7 细胞转染及干扰后Rac1蛋白的表达情况 | 第40页 |
2.4 讨论 | 第40-42页 |
第三章 Rac1对RAW264.7 细胞生物学作用的影响 | 第42-53页 |
3.1 实验仪器和材料 | 第42-44页 |
3.1.1 实验仪器 | 第42-43页 |
3.1.2 实验材料 | 第43页 |
3.1.3 实验试剂 | 第43-44页 |
3.1.4 主要溶液配制 | 第44页 |
3.2 实验方法 | 第44-46页 |
3.2.1 细胞培养 | 第44页 |
3.2.2 细胞转染 | 第44页 |
3.2.3 CCK-8 检测细胞增殖情况 | 第44-45页 |
3.2.4 Transwell迁移实验 | 第45页 |
3.2.5 流式细胞术分析CD80、CD86、MHCⅡ表面分子 | 第45页 |
3.2.6 细胞RNA的提取及逆转录 | 第45页 |
3.2.7 引物设计与合成 | 第45页 |
3.2.8 qRT-PCR检测细胞中IL-1β、IL-6、IL-33 和TNF-α 的mRNA表达水平 | 第45页 |
3.2.9 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清中细胞因子水平343.2.10 统计学分析 | 第45-46页 |
3.3 实验结果 | 第46-51页 |
3.3.1 Rac1对RAW264.7 细胞增殖的影响 | 第46-47页 |
3.3.2 Rac1对RAW264.7 细胞迁移的影响 | 第47-48页 |
3.3.3 Rac1对RAW264.7 抗原提呈功能的影响 | 第48-49页 |
3.3.4 Rac1对RAW264.7 细胞分泌的细胞因子mRNA水平的影响 | 第49-50页 |
3.3.5 Rac1对RAW264.7 细胞分泌的细胞因子蛋白水平的影响 | 第50-51页 |
3.4 讨论 | 第51-53页 |
第四章 主要结论与展望 | 第53-54页 |
4.1 主要结论 | 第53页 |
4.2 展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读硕士期间参与发表的文章 | 第63页 |