摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第13-22页 |
1.1 糖尿病心肌病的概念 | 第13页 |
1.2 糖尿病心肌病心肌结构和功能的改变 | 第13-15页 |
1.2.1 左心室肥大 | 第13-14页 |
1.2.2 舒张功能障碍 | 第14页 |
1.2.3 收缩功能障碍 | 第14-15页 |
1.3 糖尿病心肌病的发病机制 | 第15-17页 |
1.3.1 钙离子调控损伤 | 第15页 |
1.3.2 心肌内代谢改变 | 第15-16页 |
1.3.3 细胞外基质重构 | 第16页 |
1.3.4 内皮功能障碍 | 第16-17页 |
1.3.5 线粒体功能障碍 | 第17页 |
1.4 氧化应激和糖尿病心肌病 | 第17-18页 |
1.5 本课题研究的意义及研究内容 | 第18-22页 |
1.5.1 研究意义 | 第18-20页 |
1.5.2 研究内容 | 第20-21页 |
1.5.3 创新点 | 第21-22页 |
第2章 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠心脏结构和功能保护作用 | 第22-50页 |
2.1 实验材料 | 第22-26页 |
2.1.1 实验动物 | 第22页 |
2.1.2 药品与试剂 | 第22-24页 |
2.1.3 实验仪器 | 第24-25页 |
2.1.4 药品及溶液配制 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-37页 |
2.2.1 建立STZ糖尿病小鼠模型 | 第26页 |
2.2.2 实验分组及给药 | 第26-27页 |
2.2.3 测量空腹血糖、体重、摄食量和饮水量 | 第27页 |
2.2.4 超声心动检测心功能 | 第27页 |
2.2.5 采集血液和心肌组织样本 | 第27-28页 |
2.2.6 试剂盒测定血清心肌三酶水平 | 第28-30页 |
2.2.6.1 测定乳酸脱氢酶(LDH)活力 | 第28-29页 |
2.2.6.2 测定肌酸激酶(CK)活力 | 第29-30页 |
2.2.6.3 测定谷草转氨酶(AST/GOT)活力 | 第30页 |
2.2.7 试剂盒测定心肌组织匀浆抗氧化酶活力 | 第30-34页 |
2.2.7.1 制备心肌组织匀浆 | 第30-31页 |
2.2.7.2 测定超氧化物歧化酶(SOD)活力 | 第31-32页 |
2.2.7.3 测定过氧化氢酶(CAT)活力 | 第32页 |
2.2.7.4 测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力 | 第32-34页 |
2.2.7.5 测定丙二醛(MDA)含量 | 第34页 |
2.2.8 制备石蜡切片 | 第34-35页 |
2.2.9 HE染色观察心肌组织病理学变化 | 第35页 |
2.2.10 Masson染色观察心肌间质纤维化程度 | 第35-36页 |
2.2.11 Western blot检测蛋白表达 | 第36-37页 |
2.2.11.1 提取心肌组织蛋白 | 第36-37页 |
2.2.11.2 聚丙烯酰氨凝胶电泳 | 第37页 |
2.2.12 统计学分析 | 第37页 |
2.3 实验结果 | 第37-49页 |
2.3.1 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠血糖值、体重、摄食量和饮水量的影响 | 第37-42页 |
2.3.2 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠心功能的影响 | 第42-43页 |
2.3.3 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠心脏重量/体重比值的影响 | 第43-44页 |
2.3.4 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠血清心肌三酶水平的影响 | 第44-45页 |
2.3.5 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠心肌组织抗氧化酶活力的影响 | 第45-46页 |
2.3.6 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠心肌组织HE染色的影响 | 第46页 |
2.3.7 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠心肌组织Masson染色的影响 | 第46-48页 |
2.3.8 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠心肌组织凋亡相关蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
2.4 本章小结 | 第49-50页 |
第3章 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞损伤保护作用机制研究 | 第50-76页 |
3.1 实验材料 | 第50-54页 |
3.1.1 细胞株 | 第50页 |
3.1.2 药品与试剂 | 第50-51页 |
3.1.3 实验仪器 | 第51-52页 |
3.1.4 药品及溶液配制 | 第52-54页 |
3.2 实验方法 | 第54-62页 |
3.2.1 细胞培养方法 | 第54-56页 |
3.2.1.1 细胞复苏 | 第54页 |
3.2.1.2 细胞冻存 | 第54-55页 |
3.2.1.3 细胞换液 | 第55页 |
3.2.1.4 细胞传代 | 第55页 |
3.2.1.5 细胞计数 | 第55-56页 |
3.2.1.6 细胞点板 | 第56页 |
3.2.2 MTT法检测细胞活力 | 第56页 |
3.2.3 建立高糖诱导H9c2心肌细胞损伤模型 | 第56-57页 |
3.2.4 检测杨梅苷单加药对正常H9c2心肌细胞活力影响 | 第57页 |
3.2.5 检测杨梅苷预孵育对高糖诱导H9c2心肌细胞损伤影响 | 第57页 |
3.2.6 倒置显微镜观察细胞形态 | 第57-58页 |
3.2.7 试剂盒测定细胞LDH漏出量、MDA含量及SOD、CAT和GSH-Px活力 | 第58页 |
3.2.8 荧光染色检测细胞内ROS水平 | 第58-59页 |
3.2.9 JC-1 染色检测线粒体膜电位变化 | 第59页 |
3.2.10 Hoechst 33342/PI双染检测凋亡细胞 | 第59-60页 |
3.2.11 Western Blot检测蛋白表达 | 第60-62页 |
3.2.11.1 提取细胞蛋白 | 第60页 |
3.2.11.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第60-61页 |
3.2.11.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第61-62页 |
3.2.12 统计学分析 | 第62页 |
3.3 实验结果 | 第62-75页 |
3.3.1 高糖诱导对H9c2心肌细胞活力的影响 | 第62-63页 |
3.3.2 杨梅苷单加药对正常H9c2心肌细胞活力的影响 | 第63-64页 |
3.3.3 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞活力的影响 | 第64-66页 |
3.3.4 杨梅苷对高糖诱导对H9c2心肌细胞形态学变化的影响 | 第66页 |
3.3.5 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞LDH漏出量、MDA含量及SOD、CAT和GSH-Px活力的影响 | 第66-67页 |
3.3.6 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞内ROS水平的影响 | 第67-68页 |
3.3.7 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞线粒体膜电位变化的影响 | 第68-69页 |
3.3.8 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡情况的影响 | 第69-70页 |
3.3.9 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡相关蛋白表达的影响 | 第70-71页 |
3.3.10 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞PI3K/Akt和Nrf2/ARE信号通路相关蛋白表达的影响 | 第71-75页 |
3.4 本章小结 | 第75-76页 |
第4章 讨论 | 第76-78页 |
第5章 结论与展望 | 第78-80页 |
5.1 结论 | 第78页 |
5.2 展望 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-87页 |
攻读学位期间发表论文与研究成果清单 | 第87-88页 |
缩略词表 | 第88-90页 |
致谢 | 第90页 |