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杨梅苷对糖尿病心肌病的保护作用及其机制研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第1章 绪论第13-22页
    1.1 糖尿病心肌病的概念第13页
    1.2 糖尿病心肌病心肌结构和功能的改变第13-15页
        1.2.1 左心室肥大第13-14页
        1.2.2 舒张功能障碍第14页
        1.2.3 收缩功能障碍第14-15页
    1.3 糖尿病心肌病的发病机制第15-17页
        1.3.1 钙离子调控损伤第15页
        1.3.2 心肌内代谢改变第15-16页
        1.3.3 细胞外基质重构第16页
        1.3.4 内皮功能障碍第16-17页
        1.3.5 线粒体功能障碍第17页
    1.4 氧化应激和糖尿病心肌病第17-18页
    1.5 本课题研究的意义及研究内容第18-22页
        1.5.1 研究意义第18-20页
        1.5.2 研究内容第20-21页
        1.5.3 创新点第21-22页
第2章 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠心脏结构和功能保护作用第22-50页
    2.1 实验材料第22-26页
        2.1.1 实验动物第22页
        2.1.2 药品与试剂第22-24页
        2.1.3 实验仪器第24-25页
        2.1.4 药品及溶液配制第25-26页
    2.2 实验方法第26-37页
        2.2.1 建立STZ糖尿病小鼠模型第26页
        2.2.2 实验分组及给药第26-27页
        2.2.3 测量空腹血糖、体重、摄食量和饮水量第27页
        2.2.4 超声心动检测心功能第27页
        2.2.5 采集血液和心肌组织样本第27-28页
        2.2.6 试剂盒测定血清心肌三酶水平第28-30页
            2.2.6.1 测定乳酸脱氢酶(LDH)活力第28-29页
            2.2.6.2 测定肌酸激酶(CK)活力第29-30页
            2.2.6.3 测定谷草转氨酶(AST/GOT)活力第30页
        2.2.7 试剂盒测定心肌组织匀浆抗氧化酶活力第30-34页
            2.2.7.1 制备心肌组织匀浆第30-31页
            2.2.7.2 测定超氧化物歧化酶(SOD)活力第31-32页
            2.2.7.3 测定过氧化氢酶(CAT)活力第32页
            2.2.7.4 测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力第32-34页
            2.2.7.5 测定丙二醛(MDA)含量第34页
        2.2.8 制备石蜡切片第34-35页
        2.2.9 HE染色观察心肌组织病理学变化第35页
        2.2.10 Masson染色观察心肌间质纤维化程度第35-36页
        2.2.11 Western blot检测蛋白表达第36-37页
            2.2.11.1 提取心肌组织蛋白第36-37页
            2.2.11.2 聚丙烯酰氨凝胶电泳第37页
        2.2.12 统计学分析第37页
    2.3 实验结果第37-49页
        2.3.1 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠血糖值、体重、摄食量和饮水量的影响第37-42页
        2.3.2 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠心功能的影响第42-43页
        2.3.3 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠心脏重量/体重比值的影响第43-44页
        2.3.4 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠血清心肌三酶水平的影响第44-45页
        2.3.5 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠心肌组织抗氧化酶活力的影响第45-46页
        2.3.6 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠心肌组织HE染色的影响第46页
        2.3.7 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠心肌组织Masson染色的影响第46-48页
        2.3.8 杨梅苷对STZ糖尿病小鼠心肌组织凋亡相关蛋白表达的影响第48-49页
    2.4 本章小结第49-50页
第3章 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞损伤保护作用机制研究第50-76页
    3.1 实验材料第50-54页
        3.1.1 细胞株第50页
        3.1.2 药品与试剂第50-51页
        3.1.3 实验仪器第51-52页
        3.1.4 药品及溶液配制第52-54页
    3.2 实验方法第54-62页
        3.2.1 细胞培养方法第54-56页
            3.2.1.1 细胞复苏第54页
            3.2.1.2 细胞冻存第54-55页
            3.2.1.3 细胞换液第55页
            3.2.1.4 细胞传代第55页
            3.2.1.5 细胞计数第55-56页
            3.2.1.6 细胞点板第56页
        3.2.2 MTT法检测细胞活力第56页
        3.2.3 建立高糖诱导H9c2心肌细胞损伤模型第56-57页
        3.2.4 检测杨梅苷单加药对正常H9c2心肌细胞活力影响第57页
        3.2.5 检测杨梅苷预孵育对高糖诱导H9c2心肌细胞损伤影响第57页
        3.2.6 倒置显微镜观察细胞形态第57-58页
        3.2.7 试剂盒测定细胞LDH漏出量、MDA含量及SOD、CAT和GSH-Px活力第58页
        3.2.8 荧光染色检测细胞内ROS水平第58-59页
        3.2.9 JC-1 染色检测线粒体膜电位变化第59页
        3.2.10 Hoechst 33342/PI双染检测凋亡细胞第59-60页
        3.2.11 Western Blot检测蛋白表达第60-62页
            3.2.11.1 提取细胞蛋白第60页
            3.2.11.2 BCA法测定蛋白浓度第60-61页
            3.2.11.3 SDS-PAGE凝胶电泳第61-62页
        3.2.12 统计学分析第62页
    3.3 实验结果第62-75页
        3.3.1 高糖诱导对H9c2心肌细胞活力的影响第62-63页
        3.3.2 杨梅苷单加药对正常H9c2心肌细胞活力的影响第63-64页
        3.3.3 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞活力的影响第64-66页
        3.3.4 杨梅苷对高糖诱导对H9c2心肌细胞形态学变化的影响第66页
        3.3.5 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞LDH漏出量、MDA含量及SOD、CAT和GSH-Px活力的影响第66-67页
        3.3.6 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞内ROS水平的影响第67-68页
        3.3.7 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞线粒体膜电位变化的影响第68-69页
        3.3.8 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡情况的影响第69-70页
        3.3.9 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡相关蛋白表达的影响第70-71页
        3.3.10 杨梅苷对高糖诱导H9c2心肌细胞PI3K/Akt和Nrf2/ARE信号通路相关蛋白表达的影响第71-75页
    3.4 本章小结第75-76页
第4章 讨论第76-78页
第5章 结论与展望第78-80页
    5.1 结论第78页
    5.2 展望第78-80页
参考文献第80-87页
攻读学位期间发表论文与研究成果清单第87-88页
缩略词表第88-90页
致谢第90页

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