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布氏锥虫BDF5 bromo结构域的结构与功能研究

摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 绪论第10-26页
    1.1 布氏锥虫和布氏锥虫病简介第10-12页
    1.2 VSG的表达调控第12-13页
    1.3 表观遗传学和组蛋白的翻译后修饰第13-15页
    1.4 组蛋白结合蛋白和bromo结构域简介第15-20页
        1.4.1 组蛋白修饰蛋白和组蛋白结合蛋白第15-16页
        1.4.2 bromo结构域简介第16页
        1.4.3 bromo结构域结构特征第16-18页
        1.4.4 bromo结构域生理功能第18-20页
    1.5 布氏锥虫表观遗传学第20-23页
    1.6 布氏锥虫bromo结构域研究现状第23-26页
第二章 材料与方法第26-42页
    2.1 实验材料第26-27页
        2.1.1 常用菌株与细胞株第26页
        2.1.2 克隆载体第26页
        2.1.3 常用生化试剂第26页
        2.1.4 常用酶与抗体第26页
        2.1.5 常用仪器第26-27页
        2.1.6 分析网站和应用软件第27页
    2.2 实验方法第27-42页
        2.2.1 序列分析与片段截取第27-28页
        2.2.2 分子克隆第28-30页
        2.2.3 BDF5-bromo1表达与纯化第30-34页
        2.2.4 BDF5-bromo1结构解析第34-39页
        2.2.5 BDF5-bromo1初步功能研究第39-40页
        2.2.6 BDF5串联bromo和BDF5-bromo2表达与结构初探第40-42页
第三章 实验结果与分析第42-70页
    3.1 BDF5序列比对与分析第42-43页
    3.2 BDF5-bromo1表达条件优化与稳定性测试第43-46页
        3.2.1 BDF5-bromo1克隆表达和条件优化第43-44页
        3.2.2 BDF5-bromo1结构域核磁~1H-~(15)N HSQC第44-46页
        3.2.3 BDF5-bromo1稳定性测试第46页
    3.3 BDF5-bromo1结构解析和分析第46-58页
        3.3.1 BDF5-bromo1主链认证第46-48页
        3.3.2 BDF5-bromo1 HBHA(CO)NH、H(CCONH)、15N-NOESY-HSQC认证第48-50页
        3.3.3 BDF5-bromo1 CSI、二面角预测和重水谱指认氢键第50-51页
        3.3.4 BDF5-bromo1结构计算与优化第51-54页
        3.3.5 BDF5-bromo1结构分析第54-58页
    3.4 BDF5-bromo1初步功能研究第58-65页
        3.4.1 BDF5-bromo1结合乙酰化组蛋白理论可能性分析第58-59页
        3.4.2 BDF5-bromo1 GST pull-down实验第59-61页
        3.4.3 AlphaLISA实验分析BDF5-bromo1与乙酰化组蛋白小肽的结合第61-62页
        3.4.4 Far-western实验分析BDF5-bromo1与乙酰化组蛋白小肽的结合第62页
        3.4.5 布氏锥虫H4K4ac和H4K10ac与BDF5-bromo1 NMR化学微扰实验第62-64页
        3.4.6 BDF5-bromo1与BDF5-bromo2 NMR化学位移微扰实验第64-65页
        3.4.7 BDF5-bromo1定点突变第65页
    3.5 BDF5串联bromo和BDF5-bromo2表达与结构初探第65-68页
        3.5.1 BDF5串联bromo表达和结构初探第65-66页
        3.5.2 BDF5-bromo2表达和结构初探第66-67页
        3.5.3 BDF5串联bromo初步功能研究第67-68页
    3.6 总结第68-70页
参考文献第70-78页
致谢第78-79页
在读期间发表的学术论文与取得的其它研究成果第79页

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