摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第10-26页 |
1.1 布氏锥虫和布氏锥虫病简介 | 第10-12页 |
1.2 VSG的表达调控 | 第12-13页 |
1.3 表观遗传学和组蛋白的翻译后修饰 | 第13-15页 |
1.4 组蛋白结合蛋白和bromo结构域简介 | 第15-20页 |
1.4.1 组蛋白修饰蛋白和组蛋白结合蛋白 | 第15-16页 |
1.4.2 bromo结构域简介 | 第16页 |
1.4.3 bromo结构域结构特征 | 第16-18页 |
1.4.4 bromo结构域生理功能 | 第18-20页 |
1.5 布氏锥虫表观遗传学 | 第20-23页 |
1.6 布氏锥虫bromo结构域研究现状 | 第23-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-42页 |
2.1 实验材料 | 第26-27页 |
2.1.1 常用菌株与细胞株 | 第26页 |
2.1.2 克隆载体 | 第26页 |
2.1.3 常用生化试剂 | 第26页 |
2.1.4 常用酶与抗体 | 第26页 |
2.1.5 常用仪器 | 第26-27页 |
2.1.6 分析网站和应用软件 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-42页 |
2.2.1 序列分析与片段截取 | 第27-28页 |
2.2.2 分子克隆 | 第28-30页 |
2.2.3 BDF5-bromo1表达与纯化 | 第30-34页 |
2.2.4 BDF5-bromo1结构解析 | 第34-39页 |
2.2.5 BDF5-bromo1初步功能研究 | 第39-40页 |
2.2.6 BDF5串联bromo和BDF5-bromo2表达与结构初探 | 第40-42页 |
第三章 实验结果与分析 | 第42-70页 |
3.1 BDF5序列比对与分析 | 第42-43页 |
3.2 BDF5-bromo1表达条件优化与稳定性测试 | 第43-46页 |
3.2.1 BDF5-bromo1克隆表达和条件优化 | 第43-44页 |
3.2.2 BDF5-bromo1结构域核磁~1H-~(15)N HSQC | 第44-46页 |
3.2.3 BDF5-bromo1稳定性测试 | 第46页 |
3.3 BDF5-bromo1结构解析和分析 | 第46-58页 |
3.3.1 BDF5-bromo1主链认证 | 第46-48页 |
3.3.2 BDF5-bromo1 HBHA(CO)NH、H(CCONH)、15N-NOESY-HSQC认证 | 第48-50页 |
3.3.3 BDF5-bromo1 CSI、二面角预测和重水谱指认氢键 | 第50-51页 |
3.3.4 BDF5-bromo1结构计算与优化 | 第51-54页 |
3.3.5 BDF5-bromo1结构分析 | 第54-58页 |
3.4 BDF5-bromo1初步功能研究 | 第58-65页 |
3.4.1 BDF5-bromo1结合乙酰化组蛋白理论可能性分析 | 第58-59页 |
3.4.2 BDF5-bromo1 GST pull-down实验 | 第59-61页 |
3.4.3 AlphaLISA实验分析BDF5-bromo1与乙酰化组蛋白小肽的结合 | 第61-62页 |
3.4.4 Far-western实验分析BDF5-bromo1与乙酰化组蛋白小肽的结合 | 第62页 |
3.4.5 布氏锥虫H4K4ac和H4K10ac与BDF5-bromo1 NMR化学微扰实验 | 第62-64页 |
3.4.6 BDF5-bromo1与BDF5-bromo2 NMR化学位移微扰实验 | 第64-65页 |
3.4.7 BDF5-bromo1定点突变 | 第65页 |
3.5 BDF5串联bromo和BDF5-bromo2表达与结构初探 | 第65-68页 |
3.5.1 BDF5串联bromo表达和结构初探 | 第65-66页 |
3.5.2 BDF5-bromo2表达和结构初探 | 第66-67页 |
3.5.3 BDF5串联bromo初步功能研究 | 第67-68页 |
3.6 总结 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
在读期间发表的学术论文与取得的其它研究成果 | 第79页 |