| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第15-21页 |
| 1.1 猪圆环病毒概述 | 第15-17页 |
| 1.1.1 病原学 | 第15页 |
| 1.1.2 致病机理 | 第15-16页 |
| 1.1.3 流行病学 | 第16页 |
| 1.1.4 猪圆环病毒病的诊断与防治 | 第16-17页 |
| 1.1.5 猪圆环病毒病亚单位疫苗研究进展 | 第17页 |
| 1.2 猪传染性胸膜肺炎的介绍 | 第17页 |
| 1.3 APP疫苗的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3.1 灭活疫苗 | 第17-18页 |
| 1.3.2 亚单位疫苗 | 第18页 |
| 1.3.3 菌影疫苗 | 第18页 |
| 1.3.4 弱毒活疫苗 | 第18-19页 |
| 1.4 菌影递呈系统介绍 | 第19页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 大肠杆菌菌影递呈Cap蛋白疫苗的制备 | 第21-29页 |
| 2.1 材料 | 第21页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂和仪器设备 | 第21页 |
| 2.2 方法 | 第21-24页 |
| 2.2.1 猪圆环病毒2型Cap基因的优化 | 第21页 |
| 2.2.2 Cap基因及递呈系统信号序列的PCR扩增 | 第21-22页 |
| 2.2.3 裂解基因E盒的PCR扩增 | 第22-23页 |
| 2.2.4 重组质粒的构建与鉴定 | 第23页 |
| 2.2.5 Cap基因的诱导表达及E基因的诱导表达 | 第23页 |
| 2.2.6 Cap蛋白的递呈效率检测 | 第23-24页 |
| 2.2.7 Cap蛋白的定位情况 | 第24页 |
| 2.2.8 对Cap蛋白进行定量 | 第24页 |
| 2.3 结果 | 第24-28页 |
| 2.3.1 猪圆环病毒2型Cap基因的优化后序列 | 第24-25页 |
| 2.3.2 Cap基因，递呈系统信号序列及E基因盒的PCR扩增结果 | 第25-26页 |
| 2.3.3 SDS-PAGE和Western-blot检测菌影中Cap蛋白的表达情况 | 第26-27页 |
| 2.3.4 免疫电镜观察Cap蛋白在菌影中的定位情况 | 第27页 |
| 2.3.5 对Cap蛋白进行定量 | 第27-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 第三章 大肠杆菌菌影递呈Cap蛋白疫苗的免疫效果评价 | 第29-34页 |
| 3.1 材料 | 第29页 |
| 3.1.1 PCV2型毒株及实验动物 | 第29页 |
| 3.1.2 主要试剂和仪器设备 | 第29页 |
| 3.2 方法 | 第29-30页 |
| 3.2.1 疫苗的制作 | 第29页 |
| 3.2.2 猪的免疫攻毒试验 | 第29页 |
| 3.2.3 血清学检测猪圆环病毒2型抗体水平 | 第29-30页 |
| 3.2.4 PCR检测病毒血症 | 第30页 |
| 3.2.5 荧光定量PCR检测不同组织中病毒载量 | 第30页 |
| 3.2.6 猪体重相对增长率 | 第30页 |
| 3.3 结果 | 第30-32页 |
| 3.3.1 血清抗体检测结果 | 第30-31页 |
| 3.3.2 猪病毒血症情况 | 第31页 |
| 3.3.3 腹股沟淋巴结病毒载量情况 | 第31-32页 |
| 3.3.4 猪的相对体重增长率 | 第32页 |
| 3.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第四章 APP菌影作为rCap蛋白佐剂的亚单位疫苗的制备 | 第34-37页 |
| 4.1 材料 | 第34页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第34页 |
| 4.1.2 主要试剂和仪器设备 | 第34页 |
| 4.2 方法 | 第34-35页 |
| 4.2.1 Cap基因的PCR扩增 | 第34页 |
| 4.2.2 重组质粒的构建与鉴定 | 第34页 |
| 4.2.3 rCap蛋白的表达与纯化 | 第34-35页 |
| 4.2.4 APP菌影的制备 | 第35页 |
| 4.2.5 疫苗的制备 | 第35页 |
| 4.3 结果 | 第35-36页 |
| 4.3.1 Cap基因的PCR扩增与重组质粒的构建 | 第35页 |
| 4.3.2 rCap蛋白的表达、鉴定以及纯化 | 第35-36页 |
| 4.4 讨论 | 第36-37页 |
| 第五章 APP菌影作为rCap蛋白佐剂的亚单位苗的免疫效果评价 | 第37-42页 |
| 5.1 材料 | 第37页 |
| 5.1.1 PCV2型毒株及实验动物 | 第37页 |
| 5.1.2 主要试剂和仪器设备 | 第37页 |
| 5.2 方法 | 第37-38页 |
| 5.2.1 rCap蛋白浓度测定 | 第37页 |
| 5.2.2 猪的免疫攻毒试验 | 第37页 |
| 5.2.3 血清学检测PCV2抗体水平 | 第37页 |
| 5.2.4 PCR检测病毒血症 | 第37-38页 |
| 5.2.5 荧光定量PCR检测腹股沟淋巴结中病毒载量 | 第38页 |
| 5.2.6 猪体重相对增长率的变化 | 第38页 |
| 5.3 结果 | 第38-40页 |
| 5.3.1 血清学检测PCV2抗体水平 | 第38页 |
| 5.3.2 猪体重变化 | 第38-39页 |
| 5.3.3 病毒血症的变化情况 | 第39页 |
| 5.3.4 腹股沟淋巴结病毒载量情况 | 第39-40页 |
| 5.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第六章 APP菌影递呈表达Cap蛋白的研究 | 第42-47页 |
| 6.1 材料 | 第42页 |
| 6.1.1 质粒与菌株 | 第42页 |
| 6.1.2 主要试剂和仪器设备 | 第42页 |
| 6.2 方法 | 第42-45页 |
| 6.2.1 表达载体的构建 | 第42-45页 |
| 6.2.2 表达效率检测 | 第45页 |
| 6.3 结果 | 第45页 |
| 6.3.1 表达载体的构建结果 | 第45页 |
| 6.3.2 表达载体转化APP结果 | 第45页 |
| 6.3.3 SDS-PAGE与Western blot检测表达效率 | 第45页 |
| 6.4 讨论 | 第45-47页 |
| 第七章 全文结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
