| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-30页 |
| 1.1 前言 | 第13页 |
| 1.2 猪繁殖与呼吸综合征PRRS发病流行特点 | 第13-15页 |
| 1.2.1 PRRS在我国的流行动态表现出以下几个主要特征 | 第13-15页 |
| 1.2.2 国外的PRRS流行动态的主要特征 | 第15页 |
| 1.3 PRRS的病原及诊断的国内外现状及趋势 | 第15-18页 |
| 1.3.1 PRRS病毒 | 第15-16页 |
| 1.3.2 PRRS诊断 | 第16-18页 |
| 1.4 疫苗免疫等防治措施现状和趋势 | 第18-21页 |
| 1.4.1 疫苗免疫的研究 | 第18-19页 |
| 1.4.2 疫苗的种类及其应用 | 第19-21页 |
| 1.4.3 其它防制措施 | 第21页 |
| 1.5 PRRS宿主及其免疫遗传基础的研究现状及趋势 | 第21-23页 |
| 1.5.1 宿主 | 第21-22页 |
| 1.5.2 抗PRRSV的猪遗传基础的研究现状 | 第22-23页 |
| 1.5.3 提高猪PRRSV抗病力的研究趋势 | 第23页 |
| 1.6 PRRSV细胞和组织嗜性 | 第23-24页 |
| 1.6.1 外周血单个核细胞 | 第23-24页 |
| 1.6.2 PRRSV的组织分布 | 第24页 |
| 1.7 PRRSV受体基因和相关免疫基因研究进展 | 第24-30页 |
| 1.7.1 硫酸乙酞肝素 | 第24-25页 |
| 1.7.2 唾液酸粘附素 | 第25-26页 |
| 1.7.3 CD163分子 | 第26-27页 |
| 1.7.4 IL-8 | 第27页 |
| 1.7.5 IL-10 | 第27-28页 |
| 1.7.6 TNF-α | 第28-30页 |
| 2 研究目的和意义 | 第30-31页 |
| 3. 材料和方法 | 第31-45页 |
| 3.1 试验材料和仪器设备 | 第31-34页 |
| 3.1.1 分离PBMC的血样 | 第31页 |
| 3.1.2 猪群体基因组DNA样 | 第31页 |
| 3.1.3 组织cDNA样 | 第31页 |
| 3.1.4 新基因染色体定位的DNA样品 | 第31-32页 |
| 3.1.5 主要试剂及配制 | 第32-33页 |
| 3.1.6 主要仪器设备 | 第33-34页 |
| 3.1.7 主要分子生物学分析软件和数据统计分析软件 | 第34页 |
| 3.2 主要研究方法 | 第34-45页 |
| 3.2.1 猪PBMC分离及RNA提取 | 第34-36页 |
| 3.2.2 CD163、CD169、IL8、IL10、TNFα定量试验 | 第36-38页 |
| 3.2.3 猪CD163和CD169基因的染色体精细定位 | 第38-39页 |
| 3.2.4 受体基因CD163和CD169变异位点筛选及检测 | 第39-45页 |
| 4 试验结果 | 第45-66页 |
| 4.1 PBMC分离最佳条件建立和总RNA提取与质量检测结果 | 第45-47页 |
| 4.1.1 不同抗凝剂类型对分离PBMC的影响 | 第45页 |
| 4.1.2 不同离心速度和和分离时间对分离PBMC的影响 | 第45-46页 |
| 4.1.3 不同抗凝剂类型、离心速度、离心时间对分离PBMC数量及其存活率的影响 | 第46-47页 |
| 4.1.4 PBMC中RNA提取、RNA浓度和完整性检测 | 第47页 |
| 4.2 定量检测试验结果 | 第47-53页 |
| 4.2.1 反转录cDNA内参基因PCR检测结果 | 第47-48页 |
| 4.2.2 定量引物PCR扩增效果检测结果 | 第48页 |
| 4.2.3 5个品种猪PBMC中候选基因相对表达量检测结果 | 第48-51页 |
| 4.2.4 组织样中候选基因相对表达量检测结果 | 第51-53页 |
| 4.3 染色体定位结果 | 第53-57页 |
| 4.3.1 猪CD169基因的染色体定位结果 | 第53-55页 |
| 4.3.2 猪CD163基因的染色体定位结果 | 第55-57页 |
| 4.4 猪CD169基因部分片段克隆和突变筛选结果 | 第57-60页 |
| 4.4.1 猪CD169基因和蛋白质结构特征 | 第57-59页 |
| 4.4.2 猪CD169突变位点筛选 | 第59-60页 |
| 4.5 猪CD163基因结构分析和突变位点筛选结果 | 第60-66页 |
| 4.5.1 猪CD163基因和蛋白质结构特征 | 第60-61页 |
| 4.5.2 猪CD163部分片段克隆结果 | 第61-62页 |
| 4.5.3 猪CD163基因突变位点筛选结果 | 第62-63页 |
| 4.5.4 CD163 SNP位点PCR-RFLP多态性检测和免疫性状关联分析结果 | 第63-66页 |
| 5 讨论 | 第66-69页 |
| 5.1 关于猪PBMC分离条件的讨论 | 第66页 |
| 5.2 关于CD163 SNP位点作为抗病候选标记的讨论 | 第66-67页 |
| 5.3 PRRSV受体结构和组织表达特异与细胞侵染嗜性 | 第67页 |
| 5.4 候选基因表达差异和品种抗病力的讨论 | 第67-69页 |
| 6 小结 | 第69-71页 |
| 6.1 本研究的主要结论 | 第69页 |
| 6.2 本研究的创新点 | 第69页 |
| 6.3 本研究的不足与进一步研究内容 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 附录 | 第79-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
