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疏水基质固定化Candida sp.99-125脂肪酶的研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
符号说明第14-15页
第一章 绪论第15-35页
    1.1 酶及酶的固定化第15-18页
        1.1.1 酶的简介第15-16页
        1.1.2 酶的固定化第16-18页
            1.1.2.1 引言第16页
            1.1.2.2 固定化酶的性质第16-17页
            1.1.2.3 酶的固定化方法第17-18页
            1.1.2.4 固定化酶的应用第18页
    1.2 脂肪酶第18-23页
        1.2.1 脂肪酶简介第18页
        1.2.2 脂肪酶的结构与性质第18-23页
            1.2.2.1 脂肪酶的结构第18-20页
            1.2.2.2 脂肪酶的催化性能第20-22页
            1.2.2.3 脂肪酶的界面活化与构象工程第22-23页
    1.3 脂肪酶的固定化第23-32页
        1.3.1 前言第23-24页
        1.3.2 吸附法第24-27页
            1.3.2.1 亲水性载体第24-25页
            1.3.2.2 疏水性载体第25-27页
        1.3.3 共价法第27-28页
        1.3.4 交联法第28-29页
        1.3.5 包埋法第29-32页
    1.4 固定化脂肪酶反应器第32页
    1.5 固定化脂肪酶的应用前景和工业化展望第32-35页
第二章 大孔吸附树脂固定化Candida sp.99-125脂肪酶第35-62页
    2.1 前言第35页
    2.2 实验原料和设备第35-37页
        2.2.1 实验材料第35-36页
        2.2.2 实验设备第36-37页
    2.3 实验方法第37-47页
        2.3.1 大孔吸附树脂的预处理第37-38页
        2.3.2 酶蛋白含量的测定第38-39页
        2.3.3 固定化酶水解酶活的测定第39-40页
        2.3.4 固定化酶酯化酶活的测定第40页
        2.3.5 固定化酶催化大豆油脂合成生物柴油第40-41页
        2.3.6 酯化及酯交换反应的气相色谱分析第41-42页
        2.3.7 吸附法固定化方法的选择第42-43页
            2.3.7.1 在磷酸盐缓冲液中固定化脂肪酶第42-43页
            2.3.7.2 在有机相中固定化脂肪酶第43页
        2.3.8 固定化载体的筛选第43页
            2.3.8.1 不同树脂对酶蛋白固定化效率的影响第43页
            2.3.8.2 不同树脂对水解酶活和酶活力回收率的影响第43页
            2.3.8.3 不同树脂对酶蛋白酯化酶活的影响第43页
            2.3.8.4 不同树脂对酶蛋白酯交换酶活的影响第43页
        2.3.9 吸附法固定化介质的比较第43-44页
            2.3.9.1 正庚烷与磷酸盐缓冲液对固定化酶水解酶活、酯化酶活和固定化效果的影响第43-44页
            2.3.9.2 正庚烷与磷酸盐缓冲液对固定化酶酯交换酶活的影响第44页
            2.3.9.3 不同极性介质对固定化酶水解酶活和酯化酶活的影响第44页
        2.3.10 固定化条件和反应条件对固定化酶酯化活性的影响第44-45页
            2.3.10.1 给酶量对固定化效率和酯化酶活的影响第44页
            2.3.10.2 固定化时间对固定化酶酯化活性的影响第44-45页
            2.3.10.3 吸附温度对固定化酶酯化活性的影响第45页
            2.3.10.4 pH值对固定化酶酯化活性的影响第45页
            2.3.10.5 固定化脂肪酶的最适作用温度第45页
            2.3.10.6 固定化脂肪酶的热稳定性第45页
        2.3.11 固定化条件和反应条件对酶促合成生物柴油的影响第45-47页
            2.3.11.1 给酶量对生物柴油转化率的影响第46页
            2.3.11.2 pH值对生物柴油转化率的影响第46页
            2.3.11.3 体系水含量对生物柴油转化率的影响第46页
            2.3.11.4 反应温度对生物柴油转化率的影响第46-47页
            2.3.11.5 甲醇对固定化酶活性的抑制作用第47页
            2.3.11.6 固定化脂肪酶的操作稳定性第47页
            2.3.11.7 利用固定化酶填充柱反应器催化合成生物柴油第47页
    2.4 结果与讨论第47-60页
        2.4.1 固定化载体的筛选第47-51页
            2.4.1.1 不同树脂对酶蛋白固定化效率的影响第48页
            2.4.1.2 不同树脂对水解酶活和酶活力回收率的影响第48-50页
            2.4.1.3 不同树脂对固定化酶酯化酶活的影响第50页
            2.4.1.4 不同树脂对脂肪酶酯交换酶活的影响第50-51页
        2.4.2 固定化方法的比较第51-53页
            2.4.2.1 固定化介质对脂肪酶固定化效果的影响第51-52页
            2.4.2.2 不同极性固定化介质对脂肪酶酶活的影响第52页
            2.4.2.3 固定化介质对生物柴油转化率的影响第52-53页
        2.4.3 固定化条件和反应条件对固定化酶酯化活性的影响第53-57页
            2.4.3.1 给酶量对固定化酶酯化酶活的影响第53-54页
            2.4.3.2 固定化时间对固定化酶酯化酶活的影响第54页
            2.4.3.3 吸附温度对固定化酶酯化酶活的影响第54-55页
            2.4.3.4 pH值对固定化酶酯化酶活的影响第55-56页
            2.4.3.5 固定化脂肪酶的最适作用温度第56页
            2.4.3.6 固定化脂肪酶的热稳定性第56-57页
        2.4.4 固定化酶催化合成生物柴油反应第57-60页
            2.4.4.1 给酶量对生物柴油转化率的影响第57页
            2.4.4.2 pH值对生物柴油转化率的影响第57-58页
            2.4.4.3 体系水含量对生物柴油转化率的影响第58页
            2.4.4.4 反应温度对生物柴油转化率的影响第58-59页
            2.4.4.5 甲醇对固定化酶活性的抑制作用第59页
            2.4.4.6 固定化脂肪酶的操作稳定性第59-60页
            2.4.4.7 利用固定化酶填充柱反应器催化合成生物柴油第60页
    2.5 小结第60-62页
第三章 疏水棉织物吸附法固定化Candida sp.99-125脂肪酶第62-72页
    3.1 引言第62页
    3.2 试验原料和设备第62-63页
        3.2.1 实验材料第62-63页
        3.2.2 实验设备第63页
    3.3 实验方法第63-65页
        3.3.1 棉织物的红外吸收光谱测试第63-64页
        3.3.2 棉织物的疏水改性第64页
            3.3.2.1 溴代正丁(辛)烷改性棉织物第64页
            3.3.2.2 长链醇(辛醇、异辛醇、癸醇、十六醇和十八醇)改性棉织物第64页
            3.3.2.3 戊胺及十二胺改性棉织物第64页
        3.3.3 棉织物固定化脂肪酶第64-65页
        3.3.4 脂肪酶蛋白质含量的测定第65页
        3.3.5 固定化脂肪酶水解酶活的测定第65页
        3.3.6 固定化脂肪酶酯化酶活的测定第65页
        3.3.7 固定化脂肪酶催化合成生物柴油第65页
    3.4 实验结果与讨论第65-71页
        3.4.1 未改性棉织物红外谱图分析第65-66页
        3.4.2 溴代烷烃改性棉织物红外谱图分析第66-67页
        3.4.3 长链醇改性棉织物红外谱图分析第67-68页
        3.4.4 戊(十二)胺改性棉织物红外谱图分析第68-69页
        3.4.5 固定化脂肪酶酯化酶活的比较第69-70页
        3.4.6 固定化脂肪酶水解酶活的比较第70-71页
        3.4.7 固定化脂肪酶的操作稳定性第71页
    3.5 小结第71-72页
第四章 溶胶-凝胶(Sol-gel)法包埋脂肪酶及应用于有机合成反应第72-85页
    4.1 前言第72页
    4.2 试验原料和设备第72-73页
        4.2.1 实验材料第73页
        4.2.2 实验设备第73页
    4.3 实验方法第73-77页
        4.3.1 脂肪酶蛋白质含量的测定第73页
        4.3.2 固定化脂肪酶酯化酶活的测定第73-74页
        4.3.3 Sol-gel法包埋脂肪酶第74页
            4.3.3.1 Sol-gel法固定化粗酶粉第74页
            4.3.3.2 Sol-gel法固定化发酵液第74页
        4.3.4 固定化脂肪酶醇解油脂合成生物柴油第74页
        4.3.5 Sol-gel法固定化粗酶粉的影响因素第74-76页
            4.3.5.1 不同种类硅源对固定化酶酶活的影响第74页
            4.3.5.2 PTMS与TMOS的摩尔比对固定化酶酶活的影响第74-75页
            4.3.5.3 R值(水与硅源的摩尔比)对固定化酶酶活的影响第75页
            4.3.5.4 硅源水解时间对固定化酶活性的影响第75页
            4.3.5.5 PEG对固定化酶活性的影响第75-76页
            4.3.5.6 给酶量对固定化酶活性的影响第76页
            4.3.5.7 酯化反应体系水含量对酶活性的影响第76页
            4.3.5.8 固定化脂肪酶的热稳定性第76页
            4.3.5.9 固定化脂肪酶的储存稳定性第76页
            4.3.5.10 固定化脂肪酶的操作稳定性第76页
        4.3.6 固定化脂肪酶的电镜表征第76-77页
    4.4 实验结果与讨论第77-84页
        4.4.1 不同种类硅源对固定化酶活性的影响第77页
        4.4.2 PTMS与TMOS的摩尔比对固定化酶酶活的影响第77-78页
        4.4.3 水与硅源的摩尔比对固定化酶活性的影响第78页
        4.4.4 硅源水解时间对固定化酶活性的影响第78-79页
        4.4.5 PEG对固定化酶活性的影响第79-80页
        4.4.6 给酶量对固定化酶活性的影响第80页
        4.4.7 酯化反应体系水含量对酶活性的影响第80-81页
        4.4.8 固定化脂肪酶的热稳定性第81页
        4.4.9 固定化脂肪酶的储存稳定性第81页
        4.4.10 固定化脂肪酶的操作稳定性第81-82页
        4.4.11 Sol-gel法固定化与其他方法的比较第82页
        4.4.12 Sol-gel法包埋发酵液第82页
        4.4.13 固定化酶催化合成生物柴油第82-83页
        4.4.14 固定化酶的形态第83-84页
    4.5 小结第84-85页
第五章 结论与建议第85-87页
    5.1 结论第85-86页
    5.2 创新点第86页
    5.3 问题和建议第86-87页
参考文献第87-92页
致谢第92-93页
研究成果及发表的学术论文第93页

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