| 摘要 | 第15-17页 |
| ABSTRACT | 第17-18页 |
| 符号说明 | 第19-21页 |
| 第一章 白花丹参研究概述 | 第21-32页 |
| 1.1 白花丹参的背景介绍 | 第21页 |
| 1.2 白花丹参的化学成分研究以及主要成分的含量测定 | 第21-25页 |
| 1.2.1 丹参酮类化合物 | 第21-24页 |
| 1.2.2 酚酸类化合物 | 第24-25页 |
| 1.3 白花丹参的临床应用 | 第25-26页 |
| 1.4 主要丹酚酸类成分的药理学研究 | 第26-30页 |
| 1.4.1 对心血管系统的保护作用 | 第26-27页 |
| 1.4.2 对神经系统的保护作用 | 第27-28页 |
| 1.4.3 对肝的保护作用 | 第28页 |
| 1.4.4 抗糖尿病作用 | 第28-29页 |
| 1.4.5 其他 | 第29-30页 |
| 1.5 丹酚酸B与丹酚酸A的生物活性比较 | 第30页 |
| 1.6 丹酚酸B转化为丹酚酸A的研究 | 第30-31页 |
| 1.7 立题依据 | 第31-32页 |
| 第二章 白花丹参药材主要酚酸类成分的含量测定 | 第32-37页 |
| 2.1 引言 | 第32页 |
| 2.2 实验仪器与材料 | 第32页 |
| 2.3 实验方法与结果 | 第32-35页 |
| 2.3.1 色谱条件 | 第32页 |
| 2.3.2 对照品溶液的制备 | 第32页 |
| 2.3.3 供试品溶液的制备 | 第32-33页 |
| 2.3.4 标准曲线的建立 | 第33页 |
| 2.3.5 精密度试验 | 第33-34页 |
| 2.3.6 稳定性试验 | 第34页 |
| 2.3.7 重复性试验 | 第34页 |
| 2.3.8 加样回收率试验 | 第34页 |
| 2.3.9 样品含量测定结果 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论与总结 | 第35-37页 |
| 第三章 白花丹参药材中丹酚酸B转化为丹酚酸A的工艺研究 | 第37-52页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 实验仪器与材料 | 第37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37-38页 |
| 3.3.1 不同pH值溶液的配制 | 第37页 |
| 3.3.2 丹酚酸B转化为丹酚酸A的药材处理 | 第37-38页 |
| 3.3.3 样品的制备 | 第38页 |
| 3.3.4 HPLC色谱条件 | 第38页 |
| 3.3.5 LC-MS色谱条件 | 第38页 |
| 3.3.6 丹酚酸A的含量测定 | 第38页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第38-50页 |
| 3.4.1 原药材和处理后药材中酚酸类成分的HPLC指纹图谱 | 第38-39页 |
| 3.4.2 处理前白花丹参药材中酚酸类成分的LC-MS定性分析 | 第39-40页 |
| 3.4.3 处理后白花丹参药材中丹酚酸类成分的LC-MS定性分析 | 第40-42页 |
| 3.4.4 丹酚酸B转化为丹酚酸A的工艺研究 | 第42-48页 |
| 3.4.4.1 不同pH值溶液对丹酚酸B转化为丹酚酸A的影响 | 第42-44页 |
| 3.4.4.2 不同反应时间对丹酚酸B转化为丹酚酸A的影响 | 第44-46页 |
| 3.4.4.3 不同反应温度对丹酚酸B转化为丹酚酸A的影响 | 第46-48页 |
| 3.4.5 丹酚酸A的含量 | 第48-50页 |
| 3.4.5.1 标准曲线 | 第48页 |
| 3.4.5.2 精密度试验 | 第48页 |
| 3.4.5.3 稳定性试验 | 第48页 |
| 3.4.5.4 重复性试验 | 第48页 |
| 3.4.5.5 加样回收率实验 | 第48-49页 |
| 3.4.5.6 处理过的药材中丹酚酸A含量 | 第49-50页 |
| 3.5 小结 | 第50-52页 |
| 第四章 丹酚酸A的提取工艺研究 | 第52-57页 |
| 4.1 仪器与材料 | 第52页 |
| 4.2 方法与结果 | 第52-56页 |
| 4.2.1 药材的处理 | 第52页 |
| 4.2.2 丹酚酸A的测定方法 | 第52-54页 |
| 4.2.2.1 色谱条件 | 第52页 |
| 4.2.2.2 标准品溶液制备 | 第52页 |
| 4.2.2.3 供试品溶液制备 | 第52页 |
| 4.2.2.4 标准曲线建立 | 第52-53页 |
| 4.2.2.5 精密度试验 | 第53页 |
| 4.2.2.6 稳定性试验 | 第53-54页 |
| 4.2.2.7 重复性试验 | 第54页 |
| 4.2.3 丹酚酸A提取工艺的研究 | 第54-56页 |
| 4.2.3.1 正交试验设计 | 第54页 |
| 4.2.3.2 结果分析 | 第54-55页 |
| 4.2.3.3 工艺验证 | 第55-56页 |
| 4.3 讨论 | 第56页 |
| 4.4 小结 | 第56-57页 |
| 第五章 处理后白花丹参药材中酚酸类成分的分离与结构鉴定 | 第57-69页 |
| 5.1 前言 | 第57-58页 |
| 5.2 结构鉴定 | 第58-66页 |
| 5.2.1 化合物Ⅰ | 第58-59页 |
| 5.2.2 化合物Ⅱ | 第59-60页 |
| 5.2.3 化合物Ⅲ | 第60-61页 |
| 5.2.4 化合物Ⅳ | 第61-62页 |
| 5.2.5 化合物Ⅴ | 第62-63页 |
| 5.2.6 化合物Ⅵ | 第63-65页 |
| 5.2.7 化合物Ⅶ | 第65-66页 |
| 5.3 提取与分离 | 第66-67页 |
| 5.3.1 实验材料与仪器 | 第66页 |
| 5.3.2 提取物的制备 | 第66页 |
| 5.3.3 成分的分离 | 第66-67页 |
| 5.4 化合物理化性质及波谱数据 | 第67-68页 |
| 5.5 小结 | 第68-69页 |
| 第六章 丹酚酸A、丹酚酸C和迷迭香酸抑制TNF-α诱导的人体主动脉内皮细胞炎症反应及机制的研究 | 第69-90页 |
| 6.1 引言 | 第69-70页 |
| 6.2 实验材料 | 第70-71页 |
| 6.2.1 细胞系 | 第70页 |
| 6.2.2 主要仪器 | 第70页 |
| 6.2.3 主要试剂 | 第70-71页 |
| 6.3 实验方法 | 第71-77页 |
| 6.3.1 细胞培养 | 第71页 |
| 6.3.1.1 人主动脉内皮细胞 | 第71页 |
| 6.3.1.2 U937单核细胞 | 第71页 |
| 6.3.2 DHE检测ROS的产量 | 第71-72页 |
| 6.3.2.1 实验原理 | 第71页 |
| 6.3.2.2 实验步骤 | 第71-72页 |
| 6.3.3 细胞黏附实验 | 第72页 |
| 6.3.3.1 实验原理 | 第72页 |
| 6.3.3.2 实验步骤 | 第72页 |
| 6.3.4 RT-PCR法检测HAECs中ICAM-1、VCAM-1、IL-6、MCP-1、P-selectin、RAGE和NF-κB的mRNA表达 | 第72-74页 |
| 6.3.4.1 各目的基因和内参的引物序列 | 第72-73页 |
| 6.3.4.2 总RNA的提取 | 第73页 |
| 6.3.4.3 cDNA第一链的合成 | 第73-74页 |
| 6.3.4.4 Re Time PCR | 第74页 |
| 6.3.5 Western blot法检测人主动脉内皮细胞ICAM-1、VCAM-1、P-selectin、RAGE和NF-κB蛋白的表达 | 第74-76页 |
| 6.3.5.1 细胞裂解及总蛋白提取 | 第74页 |
| 6.3.5.2 蛋白质浓度的测定 | 第74-75页 |
| 6.3.5.3 SDS-PAGE电泳 | 第75页 |
| 6.3.5.4 转膜 | 第75页 |
| 6.3.5.5 膜的封闭 | 第75-76页 |
| 6.3.5.6 抗体孵育 | 第76页 |
| 6.3.5.7 显影 | 第76页 |
| 6.3.6 ELISA法检测细胞培养液中IL-6和MCP-1蛋白表达水平 | 第76-77页 |
| 6.3.6.1 实验原理 | 第76页 |
| 6.3.6.2 实验步骤 | 第76-77页 |
| 6.3.7 细胞免疫组化 | 第77页 |
| 6.3.8 统计学处理 | 第77页 |
| 6.4 实验结果 | 第77-88页 |
| 6.4.1 人主动脉内皮细胞形态 | 第77页 |
| 6.4.2 SalA、SalC和RA分别抑制TNF-α诱导的HAECs中ROS的表达 | 第77-78页 |
| 6.4.3 SalA、SalC和RA分别抑制TNF-α诱导的HAECs与U937细胞的粘附作用 | 第78-79页 |
| 6.4.4 SalA、SalC和RA分别抑制HAECs中VCAM-1,RAGE和NF-κB的表达 | 第79-83页 |
| 6.4.4.1 不同浓度的SalA、SalC和RA对TNF-α诱导的HAECs中VCAM-1,RAGE和NF-κB蛋白表达的抑制作用 | 第79-81页 |
| 6.4.4.2 不同浓度的SalA、SalC和RA对TNF-α诱导的HAECs中VCAM-1,RAGE和NF-κB mRNA表达的抑制作用 | 第81-83页 |
| 6.4.5 SalA、SalC和RA分别抑制HAECs中ICAM-1和P-selectin的表达 | 第83-85页 |
| 6.4.5.1 不同浓度的SalA、SalC和RA对TNF-α诱导的HAECs中ICAM-1和P-selectin蛋白表达的抑制作用 | 第83-84页 |
| 6.4.5.2 不同浓度的SalA、SalC和RA对TNF-α诱导的HAECs中ICAM-1和P-selectin mRNA表达的抑制作用 | 第84-85页 |
| 6.4.6 SalA、Sal C和RA分别抑制HAECs中IL-6和MCP-1的表达 | 第85-88页 |
| 6.4.6.1 不同浓度的SalA、SalC和RA对TNF-α诱导的HAECs中IL-6和MCP-1蛋白表达的抑制作用 | 第85-87页 |
| 6.4.6.2 不同浓度的SalA、SalC和RA对TNF-α诱导的HAECs中IL-6和MCP-1 mRNA表达的抑制作用 | 第87-88页 |
| 6.5 讨论与总结 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第95-96页 |
| 附录:化合物图谱 | 第96-103页 |
| 附件 | 第103页 |
