摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-13页 |
综述部分 | 第13-31页 |
第一章 多潜能干细胞研究概述 | 第13-25页 |
·多潜能干细胞概述 | 第13页 |
·多潜能干细胞中常用的名词概念 | 第13-14页 |
·细胞重编程研究概况 | 第14-15页 |
·多潜能干细胞的诱导方法 | 第15-19页 |
·多潜能干细胞重编程的步骤 | 第15-16页 |
·多潜能干细胞诱导的策略 | 第16-19页 |
·多潜能干细胞研究进展 | 第19-22页 |
·疾病特异性iPSCs 在医学研究和治疗中的应用 | 第22-24页 |
·多潜能干细胞存在的问题 | 第24页 |
·多潜能干细胞的应用前景 | 第24-25页 |
第二章 胚胎干细胞体外培养体系概述 | 第25-31页 |
·胚胎干细胞概论 | 第25页 |
·胚胎干细胞的主要培养体系 | 第25-28页 |
·胚胎干细胞的传代方法 | 第26页 |
·胚胎干细胞常用的培养体系 | 第26-28页 |
·Rho-激酶极其抑制剂Y27632 的研究概述 | 第28-29页 |
·Rho-激酶及其功能 | 第28页 |
·Rho-激酶抑制剂Y27632 的作用机制和应用 | 第28-29页 |
·影响胚胎干细胞体外培养的因素 | 第29-31页 |
·培养液 | 第29页 |
·添加物 | 第29-31页 |
实验研究 | 第31-73页 |
第三章 提高逆转录病毒共转染效率的研究 | 第31-39页 |
·引言 | 第31页 |
·材料与方法 | 第31-32页 |
·细胞培养 | 第31-32页 |
·逆转录病毒载体的构建 | 第32页 |
·逆转录病毒的生产 | 第32页 |
·感染靶细胞 | 第32页 |
·病毒液的超速离心浓缩 | 第32页 |
·试验设计 | 第32-33页 |
·统计分析 | 第33页 |
·结果 | 第33-37页 |
·离心方法对逆转录病毒感染PHF 感染效率的影响 | 第33-34页 |
·不同方法对病毒感染PHF 共转染效率的影响 | 第34-36页 |
·不同方法对病毒感染3T3 共转染效率的影响 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
·结论 | 第38-39页 |
第四章 狨猴多潜能干细胞(miPSCs)的诱导、鉴定及生物学特性 | 第39-50页 |
·引言 | 第39页 |
·材料与方法 | 第39-42页 |
·试验动物 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39-40页 |
·主要仪器设备 | 第40页 |
·主要溶液配制 | 第40页 |
·新生狨猴皮肤成纤维细胞的培养以及逆转录病毒载体的构建 | 第40页 |
·miPSCs 的诱导及分离培养 | 第40-41页 |
·miPSCs 的鉴定及生物学特性 | 第41-42页 |
·结果 | 第42-48页 |
·狨猴皮肤成纤维细胞重编程为miPSCs | 第42-45页 |
·miPSCs 多能性相关基因的表达 | 第45-46页 |
·miPSCs 向三个胚层组织细胞的分化 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
·结论 | 第49-50页 |
第五章 狨猴多潜能干细胞(miPSCs)无饲养层培养体系的建立 | 第50-62页 |
·引言 | 第50-51页 |
·材料与方法 | 第51-53页 |
·试验动物 | 第51页 |
·主要试剂 | 第51页 |
·主要仪器设备 | 第51页 |
·主要溶液配制 | 第51页 |
·1% 基质胶(Matrigel)包被的培养皿的制备 | 第51页 |
·miPSCs 的传代培养 | 第51-52页 |
·miPSCs 的冷冻与复苏 | 第52页 |
·碱性磷酸酶(AKP)染色鉴定 | 第52页 |
·免疫荧光细胞化学 | 第52页 |
·实时定量PCR(qPCR)检测miPSCs Oct4,Sox2 和Nanog 的表达 | 第52-53页 |
·核型分析 | 第53页 |
·体外诱导神经细胞试验 | 第53页 |
·动物畸胎瘤试验 | 第53页 |
·试验设计 | 第53-54页 |
·结果 | 第54-60页 |
·以MEF 为条件培养液,不同培养条件对miPSCs 的影响 | 第54页 |
·以STO 和MEF 为条件培养液,比较其对miPSCs 体外增殖以及生物学特性的影响 | 第54-58页 |
·动物畸胎瘤试验和体外诱导神经细胞试验 | 第58-60页 |
·讨论 | 第60-61页 |
·结论 | 第61-62页 |
第六章 Rho-激酶抑制剂Y27632 促进miPSCs 的存活与增殖 | 第62-73页 |
·引言 | 第62页 |
·材料方法 | 第62-65页 |
·材料 | 第62-63页 |
·方法 | 第63-65页 |
·试验设计 | 第65页 |
·结果 | 第65-71页 |
·Y27632 对miPSCs 的影响 | 第65-69页 |
·10 μmol/L Y27632 处理 miPSCs 12 h 与 10 μmol/L Y27632 一直添加于培养液中的 比较 | 第69-71页 |
·讨论 | 第71-72页 |
·结论 | 第72-73页 |
全文结论 | 第73-74页 |
主要创新点和下一步研究方向 | 第74-75页 |
主要创新点 | 第74页 |
下一步研究方向 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-90页 |
缩略词 | 第90-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
作者简介 | 第92-93页 |