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诱导新生狨猴皮肤成纤维细胞来源的多潜能干细胞的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
综述部分第13-31页
 第一章 多潜能干细胞研究概述第13-25页
   ·多潜能干细胞概述第13页
   ·多潜能干细胞中常用的名词概念第13-14页
   ·细胞重编程研究概况第14-15页
   ·多潜能干细胞的诱导方法第15-19页
     ·多潜能干细胞重编程的步骤第15-16页
     ·多潜能干细胞诱导的策略第16-19页
   ·多潜能干细胞研究进展第19-22页
   ·疾病特异性iPSCs 在医学研究和治疗中的应用第22-24页
   ·多潜能干细胞存在的问题第24页
   ·多潜能干细胞的应用前景第24-25页
 第二章 胚胎干细胞体外培养体系概述第25-31页
   ·胚胎干细胞概论第25页
   ·胚胎干细胞的主要培养体系第25-28页
     ·胚胎干细胞的传代方法第26页
     ·胚胎干细胞常用的培养体系第26-28页
   ·Rho-激酶极其抑制剂Y27632 的研究概述第28-29页
     ·Rho-激酶及其功能第28页
     ·Rho-激酶抑制剂Y27632 的作用机制和应用第28-29页
   ·影响胚胎干细胞体外培养的因素第29-31页
     ·培养液第29页
     ·添加物第29-31页
实验研究第31-73页
 第三章 提高逆转录病毒共转染效率的研究第31-39页
   ·引言第31页
   ·材料与方法第31-32页
     ·细胞培养第31-32页
     ·逆转录病毒载体的构建第32页
     ·逆转录病毒的生产第32页
     ·感染靶细胞第32页
     ·病毒液的超速离心浓缩第32页
   ·试验设计第32-33页
   ·统计分析第33页
   ·结果第33-37页
     ·离心方法对逆转录病毒感染PHF 感染效率的影响第33-34页
     ·不同方法对病毒感染PHF 共转染效率的影响第34-36页
     ·不同方法对病毒感染3T3 共转染效率的影响第36-37页
   ·讨论第37-38页
   ·结论第38-39页
 第四章 狨猴多潜能干细胞(miPSCs)的诱导、鉴定及生物学特性第39-50页
   ·引言第39页
   ·材料与方法第39-42页
     ·试验动物第39页
     ·主要试剂第39-40页
     ·主要仪器设备第40页
     ·主要溶液配制第40页
     ·新生狨猴皮肤成纤维细胞的培养以及逆转录病毒载体的构建第40页
     ·miPSCs 的诱导及分离培养第40-41页
     ·miPSCs 的鉴定及生物学特性第41-42页
   ·结果第42-48页
     ·狨猴皮肤成纤维细胞重编程为miPSCs第42-45页
     ·miPSCs 多能性相关基因的表达第45-46页
     ·miPSCs 向三个胚层组织细胞的分化第46-48页
   ·讨论第48-49页
   ·结论第49-50页
 第五章 狨猴多潜能干细胞(miPSCs)无饲养层培养体系的建立第50-62页
   ·引言第50-51页
   ·材料与方法第51-53页
     ·试验动物第51页
     ·主要试剂第51页
     ·主要仪器设备第51页
     ·主要溶液配制第51页
     ·1% 基质胶(Matrigel)包被的培养皿的制备第51页
     ·miPSCs 的传代培养第51-52页
     ·miPSCs 的冷冻与复苏第52页
     ·碱性磷酸酶(AKP)染色鉴定第52页
     ·免疫荧光细胞化学第52页
     ·实时定量PCR(qPCR)检测miPSCs Oct4,Sox2 和Nanog 的表达第52-53页
     ·核型分析第53页
     ·体外诱导神经细胞试验第53页
     ·动物畸胎瘤试验第53页
   ·试验设计第53-54页
   ·结果第54-60页
     ·以MEF 为条件培养液,不同培养条件对miPSCs 的影响第54页
     ·以STO 和MEF 为条件培养液,比较其对miPSCs 体外增殖以及生物学特性的影响第54-58页
     ·动物畸胎瘤试验和体外诱导神经细胞试验第58-60页
   ·讨论第60-61页
   ·结论第61-62页
 第六章 Rho-激酶抑制剂Y27632 促进miPSCs 的存活与增殖第62-73页
   ·引言第62页
   ·材料方法第62-65页
     ·材料第62-63页
     ·方法第63-65页
     ·试验设计第65页
   ·结果第65-71页
     ·Y27632 对miPSCs 的影响第65-69页
     ·10 μmol/L Y27632 处理 miPSCs 12 h 与 10 μmol/L Y27632 一直添加于培养液中的 比较第69-71页
   ·讨论第71-72页
   ·结论第72-73页
全文结论第73-74页
主要创新点和下一步研究方向第74-75页
 主要创新点第74页
 下一步研究方向第74-75页
参考文献第75-90页
缩略词第90-91页
致谢第91-92页
作者简介第92-93页

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